Giới hạn phát hiện ựược ựịnh nghĩa là nồng ựộ nhỏ nhất của chất phân tắch mà có tắn hiệu sắc ký lớn gấp 3 lần tắn hiệu ựường nền. đây là một thông số ựặc trưng cho ựộ nhạy của phương pháp. Chất nào nhạy hơn sẽ có giới hạn phát hiện nhỏ.
Tiến hành bơm chất chuẩn vào hệ thống HPLC từ nồng ựộ thấp ựến nồng ựộ cao ựến khi ựạt ựược yêu cầu trên. Từ dung dịch chuẩn các kháng sinh nhóm Tetracycline 25 ộg/ml, tiến hành pha loãng ở các nồng ựộ: 0,05; 0,1; 0,25; 0,5; 1 (ppm). Sau ựó tiến hành chạy sắc ký với các ựiều kiện ựã có thu ựược các sắc ký ựồ ở các hình 5, 6 ,7, 8, 9.
Trường đại học Nông Nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ẦẦẦẦẦẦẦẦẦ. 38
Hình 6: Sắc ký ựồ chạy chuẩn nhóm Tetracycline ở nồng ựộ 0,1 ppm
Trường đại học Nông Nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ẦẦẦẦẦẦẦẦẦ. 39
Hình 8: Sắc ký ựồ chạy chuẩn nhóm Tetracycline ở nồng ựộ 0,5 ppm
Hình 9: Sắc ký ựồ chạy chuẩn nhóm Tetracycline ở nồng ựộ 1 ppm
Sau khi chạy dãy chuẩn trên kết quả cho thấy tại nồng ựộ 0,05 ppm Pắc OTC và TC xuất hiện khoảng bằng 3 lần nhiễu ựường nền. Có thể chấp nhận ựây là giới hạn phát hiện LOD của 2 chất OTC và TC. Hay nói cách khác giá trị giới hạn phát hiện (LOD) của phương pháp ựối với OTC và TC là 0,05 ppm.
Trong khi ựó, ựối với CTC thì chỉ có thể phát hiện Pắc có chiều cao bằng 3 lần nhiễu ựường nền ở nồng ựộ 0,1 ppm. Hay giá trị giới hạn phát hiện của phương pháp ựối với CTC cao hơn so với các kháng sinh khác (OTC và TC) 2 lần (0,1 ppm).
Như vậy, phương pháp có khả năng phát hiện rất tốt 3 loại kháng sinh thuộc nhóm Tetracycline ựược thử.