ðường kớnh tản nấm sau cấy (mm)
ST
T Mụi trường 2ngày 4 ngày 6 ngày 8 ngày 10 ngày
Số bào tử/cm2 1 PSA 15,6 32,3 50,4 64,5 78,3 1,3x102 2 PGA 13,5 30,7 48,5 66,5 80,0 1,2x102 3 Cỏm Agar 14,0 33,3 45,0 51,7 62,9 1,8x102 4 Bột gạo Agar 15,0 26,8 42,6 45,0 67,3 1,2x102 5 OMA 17,6 27,7 42,8 60,0 76,3 1,6x102
Trờn mụi trường PSA tản nấm của chủng sinh lý 001.0 sau 2 ngày ủo
ủược 15,6 mm, ủạt 32,3 mm sau 4 ngày và sau 10 ngày là 78,3 mm, cú số bào tử là 1,3x102.
Trờn mụi trường PGA tản nấm của chủng sinh lý 001.0 sau 2 ngày ủo
ủược 13,5 mm, ủạt 30,7 mm sau 4 ngày và sau 10 ngày là 80,0 mm, cú số bào tử là 1,2x102.
Trờn mụi trường Cỏm Agar tản nấm của chủng sinh lý 001.0 sau 2 ngày
ủo ủược 14,0 mm, sau 4 ngày ủạt 33,3 mm nhưng sau 10 ngày ủo ủược 62,9 mm, cú số bào tử là 1,8x102.
Trờn mụi trường Bột gạo Agar tản nấm của chủng sinh lý 001.0 sau 2 ngày ủo ủược 15,0 mm, sau 4 ngày ủạt 26,8 mm và sau 10 ngày là 67,3 mm, cú số bào tử là 1,2x102.
Trờn mụi trường OMA tản nấm của chủng sinh lý 001.0 sau 2 ngày ủo
ủược 17,6 mm, sau 4 ngày ủo ủược 27,7 mm và sau 10 ngày là 76,3 mm, cú số bào tử là 1,6x102.
Như vậy: Tản nấm của chủng 001.0 phỏt triển mạnh nhất trờn mụi trường PGA. Trờn mụi trường PSA và OMA tản nấm phỏt triển tương ủương nhau. Trờn mụi trường Cỏm Agar, Bột gạo Agar tản nấm của chủng 001.0 phỏt triển chậm hơn. Số bào tử phỏt sinh nhiều nhất trờn mụi trường cỏm Agar, thấp nhất là mụi trường PGA và Bột gạo Agar.
Bảng 4.13. Khả năng phỏt triển của chủng sinh lý 000.4 nấm P. oryzae
trờn mụi trường nuụi cấy
ðường kớnh tản nấm sau cấy (mm)
STT Mụi trường
2ngày 4 ngày 6 ngày 8 ngày 10 ngày
Số bào tử/ cm2 1 PSA 17.5 31.6 45.7 61.7 83.0 1,4x102 2 PGA 16.0 32.2 45.0 58,0 73.0 1,3x102 3 Cỏm Agar 15.7 29.5 40.3 55.0 77.6 1,5x102 4 Bột gạo Agar 16.0 21.3 34.3 55.0 71.5 1,1x102 5 OMA 16.0 27.0 42.0 51.5 69.0 1,6x102
Trờn mụi trường PSA tản nấm của chủng sinh lý 000.4 sau 2 ngày ủo
ủược 17,5 mm, ủạt 31,6 mm sau 4 ngày và sau 10 ngày là 83,0 mm, cú số bào tử là 1,4x102.
Trờn mụi trường PGA tản nấm của chủng sinh lý 000.4 sau 2 ngày ủo
ủược 16,0 mm, ủạt 32,2 mm sau 4 ngày và sau 10 ngày là 73,0 mm, cú số bào tử là 1,3x102.
Trờn mụi trường Cỏm Agar tản nấm của chủng sinh lý 000.4 sau 2 ngày
ủo ủược 15,7 mm, sau 4 ngày ủạt 29,5 mm và sau 10 ngày ủo ủược 77,6 mm, cú số bào tử là 1,5x102.
Trờn mụi trường Bột gạo Agar tản nấm của chủng sinh lý 000.4 sau 2 ngày ủo ủược 16,0 mm nhưng sau 4 ngày chỉ ủạt 21,3 mm và sau 10 ngày là 71,5 mm, cú số bào tử là 1,1x102.
