CHƯƠNG 2 VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
2.2. PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
2.2.1. Tổng hợp hệ copolymer Chitosan-Pluronic
2.2.1.1. Tổng hợp NPC-Pluronic-NPC
Cân 15 gam F127 (12600 gam/mol) cho vào bình cầu 3 cổ 250mL, hút chân khơng trong 1 giờ 30 phút (loại hơi nước). Đồng thời gia nhiệt cho bếp đến khi bếp đạt 80 °C và F127 tan hết. Sau đĩ, khĩa bơm, dẫn khí N2, cho 0,5 gam (0,0024 mol) NPC vào bình cầu và khuấy từ ở nhiệt độ 70-80 °C. Phản ứng thực hiện trong 5 giờ. Dừng gia nhiệt, cho 40 mL THF vào và khuấy ở nhiệt độ phịng.
Dung dịch thu được đem đi tủa trong 250 mL diethyl ether ở nhiệt độ 0 °C, thời gian 3 giờ. Hỗn hợp được lọc hút chân khơng. Sản phẩm thu được tiếp tục được rửa lại với diethyl ether. Sau đĩ, sản phẩm được đem cơ quay để loại hồn tồn dung mơi cịn sĩt lại đến khối lượng khơng đổi. Sản phẩm thu được ở dạng bột cĩ màu trắng mịn, lấy một ít mẫu đem đi đo phổ 1H-NMR để xác định cấu trúc F127 sau khi hoạt hĩa bởi NPC.
2.2.1.2. Tổng hợp NPC-Pluronic-OH
Phương trình hĩa học
Hình 2.2. Phương trình phản ứng tổng hợp NPC-F127-OH
Cho 15 gam NPC-F127-NPC đã cơ quay vào bình 3 cổ, hịa tan với 50 mL THF. Nhỏ giọt 3-amino-1-propanol (0,0012 mol và d=0,982 gam/lit) đã pha lỗng vào dung dịch 50 mL THF, khuấy từ trong 12 giờ ở nhiệt độ phịng.
Dung dịch thu được đem đi tủa trong 250 mL diethyl ether ở nhiệt độ 0 oC, thời gian 3 giờ.
Sau đĩ hỗn hợp được lọc hút chân khơng, sản phẩm được đem đi cơ quay để loại hồn tồn dung mơi cịn sĩt lại đến khối lượng khơng đổi. Sản phẩm thu được cĩ màu trắng mịn, lấy một ít chất rắn đem đi đo phổ 1H-NMR để xác định cấu trúc NPC-F127-NPC sau khi gắn với 3-amino-1-propanol.
2.2.1.3. Tổng hợp hệ copolymer Chitosan-Pluronic (CP)
Phương trình hĩa học
Hình 2.3. Phương trình phản ứng tổng hợp copolymer chitosan- pluronic F127 (CP-F127)
Cân 0,25g Chitosan hồ tan trong nước cất ở mơi trường pH~3 được tạo ra bởi dung dịch HCl 0,1% và khuấy đều trong 24 giờ, điều chỉnh pH về 5,5 rồi đem lưu trữ ở nhiệt độ 4 °C cho phản ứng tiếp theo. NPC–F127–Amin 3,75g hồ tan trong nước cất ở nhiệt độ 4 °C, khuấy khoảng 1 giờ, rồi đem giữ ở nhiệt độ 4 °C trong 24 giờ. Dung dịch NPC- F127- Amin được cho vào dung dịch Chitosan lạnh và khuấy trong 24 giờ ở nhiệt độ phịng và giữ lạnh ít nhất 24 giờ trước khi đem
thẩm tách với mang cellulose (12000-14000 MW). Thẩm tách trong nước cất diễn ra trong khoảng một tuần trước khi đem mẫu đi đơng khơ.