4. KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN
4.3.1 Ảnh hưởng của phương pháp lây khác nhau ñế n khả năng nhiễm n ấm P cinnamomi gây thối củ rễ cây Sì to
Theo nguyên tắc Robert Koch (1876), ñể khẳng ñịnh một ñối tượng khi phân lập ñược có phải là tác nhân gây bệnh không thì cần phải tiến hành lây bệnh nhân tạo và tái phân lập trở lại. Chúng tôi tiến hành thí nghiệm lây nhân tạo cho Sì to bằng nguồn vi sinh vật ñã ñược phân lập và nhân trên môi trường PDA, PCA và ñồng thời tìm hiểu ảnh hưởng của các phương pháp lây khác nhau ñến khả năng nhiễm nấm P.cinnamomi trên cây Sì to. Thí nghiệm lây bệnh nhân tạo cho Sì to bằng nguồn nấm P. cinnamomi ñã phân lập và nuôi cấy thuần từ mẫu cây bị bệnh thu ñược tại vùng trồng Sì to Sa Pa - Lào Cai và Tam ðảo - Vĩnh phúc trên 3 phương pháp khác nhau, theo dõi khả
năng tiềm dục và biểu hiện triệu chứng của bệnh sau lây nhiễm. Kết quả thí nghiệm ñược trình bày ở bảng 4.3.
Bảng 4.3: Kết quả lây bệnh nhân tạo nấm P. cinnamomi cho cây Sì to bằng các phương pháp lây khác nhau
TT Phương pháp lây Số cây TN
Số cây
bệnh TGTD Triệu chứng sau lây nhiễm
1 Tạo vết thương cơ
giới, lây bệnh trực tiếp lên thân cây
15 3 15 Chết hoại ñoạn thân 2 Nhân sinh khối nấm, trộn nguồn bệnh vào giá thểñất 15 7 20 Cây biến vàng toàn bộ lá, sau ñó chết hoại nhánh cây, cuối cùng chết toàn bộ cây. 3 Tưới trực tiếp dung dịch có mẫu nấm vào ñất 15 8 25 Cây biến vàng toàn bộ lá, sau ñó chết hoại nhánh cây, cuối cùng chết toàn bộ cây. 4 ðối chứng 15 0 0 Không biểu hiện bệnh
Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ nông nghiệp ...41
Kết quả cho thấy với cả 3 phương pháp sau khi lây bệnh nhân tạo với thời gian ủ bệnh từ 15 ñến 25 ngày, cây Sì to phát bệnh cho triệu chứng giống ngoài ñồng ruộng. Tuy nhiên số cây phát bệnh ở cả 3 phương pháp có sự khác nhau, phương pháp tưới trực tiếp dung dịch có mẫu nấm vào ñất có tỷ lệ
nhiễm bệnh cao nhất (53,33%) nhưng thời gian tiềm dục dài sau 25 ngày. Còn sử dụng nguồn nấm nhân trên hạt kê trộn vào ñất cho tỷ lệ nhiễm bệnh cao (46,67%) và thời gian tiềm dục ngắn hơn (20 ngày), phương pháp lây trực tiếp cho tỷ lệ nhiễm bệnh ít hơn(20%). Sau khi cây bị nhiễm bệnh do lây bệnh nhân tạo, các mẫu ñược tái phân lập trở lại, kết quả cũng thu ñược nguồn nấm
P. cinnamomi ban ñầu. Kết quả này khẳng ñịnh nấm P. cinnamomi chính là tác nhân gây bệnh thối thân và củ sì to. Kết quả nghiên cứu cũng là báo cáo
ñầu tiên về sự xuất hiện và gây hại của nấm P. cinnamomi trên cây sì to tại Việt Nam.
Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ nông nghiệp ...42
Hình 4.11. Lây bệnh bằng phương pháp áp thạch
Hình 4.12. Triệu chứng sau khi lây bệnh bằng phương pháp tưới trực tiếp dung dịch có mẫu nấm vào ñất.
Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ nông nghiệp ...43
4.3.2 Nghiên cứu một số ñặc ñiểm sinh học của nấm P. cinnamomi gây bệnh thối củ rễ cây sì to tại Tam ðảo - Vĩnh Phúc và Sapa - Lào Cai