Trờn mụi trường OMA tản nấm của chủng sinh lý 000.4 sau 2 ngày ủo
ủược 16,0 mm, sau 4 ngày ủo ủược 27,0 mm và sau 10 ngày ủo ủược 69,0 mm, cú số bào tử là 1,6x102.
Bảng 4.14. Khả năng phỏt triển của chủng sinh lý 157.0 nấm P. oryzae
trờn mụi trường nuụi cấy
ðường kớnh tản nấm sau cấy (mm)
STT Mụi trường
2ngày 4 ngày 6 ngày 8 ngày 10 ngày
Số bào tử/ cm2 1 PSA 17.0 27.3 34.3 55.0 71.5 1,3x102 2 PGA 16,9 25.9 38,7 53,0 72,9 1,2x102 3 Cỏm Agar 16.0 30.5 40.3 55.0 77.6 1,5x102 4 Bột gạo Agar 18.0 31.0 45.0 58,0 73.0 1,2x102 5 OMA 15.0 27.0 42.00 56.5 80.6 1,6x102
Như vậy: Tản nấm của chủng 000.4 ủạt kớch thước lớn nhất trờn mụi trường PSA. Trờn mụi trường PGA, Cỏm Agar tản nấm cú kớch thước tương
ủương nhau, cú kớch thước nhỏ nhất trờn mụi trường OMA. Số bào tử phỏt sinh nhiều nhất trờn mụi trường OMA, Cỏm Agar, thấp nhất trờn mụi trường Bột gạo Agar.
Trờn mụi trường PSA tản nấm của chủng sinh lý 157.0 sau 2 ngày ủo
ủược 17,0 mm, ủạt 27,3 mm sau 4 ngày và sau 10 ngày là 71,5 mm, cú số bào tử là 1,3x102.
Trờn mụi trường PGA tản nấm của chủng sinh lý 157.0 sau 2 ngày ủo
ủược 16,9 mm, ủạt 25,9 mm sau 4 ngày và sau 10 ngày là 72,9 mm, cú số bào tử là 1,2x102.
Trờn mụi trường Cỏm Agar tản nấm của chủng sinh lý 157.0 sau 2 ngày
ủo ủược 16,0 mm, sau 4 ngày ủạt 30,5 mm và sau 10 ngày ủo ủược 77,6 mm, cú số bào tử là 1,5x102.
Trờn mụi trường Bột gạo Agar tản nấm của chủng sinh lý 157.0 sau 2 ngày ủo ủược 18,0 mm, sau 4 ngày ủạt 31,0 mm và sau 10 ngày là 73,0 mm, cú số bào tử là 1,2x102.
Trờn mụi trường OMA tản nấm của chủng sinh lý 157.0 sau 2 ngày ủo
ủược 15,0 mm, sau 4 ngày chỉủạt 27,0 mm nhưng sau 10 ngày ủo ủược 80,6 mm, cú số bào tử là 1,6x102.
Như vậy: Tản nấm của chủng 157.0 ủạt kớch thước lớn nhất trờn mụi trường OMA, tiếp ủến là mụi trường cỏm Agar, cú kớch thước nhỏ nhất trờn mụi trường PSA. Số bào tử phỏt sinh nhiều nhất trờn mụi trường OMA, Cỏm Agar, thấp nhất trờn mụi trường Bột gạo Agar và PGA.
Bảng 4.15. Khả năng phỏt triển của chủng sinh lý 000.0 nấm P. oryzae
trờn mụi trường nuụi cấy
ðường kớnh tản nấm sau cấy (mm)
STT Mụi trường
2ngày 4 ngày 6 ngày 8 ngày 10 ngày
Số bào tử/ cm2 1 PSA 15.7 32.2 44.6 58,0 73.2 1,1x102 2 PGA 15.5 25.0 40.1 50.5 75.6 1,1x102 3 Cỏm Agar 17,6 27,7 42,8 60,0 76,3 1,4x102 4 Bột gạo Agar 16.0 32.7 44.0 58,0 71.0 1,2x102 5 OMA 16.9 31.5 39.3 55.0 77.2 1,4x102
Trờn mụi trường PSA tản nấm của chủng sinh lý 000.0 sau 2 ngày ủo
ủược 15,7 mm, ủạt 32,2 mm sau 4 ngày và sau 10 ngày là 73,2 mm, cú số bào tử là 1,1x102.
Trờn mụi trường PGA tản nấm của chủng sinh lý 000.0 sau 2 ngày ủo
ủược 15,5 mm, sau 4 ngày chỉủạt 25,0 mm và sau 10 ngày là 75,6 mm, cú số
bào tử là 1,1x102.
