Để xác định được thành phần loài ve ký sinh ở bò, chúng tôi đã tiến hành thu thập mẫu ve từ đàn bò sữa và bò vàng địa phương. Mẫu ve được bảo quản và định loại tại phòng thí nghiệm bộ môn Ký sinh trùng – Khoa Thú y – Học viện Nông nghiệp Việt Nam theo khóa định loại của các tác giả Brumpt (1919) và Walker (2014).
81
Dựa vào đặc điểm hình thái phân loại ve theo khóa phân loại của Brumpt (1919) và Walker (2014). Chúng tôi đã tiến hành đo, chụp ảnh, vẽ mô tả và đã xác định được 2 loài ve ký sinh ở bò huyện Ba Vì, thành phố Hà Nội như sau:
Loài Rhipicephalus (Boophilus) annulatus
Hình thái mẫu 1 được soi dưới kính hiển vi soi nổi, chụp ảnh, vẽ và mô tả ở hình 4.19, 4.20, 4.21, 4.22.
Đặc điểm hình thái cấu tạo của ve cái - Đầu giả ngắn
- Có mắt, có mai lưng phủ 1 3 cơ thể - Có mai cạnh hậu môn
- Hố cảm giác hình ovan - Trụ răng dạng cột 4+4 - Xúc biện dài và cong - Gốc háng chân 1 không rõ - Gốc háng 2 và 3 là không có
- Vùng sau lỗ sinh dục có hình chữ U.
Hình 4.19. Ve Rhipicephalus (Boophilus) annulatus _ cái (mặt bụng)
82
Hình 4.20. Ve Rhipicephalus (Boophilus) annulatus _ cái (mặt lƣng)
1-Đốt chân, 2- Xúc biện dài cong, 3- Mai lưng, 4- Mắt, 5- Mai hậu môn- không có mấu đuôi
Hình thái cấu tạo của ve đực - Đầu giả ngắn
- Có mắt
- Mai lưng phủ toàn phần - Gốc háng chân 1 ngắn
- Tấm mai hậu môn 3 không rõ hình đĩa
- Tấm mai hậu môn 4 rõ hình đĩa
83
Hình 4.21. Ve đực Rhipicephalus (Boophilus) annulatus _ đực (mặt bụng)
1- Gốc háng chân 1 ngắn, 2- Bàn thở, 3- Tấm cạnh hậu môn
Hình 4.22. Ve Rhipicephalus (Boophilus) annulatus _ đực (mặt lƣng)
84
Loài Rhipicephalus (Boophilus) microplus
Hình thái mẫu 2 được soi dưới kính hiển vi soi nổi, chụp ảnh, vẽ và mô tả ở hình 4.23, 4.24, 4.25, 4.26.
* Đặc điểm hình thái cấu tạo của ve cái - Đầu giả ngắn - Có mắt ở mai lưng - Hố cảm giác hình o van - Trụ, răng dạng cột 4+4 - Gốc xúc biện ngắn và cong - Gốc háng chân 1 không rõ - Gốc háng chân 2 và 3 rõ ràng - Vùng sau lỗ sinh dục có hình chữ U
Hình 4.23. Ve Rhipicephalus (Boophilus) microplus_ cái (mặt bụng)
Hình thái mặt bụng ve Microplus cái:
85
Hình 4.24. Rhipicephalus (Boophilus) microplus _cái (mặt lƣng)
1- Đốt chân, 2- Xúc biện, 3- Đáy đầu giả, 4- Khớp chân 5- Mắt, 6- Mai lưng, 7- Mai hậu môn
* Đặc điểm hình thái cấu tạo ve đực - Đầu giả ngắn
- Có mắt ở mai lưng - Mai lưng phủ toàn thân - Hố cảm giác hình ovan - Gốc háng chân 1 dài
- Tấm mai hậu môn 3 hình đĩa không rõ - Tấm mai hậu môn 4 rõ hình đĩa
- Có mấu đuôi.
