- Nhiệt độ: Theo nghiên cứu của Murashige vào năm 1947, nhiệt độ ảnh hưởng đến sự phân chia tế bào và quá trình trao đổi chất trong mô cấy, ảnh
KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 4.1 Kết quả nghiên cứu khử trùng vật liệu khởi đầu
4.4. Kết quả nghiên cứu ảnh hưởng của BAP đến khả năng tái sinh chồi từ lát cắt vảy củ.
chồi từ lát cắt vảy củ.
Các chất điều hoà sinh trưởng thực vật (phytohormone) là thành phần quan trọng bậc nhất của môi trường nuôi cấy. Nhờ những chất này, các nhà nghiên cứu
đã có thể chủ động điều khiển quá trình phát sinh hình thái của thực vật in vitro. Đặc biệt, cytokinin liên quan chặt chẽ đến quá trình phân bào, duy trì sự trẻ hoá các cơ quan làm giảm hiện tượng ưu thế ngọn, kích thích sự phân hoá mầm chồi từ mô sẹo nuôi cấy. Trong thí nghiệm này, chúng tôi nghiên cứu ảnh hưởng của BAP ở các nồng độ khác nhau 0,1mg/l – 0,3mg/l – 0,5mg/l – 0,7mg/l - 1mg/l đến khả năng tạo chồi từ lát cắt vảy củ Lily.
Kết quả được ghi lại sau 4 tuần theo dõi và được trình bày ở bảng 4.4 và biểu đồ 4.2:
Bảng 4.4. Ảnh hưởng của BAP đến khả năng tái sinh chồi từ lát cắt vảy củ Lilium aziatische “Birthday” (sau 4 tuần nuôi cấy).
Chỉ tiêu Công thức
Hệ số nhân chồi (lần)
Số lá/chồi (lá) Chiều dài chồi (cm) ĐC (0,0mg BAP) 2,3 0,7 0,4 I (0,1mg BAP) 2,8 1,2 0,8 II (0,3mg BAP) 3,0 1,8 0,9 III (0,5mg BAP) 4,6 5,3 2,5 IV (0,7mg BAP) 3,9 3,2 2,0 V (1,0mgBAP) 3,2 2,4 1,1
Biểu đồ 4.2. Ảnh hưởng của BAP đến khả năng tái sinh chồi từ lát cắt vảy củ Lilium aziatische “Birthday” (sau 4 tuần nuôi cấy).
Qua kết quả bảng 4.4 và biểu đồ 4.2 kết hợp với quá trình quan sát thí nghiệm thấy rằng:
Môi trường có bổ sung BAP nồng độ 0,5mg/l cho số lượng chồi nhiều nhất (4,6 chồi/lát cắt vảy củ), chất lượng chồi tốt, đồng đều, to khoẻ, lá nhiều (5,3 lá/chồi, chiều dài chồi trung bình là 2,5cm) và thời gian xuất hiện chồi đầu tiên ngắn (sau 17 ngày nuôi cấy). Còn với môi trường bổ sung BAP ở nồng độ 0,1 – 0,3mg/l cho hệ số nhân thấp (2,8 – 3,0 chồi/lát cắt vảy củ), chồi nhỏ yếu, lá phát triển chậm (chiều dài chồi 0,8 – 0,9cm, 1,2 – 1,8 lá/chồi) và thời gian xuất hiện chồi đầu tiên kéo dài (28 – 33 ngày). Môi trường bổ sung BAP ở nồng độ từ 0,7 – 1mg/l thì có số chồi nhiều hơn so với nồng độ 0 – 0,3mg/l nhưng lá phát triển yếu, có tạo callus, thời gian xuất hiện chồi đầu tiên dài hơn so với nồng độ 0,5mg/l là 9 ngày (sau 26 ngày nuôi cấy).
BAP có ảnh hưởng lớn đến khả năng tạo chồi của lát cắt vảy củ in vitro. Theo Vũ Văn Vụ, sử dụng cytokinin với nồng độ thích hợp sẽ mang lại hệ số tạo chồi cực đại, còn ở các mức thấp hơn biểu hiện hiệu quả kích thích kém, dẫn đến sự tạo chồi và sinh trưởng của chồi giảm. Với các hàm lượng cytokinin cao sẽ hoạt hoá hình thành chồi bất định, có thể gây độc cho cây.
Tóm lại, môi trường có bổ sung 0,5mg/l BAP là môi trường tối ưu để tái sinh chồi, các chồi từ công thức nãy đã được sử dụng làm vật liệu cho thí nghiệm tiếp theo.