Trờn mụi trường Cỏm Agar tản nấm của chủng sinh lý 000.0 sau 2 ngày
ủo ủược 17,6 mm, sau 4 ngày ủạt 27,7 mm và sau 10 ngày ủo ủược 76,3 mm, cú số bào tử là 1,4x102.
Trờn mụi trường Bột gạo Agar tản nấm của chủng sinh lý 000.0 sau 2 ngày ủo ủược 16,0 mm, sau 4 ngày ủạt 32,7 mm nhưng sau 10 ngày chỉ ủạt 71,0 mm, cú số bào tử là 1,2x102.
Trờn mụi trường OMA tản nấm của chủng sinh lý 000.0 sau 2 ngày ủo
ủược 16,9 mm, sau 4 ngày ủạt 31,5 mm và sau 10 ngày ủo ủược 77,2 mm, cú số bào tử là 1,4x102.
Như vậy: Tản nấm của chủng 000.0 ủạt kớch thước lớn nhất trờn mụi trường OMA, tiếp ủến là mụi trường cỏm Agar, cú kớch thước nhỏ nhất trờn mụi trường Bột gạo Agar. Số bào tử cũng phỏt sinh nhiều nhất trờn mụi trường OMA, thấp nhất trờn mụi trường PSA và PGA.
Túm lại: Cỏc chủng nấm Pyricularia oryzae Cav. khỏc nhau phỏt triển mạnh yếu trờn mụi trường nuụi cấy khỏc nhau. Nhỡn chung cỏc mụi trường PSA, Cỏm Agar, Bột gạo Agar, PGA, OMA ủều thuận lợi cho nuụi cấy nấm.
4.4.3. Khả năng nảy mầm của bào tử từ cỏc chủng nấm Pyricularia oryzae Cav.
Bờn cạnh việc quan sỏt ủặc ủiểm của tản nấm và theo dừi tốc ủộ phỏt triển của tản nấm trờn cỏc mụi trường khỏc nhau, chỳng tụi cũn tiến hành nghiờn cứu tỷ lệ bào tử nảy mầm của cỏc chủng nấm ủó phõn lập. Bảng 4.16. Khả năng nảy mầm của bào tử một số chủng sinh lý nấm P. oryzae Tỷ lệ (%) bào tử nảy mầm sau STT Chủng sinh lý nấm P. Oryzae 2 giờ 4 giờ 6 giờ 8 giờ 10 giờ 1 003.6 10,2 33,0 45,6 75,6 84,0 2 001.0 12,0 30,8 43,2 76,2 88,2 3 000.4 9,4 32,2 48,0 76,0 88,6 4 157.0 10,4 33,6 39,8 70,8 84,4 5 000.0 8,5 28,4 41,6 75,5 90,2
Phương phỏp: Dựng cỏc chủng sinh lý nấm P. oryzae mó số 003.6; 001.0; 000.4; 157.0; 000.0 cấy trờn mụi trường OMA, ủặt trong tủ ủịnh ụn 260C sau 14 ngày nấm phỏt triển kớn ủĩa petri, dựng nước cất khụng ion và chổi lụng rửa sợi nấm. ủặt ủĩa nấm trong buồng sỏng 12 giờ sỏng, 12 giờ
tối, sau 3 ngày nấm hỡnh thành bào tử, dựng nước cất rửa thu bào tử, cho nước cất cú bào tử vào lam lừm ủể ở 26 0 C, ủếm số lượng bào tử, số bào tử
nảy mầm/quang trường ở cỏc thời diểm 2, 4, 6, 8, 10 giờ, tớnh tỷ lệ bào tử
nảy mầm
Kết quả bảng 4.16 chỳng tụi nhận thấy cỏc chủng sinh lý nấm
Pyricularia oryzae Cav. ủó phõn lập ủược ủều tỷ lệ nảy mầm cao.
Sau 2 giờ chủng 001.0 cú tỷ lệ nảy mầm của bào từ cao nhất (12,0%), tiếp ủến là chủng 157.0 và 003.6 (từ 10,2 – 10,4%), thấp nhất là chủng 000.0 (8,5%).
Sau 4 giờ chủng 157.0 cú tỷ lệ nảy mầm của bào từ cao nhất (33,6%), tiếp ủến là cỏc chủng 003.6, 157.0 và 001.0 (từ 32,2 – 33,0%), thấp nhất là chủng 000.0 (28,4%).