86
Hình 4.25. Ve Rhipicephalus (Boophilus) microplus _ đực (mặt lƣng)
1- Đốt chân, 2- Xúc biện, 3- Khớp chân, 4- Mấu đuôi
Hình 4.26. Ve Rhipicephalus (Boophilus) microplus_ đực (mặt bụng)
87
Hình 4.27. Ve Rhipicephalus (Boophilus) microplus_đực(mặt bụng)
88
Hình 4.29. Ve Rhipicephalus (Boophilus) microplus_đực (mặt lƣng)
Hình 4.30. Ve Rhipicephalus (Boophilus) microplus_cái (mặt bụng)
89
Hình 4.32. Ve Rhipicephalus (Boophilus) annulatus _đực (mặt lƣng)
Từ kết quả phân loại vị trí của 2 loài ve trong hệ thống phân loại động vật như sau:
Giới (regmum) Animalia Ngành (phylum) Arthropada
Dưới ngành (Subphylum) Chelicerata Lớp (Class) Arachnida
Phân lớp (Subclass) Acari
Liên bộ (Superordo) Parasitiformes Bộ (Ordo) Ixodida
Liên họ (Supefamiha) Ixodoidea Họ (Famiha) Ixodidae
Chi (Genus) Rhipicephalus (Boophilus)
Loài (Species) Rhipicephalus (Boophilus) annulatus Rhipicephalus (Boophilus) microplus
Kết quả về thành phần loài ve ký sinh ở bò nuôi tại Ba Vì, thành phố Hà Nội được thể hiện ở bảng 4.21.
90
Bảng 4.21. Thành phần loài ve ký sinh trên bò nuôi tại huyện Ba Vì – thành phố Hà Nội
Tên loài ve Số mẫu ve
(con)
Số ve từng loài (con)
Tỷ lệ (%)
Rhipicephalus (Boophilus) microplus
1000 839 83,9
a
Rhipicephalus (Boophilus) annulatus 161 16,1b
Bảng 4.21 cho thấy, ve ký sinh trên đàn bò nuôi tại huyện Ba Vì, thành phố Hà Nội gồm có 2 loài, đó là Rhipicephalus (Boophilus) microplus và
Rhipicephalus (Boophilus) annulatus. Trong đó loài Rhipicephalus (Boophilus) microplus chiếm tỉ lệ 83,9%, loài Rhipicephalus (Boophilus) microplus là loài ve phổ biến hơn loài Rhipicephalus (Boophilus) annulatus.
Việt Nam nghiên cứu về loài ve ký sinh trên bò đã có nhiều công trình nghiên cứu. Tác giả Trịnh Văn Thịnh & Dương Công Thuận (1962) nghiên cứu về ve ký sinh đã cho biết ve Boophilus annulatus var.austradis phân bố ở miền Bắc Việt Nam…
Phan Trọng Cung & cs. (1977) nghiên cứu ở miền Bắc Việt Nam cho biết ve Boophilus microplus thường gặp trên 5 loài động vật hoang dã và 5 loài gia súc gia cầm, nhưng vật chủ ưa thích nhất vẫn là bò, nhất là bò lai hoặc bò nhập nội. Phan Trọng Cung & cs. (1977) công bố trong ve bét và côn trùng ký sinh ở Việt Nam – tập 1 nhận xét ở Việt Nam loài thường gặp là Rhipicephalus Koch, 1844- đại diện là loài Rhipicephalus sanguineus và loài Boophilus curtice, 1894 – đại diện là loài Boophilus annulatus (Say, 1804).
Phan Lục & Phạm Văn Diên cũng đã công bố về sự lưu hành của ve
Boophilus microplus ở Đăk Lăk, Việt Nam. Gần đây, Nguyễn Hữu Hưng & cs. (2014) nghiên cứu trên bò nuôi tại 2 huyện Tri Tôn và Tịnh Biên, kết quả xác định 2 loài thuộc họ ve cứng Ixodidae là Boophilus microplus, Rhipicephalus sanguineus.
Nghiên cứu của chúng tôi về thành phần loài ve ký sinh ở bò nuôi tại huyện Ba Vì, thành phố Hà Nội xác định được 2 loài ve cứng là Rhipicephalus (Boophilus) microplus và Rhipicephalus (Boophilus) annulatus.
91
4.5. MỐI TƢƠNG QUAN GIỮA NHIỄM VE VÀ NHIỄM KÝ SINH TRÙNG
ĐƢỜNG MÁU Ở BÒ NUÔI TẠI HUYỆN BA VÌ, THÀNH PHỐ HÀ NỘI
Để đánh giá mối tương quan giữa 2 biến định tính nhiễm ve có nguy cơ bị nhiễm ký sinh trùng hay không, chúng tôi tiến hành sử dụng bảng so sánh, đánh giá các chỉ số số tần suất OR, khoảng tin cậy với độ tin cậy 95 và ý nghĩa P. Kết quả được trình bày ở bảng 4.22.
