4. KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 1 Nghiên cứu chếñộ khử trùng mẫ u thích h ợ p
4.2.3 Thí nghiệm 5 Ảnh hưởng của nồng ñộ BA ñế n khả năng phát sinh chồi từ ñoạn thân mang mầm ngủ giống cói Nhật
Dựa trên thí nghiệm khử trùng mẫu của cói bông trắng với thủy ngân clorua 0,1% với thời gian khử trùng là 10 phút và căn cứ vào ñặc ñiểm mắt ngủ của giống cói Nhật chúng tôi ñã tiến hành khử trùng mẫu bằng HgCl2 0,1% trong thời gian 8 phút. Kết quả khử trùng mà chúng tôi ñạt ñược là tỷ lệ mẫu sạch là 100%, tỷ lệ mẫu tái sinh ñạt 95%.
Trên giống cói Nhật chúng tôi cũng tìm hiểu ảnh hưởng của BA ñến khả năng tạo chồi. Chúng tôi tiến hành thí nghiệm khởi ñộng mẫu với các mức nồng ñộ BA lần lượt là 1,00mg/l; 2,00mg/l; 3,00mg/l; 4,00mg/l.
Bảng 4.5. Ảnh hưởng của nồng ñộ BA ñến khả năng phát sinh chồi cói Nhật CT Nồng ñộ BA(mg/l) Số chồi (chồi/mẫu) Chiều cao chồi (cm) Tình trạng chồi CT1 0,00 1,24 1,12 ++ CT2 1,00 2,07 1,65 +++ CT3 2,00 2,51 1,52 +++ CT4 3,00 1,93 0,85 ++ CT5 4,00 1,71 1,03 ++ LSD0,05 0,128 CV (%) 3,70 Chú thích:
+++: Tốt (Chồi mập, màu xanh)
++: Trung bình ( chồi nhỏ, màu xanh nhạt)
Với mục ñích tạo nguồn vật liệu khởi ñầu cho nuôi cấy invitro như cói bông trắng, ñường hướng kích thích phát sinh chồi là ñường hướng chủ ñạo mà chúng tôi quan tâm. Chính vì vậy trong thí nghiệm với cói Nhật chỉ tiêu số chồi là chỉ tiêu quyết ñịnh ñể lựa chọn môi trường kích thích phát sinh chồi phù hợp nhất.
Chồi cói ñược phát sinh trên tất cả các công thức khác nhau. Nhưng với các công thức khác nhau tốc ñộ phát sinh chồi cũng khác nhau. Trong quá trình quan sát sự phát sinh chồi chúng tôi nhận thấy, tốc ñộ phát sinh chồi trên cói Nhật chậm hơn trên giống cói bông trắng. Cói bông trắng khi nuôi cấy từ 3-5 ngày các chồi cói ñã xuất hiện. Trên giống cói Nhật, sau 1 tuần nuôi cấy số chồi thấp chỉ ñạt 0,10 – 0,20 (chồi/mẫu).
0 0.5 1 1.5 2 2.5 3 S ố c h ồ i ( ch ồ i/ m ẫ u) CT1 CT2 CT3 CT4 CT5 CT
Hình 4.7. Ảnh hưởng của nồng ñộ BA ñến khả năng phát sinh chồi cói Nhật
CT1 (ð/C): MS CT2: MS + 1,00mg/l BA CT3: MS + 2,00mg/l BA
CT4:MS+ 3,00mg/l BA CT5: MS+ 4mg/l BA
Kết quả bảng 4.5 và hình 4.7 cho thấy:
CT1 (ð/C) có số chồi thấp nhất 1,24 chồi/mẫu, chiều cao cụm chồi 1,12cm. Khi thêm BA vào môi trường nuôi cấy các công thức ñã thể hiện sự khác biệt về tốc ñộ phát sinh chồi so với công thức ñối chứng.
Với CT2 ñạt 2,07 (chồi/mẫu) và chiều cao chồi ñạt giá trị lớn nhất 1,65cm. Tăng nồng ñộ BA lên 2,00mg/l (CT3) số chồi tiếp tục tăng và ñạt 2,51 (chồi/mẫu). ðây là nồng ñộ BA cho số chồi cao nhất. Số chồi có hiện tượng giảm khi tăng nồng ñộ BA, cụ thể là khi tăng lên 3,00mg/l số chồi giảm xuống 1,93 (chồi/mẫu) và ñạt 1,71 (chồi/mẫu) ở CT5.
Về tình trạng chồi cói Nhật sau 4 tuần nuôi cấy các chồi ñều phát triển xanh tốt, chiều cao cụm chồi nằm trong khoảng 0,85cm – 1,65cm.
Như vậy: với sai số thí nghiệm cho phép CV% = 3,70 và ở mức sai khác nhỏ nhất có ý nghĩa LSD 5%= 0,128 các công thức bổ sung BA có số chồi cao hơn ñối chứng. CT3 cho số chồi cao nhất 2,51 (chồi/mẫu) và chiều cao chồi 1,52cm.
4.2.4 Thí nghiệm 6. Ảnh hưởng của nồng ñộ Kinetin ñến khả năng phát sinh chồi từñoạn thân mang mầm ngủ giống cói Nhật