Sau 6 giờ chủng 000.4 cú tỷ lệ nảy mầm của bào từ cao nhất (48,0%), tiếp ủến là cỏc chủng 003.6, 157.0 và 000.0 (từ 41,6 – 45,6%), thấp nhất là chủng 157.0 (39,8%).
Sau 8 giờ cỏc chủng 003.6; 001.0; 000.4 và 000.0 ủều cú tỷ lệ nảy mầm của bào từ cao từ 75,5 – 76,2%, thấp nhất là chủng 157.0 (70,8%).
Sau 10 giờ chủng và 000.0 cú tỷ lệ nảy mầm của bào từ cao nhất (90,2%); Cỏc chủng cũn lại 003.6; 001.0; 000.4 và 157.0 cũng ủều cú tỷ lệ
nảy mầm của bào từ tương ủối cao từ 84,0 – 88,6%.
Như vậy cỏc chủng nấm phõn lập ủược tại vựng Hà Nội ủều cú tỷ lệ
bào tử nảy mầm rất cao ở thời ủiểm sau 6, 8 và 10 giờ. Liờn hệ với thực tế
cú giọt nước trờn lỏ sẽ rất thuận lợi cho cỏc chủng nấm ðạo ụn xõm nhiễm và gõy hại.
4.5. Mức ủộ khỏng, nhiễm của một số dũng, giống lỳa ủối với những
chủng nấm Pyricularia oryzae Cav. ủó ủược phõn lập
ðể ủỏnh giỏ ủược mức ủộ khỏng, nhiễm của cỏc dũng, giống lỳa ủối với một số chủng nấm mà chỳng tụi ủó phõn lập ủược là việc làm cần thiết. Cỏc kết quả này sẽ gúp phần cho việc nghiờn cứu, bố trớ cơ cấu giống cho mỗi vựng một cỏch hợp lý nhằm giảm tối ủa cỏc thiệt hại do bệnh ủạo ụn gõy ra.
4.5.1. Mức ủộ khỏng, nhiễm của những giống lỳa Việt Nam ủối với cỏc chủng nấm ủó ủược phõn lập
Bằng phương phỏp lõy bệnh nhõn tạo trong ủiều kiện nhà lưới chỳng tụi ủó tiến hành lõy nhiễm cỏc chủng nấm mà chỳng tụi ủó phõn lập ủược cho cỏc dũng, giống lỳa Việt Nam tại Bộ mụn Bệnh cõy - Khoa Nụng học - Trường ðại học Nụng nghiệp Hà Nội. Kết quảủược trỡnh bày ở bảng 4.17.
Bảng 4.17. Cấp bệnh của một số giống lỳa Việt Nam ủối với một số chủng
sinh lý nấm P. Oryzae
Chủng sinh lý nấm P. Oryzae dựng lõy nhiễm
STT Giống lỳa 003.6 001.0 000.4 157.0 000.0 1 CR203 1 1 0 1 1 2 C70 0 1 0 4 0 3 C71 0 2 0 3 0 4 DT10 1 0 1 1 4 5 DT13 1 1 1 2 3 6 Nếp TK90 4 1 2 0 2 7 Nếp 315 4 0 2 1 1 8 Xi23 2 0 1 0 0
Qua kết quả bảng 4.17 chỳng tụi nhận thấy:
- Giống CR203 biểu hiện vết bệnh trờn lỏ ở cấp 1 khi bị lõy nhiễm bởi cỏc chủng: 003.6; 001.0; 157.0 và 000.0; khụng bị nhiễm bệnh khi bị
lõy nhiễm bởi chủng 000.4.
- Giống C70 cú biểu hiện vết bệnh rừ rệt nhất trờn lỏ khi bị lõy nhiễm bởi chủng 001.0 (bệnh cấp 4) và vết bệnh cấp 1 trờn lỏ khi lõy nhiễm bởi chủng 001.0; khụng bị nhiễm bệnh khi bị lõy nhiễm bởi cỏc chủng cũn lại
- Giống C71 cú biểu hiện vết bệnh trờn lỏ cấp 2 - 3 khi bị lõy nhiễm bởi chủng 001.0 (bệnh cấp 2) và vết bệnh cấp 3 khi lõy nhiễm bởi chủng 157.0; khụng bị nhiễm bệnh khi bị lõy nhiễm bởi cỏc chủng cũn lại.