Bảng 4.22. Mối liên quan giữa nhiễm ve và nhiễm ký sinh trùng đƣờng máu
Yếu tố Ve Tổng OR CI 95%
Có Không
Anaplasma spp. Không 165 769 934 16.79 12,33-22,87
Có 263 73 336
Tổng 428 842 1270
Nếu OR > 1 điều đó có nghĩa tỷ lệ bị nhiễm Anaplasma spp trong nhóm nhiễm ve cao hơn tỷ lệ nhiễm Anaplasma spp ở nhóm không nhiễm ve.
Nếu OR = 1 điều đó có nghĩa tỷ lệ bị nhiễm Anaplasma spp trong nhóm nhiễm ve tương đương tỷ lệ nhiễm Anaplasma spp ở nhóm không nhiễm ve.
Nếu OR < 1 điều đó có nghĩa tỷ lệ bị nhiễm Anaplasma spp trong nhóm nhiễm ve thấp hơn tỷ lệ nhiễm Anaplasma spp ở nhóm không nhiễm ve.
Kết quả ở bảng 4.22 cho thấy, tỷ số chênh OR = 16,79 > 1 nên kết luận: tỷ lệ bị nhiễm Anaplasma spp trong nhóm nhiễm ve cao hơn tỷ lệ nhiễm Anaplasma
spp ở nhóm không nhiễm ve là 16,79 lần.
Lower 95% CI: Giá trị tới hạn dưới khoảng tin cậy 95% của giá trị OR Upper 95% CI: Giá trị tới hạn trên khoảng tin cậy 95% của giá trị OR Giá trị OR không có ý nghĩa thống kê (P>0,05) nếu khoảng tin cậy có chứa số 0 và ngược lại có ý nghĩa thống kê (P<0,05) nếu khoảng tin cậy không chứa số 0. Như vậy, trong kết quả nêu trên khoảng tin cậy (12,33; 22,87) không chứa số không (0) vì vậy kết luận giá trị OR có ý nghĩa thống kê (P < 0,05).
Từ kết quả phân tích số liệu hồi quy Logistic đánh giá mối liên hệ giữa 2 yếu tố, kết quả dự báo về mối liên quan giữa nhiễm ve và nhiễm ký sinh trùng đường máu theo phương trình dự báo là:
Y= 2,28xX -1.54 Trong đó: Y là tỷ lệ nhiễm Ve
92
Hình 4.33. Biểu đồ biểu minh họa mối liên hệ mối liên quan giữa nhiễm ve và nhiễm ký sinh trùng đƣờng máu
4.6. THỬ NGHIỆM HIỆU LỰC DIỆT VE CỦA HỢP CHẤT PYRETHROID
Với xu thế phát triển kinh tế hiện nay, việc sử dụng các hợp chất có nguồn gốc hữu cơ thân thiện với môi trường, độc với ký sinh trùng và ít độc với vật chủ. Để có thể phát triển loại thuốc diệt ve ký sinh ở bò trong tương lai đáp ứng được các yêu cầu trên, chúng tôi khảo sát hiệu lực diệt các giai đoạn của ve ký sinh ở bò từ hợp chất hữu cơ bán tổng hợp Pyrethroid. Trong phạm vi nghiên cứu của đề tài chúng tôi nghiên cứu dẫn xuất của Prethroid đó là Permethrin.
4.6.1. Hiệu lực diệt các giai đoạn của ve bò Rhipicepahus (Boophilus) microplus
của hợp chất Permethrin trong phòng thí nghiệm
Kết quả thử nghiệm hợp chất hợp chất Pyrethroid diệt ve trong phòng thí nghiệm được thể hiện qua bảng 4.23.
Kết quả ở bảng 4.23 cho thấy:
nồng độ 1% với phương pháp nhúng qua dung dịch thuốc, theo dõi sau 24 giờ không thấy ve trưởng thành nào chết. Sau 24 giờ có 10% ve chết. Sau 24 giờ và 48 giờ tỷ lệ thiếu trùng và ve trưởng thành chết tuyệt đối 100%.
nồng độ thuốc 3%, sau 24 giờ có 10% ve chết. Sau 48 giờ có 23,33% ve trưởng thành chết. Sau 24 giờ và 48 giờ tỷ lệ thiếu trùng và âu trùng ve đều chết 100%.
