phỏt hiện IgM khỏng vi rỳt VNNB.
Tiờu chuẩn xỏc định bệnh nhõn VNNB: cú kết quả phỏt hiện IgM khỏng vi rỳt trong dịch nóo tuỷ dương tớnh, xỏc định cú sự thay đổi (tăng hoặc giảm) hiệu giỏ khỏng thể IgM đối với cặp mẫu huyết thanh kộp.
Trờn cựng một bệnh nhõn xột nghiệm mẫu dịch nóo tuỷ và huyết thanh
được lấy cựng ngày, nếu kết quả xột nghiệm huyết thanh dương tớnh, kết quả
xột nghiệm dịch nóo tuỷ õm tớnh, sẽ được kết luận bệnh nhõn khụng bị VNNB. Trờn cựng một bệnh nhõn, khụng cú sự thay đổi hiệu giỏ khỏng thể IgM giữa mẫu huyết thanh lấy trong giai đoạn cấp và huyết thanh lấy trong giai đoạn lui bệnh sẽ được kết luận bệnh nhõn khụng bị VNNB.
3.3.3. Cỏc cụng cụ nghiờn cứu cụ thể 3.3.3.1. Sinh phẩm: 3.3.3.1. Sinh phẩm:
Bản nhựa: gắn IgG khỏng IgM người đặc hiệu chuỗi à.
Khỏng nguyờn: khỏng nguyờn VNNB chế tạo bằng phương phỏp Sucrose-
Axeton. Khỏng nguyờn vi rỳt VNNB genotyp 1 được chế tạo từ chủng vi rỳt VNNB phõn lập ở Việt Nam năm 2002 từ muỗi cú ký hiệu 02VN105. Khỏng
nguyờn vi rỳt VNNB genotyp 3 được chế tạo từ chủng vi rỳt VNNB Nakayama (phõn lập ở Nhật Bản).
Chứng dương: huyết thanh người cú IgM khỏng vi rỳt VNNB, kiểm tra õm tớnh
Chứng õm: huyết thanh người khụng cú IgM và IgG khỏng vi rỳt VNNB, kiểm
tra õm tớnh với khