CHƯƠNG 3 KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN
3.3. ĐẶC ĐIỂM CẤU TRÚC CỦA GLYCOSAMINOGLYCAN TỪ
3.3.1.2. Phổ cộng hưởng từ hạt nhân 1H-NMR của phân đoạn F1
Tương tự như phổ NMR của fucosylated chondroitin sulfate của các loài hải sâm khác trên thế giới đã được công bố [62, 66, 67]. Phổ 1H-NMR của phân
đoạn F1 cũng rất phức tạp với nhiều vùng tín hiệu khác nhau, đồng thời các tín hiệu có sự chồng lấn, trùng lặp nhau với độ phân giải rất kém kết quả này là do trong thành phần cấu tạo có chứa đồng thời nhiều gốc đường khác nhau, ngồi ra mỗi gốc đường lại có mức độ sulfate hóa lẫn kiểu liên kết O-glycoside khác nhau. Do vậy, rất khó để có thể giải thích được một cách chi tiết tất cả các tín hiệu trên phổ này. Tuy nhiên, trên phổ 1H-NMR (hình 3.6) của phân đoạn F1 cho ta thấy những vùng tín hiệu đặc trưng của fucosylated chondroitin sulfate, đó là các tín hiệu mạnh của proton H-6 thuộc nhóm metyl (–CH3) vịng fucose,
ở độ dịch chuyển hóa học 1,16-1,44 ppm [5, 6, 68]. Phát hiện thấy sự có mặt của nhóm acetyl vịng GalNAc (CH3CO-) ở vùng tín hiệu 2,08- 2,3ppm [1, 66], kết quả này một lần nữa xác nhận sự có mặt của các gốc đường fucose và N-Acetyl-galactosamin trong phân đoạn này. Các tín hiệu trong vùng độ dịch chuyển hóa học 5,67ppm cho ta nhận biết được gốc uronic acid, vùng tín hiệu ở độ dịch chuyển hóa học 5,1-5,4 ppm đặc trung cho proton H1 của vòng
pyranose tương ứng với các gốc Fuc (2,4S) ở 5,42ppm; gốc Fuc (4S) ở 5,28ppm và gốc Fuc khơng có gốc sulfate ở 5,10ppm [1, 5, 66, 67], vùng tín hiệu 4,0 ta lại tiếp tục nhận được 2 nhóm vịng GlcA (H4) và GalNAc (H2)[1, 69] và vùng tín hiệu 4,26 là của nhóm vịng GalNAc (H6) [1, 67], vùng tín hiệu 3,63 – 3,77 ppm là vùng tín hiệu của vịng GlcA (H2, H3, H5 ) [1, 67], nhóm các tín hiệu trong vùng 5,1-5,42 ppm ở phổ 1H-NMR (hình 3.6) là các tín hiệu đặc trưng của proton anomeric (H1), trong vùng này xuất hiện 3 nhóm tín hiệu khác so cho thấy sự tồn tại của gốc đường fucose với các mức độ sulfate hóa khác nhau đó là các gốc O-2, 4-di-sulfate, O-3,4-di-sulfate ở 5,42ppm O-4-sulfate ở 5,23 ppm và gốc fucose khơng chứa nhóm sulfate ở 5,1 ppm.[5, 6, 66]
H1-anomeric G lc A -H 2, H 3, H 5 GalNAc-COCH3 H6-α-L-Fucp
Hình 3.6. Phổ 1H-NMR của phân đoạn F1