93
Bảng 4.23. Hiệu lực diệt ve bò Boophilus (Rhipicepahus) microplus của hợp chất Permethrin trong phòng thí nghiệm
Số lƣợng (ấu trùng, thiếu trùng và ve trƣởng thành) Nồng độ (%) Phƣơng pháp Tỉ lệ ve trƣởng thành chết (%) Tỉ lệ thiếu trùng chết ( ) Tỉ lệ ấu trùng chết ( ) Tỷ lệ ve chết ở lô đối chứng (%) Sau 24 giờ Sau 48 giờ Sau 24 giờ Sau 48 giờ Sau 24 giờ Sau 48 giờ 30 1 Nhúng 0 10 100 100 100 100 0 30 3 10 23.33 100 100 100 100 30 5 16,66 30 100 100 100 100 30 6 20 43.33 100 100 100 100 30 7 23.33 46,66 100 100 100 100 30 8 33.33 50 100 100 100 100 30 9 53,33 56.67 100 100 100 100 30 10 63.33 70 100 100 100 100
nồng độ 5%, sau 24 giờ tỷ lệ ve trưởng thành chết là 16,66%. Sau 48 giờ, tỷ lệ ve chết là 30%. Thiếu trùng và ấu trùng đều chết 100%.
nồng độ thuốc 6%, sau 24 giờ có 26 ve trưởng thành chết, sau 48 giờ có 43,33% ve chết. Tỷ lệ thiếu trùng và ấu trùng chết là 100%.
nồng độ 7%, sau 24 giờ có 23,33 ve trưởng thành chết, sau 48 giờ có 46,66 ve trưởng thành chết. Tỷ lệ chết của thiếu trùng và ấu trùng ve là 100%.
nồng độ 8%, tỷ lệ ve trưởng thành chết sau 24 giờ là 33,33%; sau 48 giờ là 50%. Sau 24-48 giờ tỷ lệ thiếu trùng và ấu trùng ve là 100%.
94
nồng độ 9%, tỷ lệ ve trưởng thành chết sau 24 và 48 giờ lần lượt là 53,33% và 56,57%. Tỷ lệ thiếu trùng và ấu trùng chết là 100%.
nồng độ thuốc 10%, tỷ lệ ve trưởng thành chết là 63,33% sau 24 giờ. Sau 48 giờ tỷ lệ ve chết là 70%. Thiếu trùng và ấu trùng đều chết 100%.
Từ thực nghiệm cho thấy, ở tất cả các nồng độ thuốc từ 1 đến 10%, sau khi nhúng vào thuốc 24 giờ và 48 giờ tất cả các ấu trùng và thiếu trùng đều chết 100%. Tuy nhiên tỷ lệ ve trưởng thành chết tăng dần theo nồng độ thuốc và đạt tỷ lệ cao nhất ở nồng độ thuốc 10%. Trong khi ở lô đối chứng ve trưởng thành, thiếu trùng và ấu trùng ve sống 100%.
Thực nghiệm cho thấy, hợp chất bán tổng hợp Permethrin có tác dụng diệt các giai đoạn của ve: giai đoạn trưởng thành, thiếu trùng và ấu trùng ve. Hiệu lực cao nhất diệt ve trưởng thành là 70%, hiệu lực diệt thiếu trùng và ấu trùng ve là 100%.
Tác dụng diệt ve trưởng thành, thiếu trùng và ấu trùng ve ký sinh ở trên bò là do hóa chất đã tác động vào hệ thống thần kinh với kích thích mạnh vào kênh ion Natri trên màng thần kinh, gây hiện tượng co giật ở các giai đoạn của ve và là nguyên nhân làm ve trưởng thành, thiếu trùng và ấu trùng của ve chết (Viện Sốt rét- Ký sinh trùng và Côn trùng Quy Nhơn .
Sở dĩ tỷ lệ thiếu trùng và ấu trùng ve chết 100% ở tất cả các nồng độ thuốc, theo chúng tôi có thể do giai đoạn thiếu trùng và ấu trùng ve có lớp vỏ kitin bao bọc mới chỉ ở 1 3 cơ thể, lớp da mỏng nên hóa chất có thể nhanh chóng xâm nhập vào trong cơ thể và tác động nhanh tới hệ thần kinh trương ương. Nhờ đó khiến cho tỷ lệ thiếu trùng và ấu trùng chết tuyệt đối 100%.