- Giống DT10 biểu hiện vết bệnh rừ rệt trờn lỏ (cấp 4) khi bị lõy nhiễm bởi chủng 000.0, biểu hiện cấp bệnh cấp 1 khi lõy nhiễm bởi cỏc chủng 003.6, 000.4, 157.0; khụng biểu hiện bệnh khi bị lõy nhiễm bởi chủng 001.0
- Giống DT13 biểu hiện vết bệnh trờn lỏ ở cấp 2 khi bị lõy nhiễm bởi chủng 157.0 và vết bệnh cấp 3 khi lõy nhiễm bởi chủng 000.0; nhiễm bệnh cấp 1 khi bị lõy nhiễm bởi cỏc chủng cũn lại.
- Giống Nếp TK90 biểu hiện vết bệnh trờn lỏ ở cấp 4 khi bị lõy nhiễm bởi chủng 003.6, vết bệnh cấp 2 khi lõy nhiễm bởi chủng 000.4 và 000.0; vết bệnh cấp 1 khi lõy nhiễm bới chủng 001.0; Khụng biểu hiện vết vết bệnh khi lõy nhiễm bởi chủng 157.0
- Giống Nếp 315 biểu hiện vết bệnh trờn lỏ ở cấp 4 khi bị lõy nhiễm bởi chủng 003.6, vết bệnh cấp 2 khi lõy nhiễm bởi chủng 000.4; vết bệnh cấp 1 khi lõy nhiễm bới chủng 157.0 và 000.0; Khụng biểu hiện vết vết bệnh khi lõy nhiễm bởi chủng 001.0.
- Giống Xi23 biểu hiện vết bệnh trờn lỏ ở cấp 2 khi bị lõy nhiễm bởi chủng 003.6, vết bệnh cấp 1 khi lõy nhiễm bởi chủng 000.4; khụng bị nhiễm bệnh khi bị lõy nhiễm bởi cỏc chủng cũn lại
Từ cỏc kết quả biểu hiện vết bệnh ở trờn lỏ, dựa vào thang phõn cấp bệnh của Kato (1993) chỳng tụi ủó ủỏnh giỏ mức ủộ khỏng, nhiễm của cỏc dũng, giống lỳa Việt Nam do Bộ mụn bệnh cõy - Khoa nụng học - Trường ủại học nụng nghiệp Hà Nội cung cấp với cỏc chủng nấm ủó ủược phõn lập. Kết quảủỏnh giỏ ủược thể hiện ở bảng 4.18.
Bảng 4.18. Mức ủộ khỏng của một số giống lỳa Việt Nam với một số
chủng sinh lý nấm P. oryzae.
Chủng sinh lý nấm P. Oryzae dựng lõy nhiễm
STT Giống lỳa 003.6 001.0 000.4 157.0 000.0 1 CR203 R R HR R R 2 C70 HR R HR HS HR 3 C71 HR R HR S HR 4 DT10 R HR R R HS 5 DT13 R R R R S 6 Nếp TK90 HS R R HR R 7 Nếp 315 HS HR R R R 8 Xi23 R HR R HR HR
Ghi chỳ: R: Khỏng HR: Khỏng cao S: Nhiễm HS: Nhiễm nặng
Nhỡn chung trong 8 giống lỳa Việt Nam do Bộ mụn bệnh cõy - Khoa nụng học - Trường ủại học nụng nghiệp Hà Nội cung cấp ủược thớ nghiệm cú 02 giống Nếp TK90 và Nếp 315 cú phản ứng nhiễm nặng với chủng 003.6; Giống C70, C71 cú phản ứng nhiễm ủến nhiễm nặng ủối với chủng nấm
157.0; Giống DT10, DT13 cũng cú phản ứng nhiễm ủến nhiễm nặng ủối với chủng nấm 000.0. Cũn lại cỏc giống khỏc ủều cú phản ứng khỏng (R) ủến khỏng cao (HR) với những chủng nấm mà chỳng tụi phõn lập ủược.
4.5.2. Mức ủộ khỏng, nhiễm của một số giống lỳa Trung Quốc ủối với cỏc chủng nấm ủó ủược phõn lập chủng nấm ủó ủược phõn lập
Cũng bằng phương phỏp lõy bệnh nhõn tạo trong ủiều kiện nhà lưới chỳng tụi ủó tiến hành lõy nhiễm cỏc chủng nấm mà chỳng tụi phõn lập ủược cho 8 giống lỳa Trung Quốc do Bộ mụn bệnh cõy - Khoa nụng học - Trường ủại học nụng nghiệp Hà Nội cung cấp. Tuy nhiờn mức ủộ biểu hiện bệnh của cỏc giống lỳa thụng qua cỏc vết bệnh là rất khỏc nhau. Kết quảủược thể hiện ở bảng 4.19.