Ve trưởng thành có lẽ do lớp kitin đã phát triển đầy đủ và đặc biệt ve đực có lớp kitin bao phủ toàn phần và dầy cùng với các màng khác trên cơ thể lớp kitin cũng đã hoàn chỉnh nên thuốc khó ngấm nhanh vào cơ thể. Phần thuốc tác động chủ yếu lên ve trưởng thành có lẽ qua hệ thống lỗ thở. Mặt khác do ve đã trưởng thành cơ thể đã có khả năng đề kháng mạnh với các yếu tố bất lợi nên tỷ lệ ve chết tăng dần theo nồng độ thuốc.
95
4.6.2. Thử nghiệm khả năng diệt ve trên bò của hợp chất thuốc Permethrin ở nồng độ 5 nồng độ 5
Sau thời gian thử nghiệm hiệu lực diệt ve của các nồng độ thuốc permethrin trong phòng thí nghiệm, chúng tôi đã lựa chọn nồng độ thuốc 5 để thực nghiệm trên bò nhiễm ve Rhipicepahus (Boophilus) spp. nhằm đánh giá hiệu lực của thuốc đối với các giai đoạn của ve ký sinh trên đàn bò cũng như những ảnh hưởng của thuốc đối với cơ thể bò.
Để đánh giá ảnh hưởng của thuốc tới sức khỏe của bò, chúng tôi tiến hành theo dõi một số chỉ tiêu sinh lý của những bò được chọn làm thí nghiệm trước khi dùng thuốc diệt ve. Kết quả được trình bày ở bảng 4.24.
Bảng 4.24. Một số chỉ tiêu lâm sàng của bò thí nghiệm trƣớc khi dùng thuốc
Số hiệu bò Loại bò Khối lƣợng (kg) Một số chỉ tiêu lâm sàng Ghi chú Thân nhiệt (oC) Tần số tim (lần/phút) Tần số hô hấp Trạng thái thần kinh 1 Bò vàng Việt Nam 186 38,3 62 21 Bình thường Nhiễm ve 2 166 38,5 68 20 Bình thường 3 138 38,2 61 22 Bình thường
Kết quả ở bảng 4.24 cho thấy 3 bò lựa chọn thử nghiệm thuốc diệt các giai đoạn của ve đều đạt các tiêu chí là bò nhiễm các giai đoạn của ve ở mức cao, các chỉ tiêu lâm sàng cơ bản bình thường đáp ứng được nhu cầu để thử nghiệm thuốc. Để xác định hiệu lực của thuốc diệt các giai đoạn của ve trên cơ thể bò, chúng tôi bước đầu đã phun thuốc ở nồng độ 5% trên những vùng có ve ký sinh trừ vùng đầu, mắt và mũi bò ở hai lần thí nghiệm.
Thực hiện thử nghiệm phun lần 1 và lặp lại thí nghiệm phun lần 2 với 3 cá thể bò. Kết quả được trình bày ở bảng 4.25.
96
Bảng 4.25. Hiệu lực diệt các giai đoạn ve trên cơ thể bò của hợp chất Permethrin lần phun thứ nhất ở thí nghiệm 1
Số hiệu bò Phƣơng pháp diệt Nồng độ Dung tích hóa chất/ bò Các giai đoạn ve Số lƣợng ve các giai đoạn Số ve chết (con) Tỉ lệ chết (%) Sau 24 giờ Sau 48 giờ Sau 24 giờ Sau 48 giờ 1 Phun bằng bình áp suất 5% 1 lít/bò Trưởng thành 25 21 23 84 92 Thiếu trùng 75 75 75 100 100 Ấu trùng 15 15 15 100 100 2 Trưởng thành 35 30 32 85.7 91,4 Thiếu trùng 105 105 105 100 100 Ấu trùng 23 23 23 100 100 3 Trưởng thành 25 18 20 72 80 Thiếu trung 57 57 57 100 100 Ấu trùng 33 33 33 100 100
nồng độ hóa chất 5% phun dung tích 1lit/bò, thực nghiệm trên 3 bò bị nhiễm ở các giai đoạn của ve đều cho kết quả đạt được là diệt 100% thiếu trùng và ấu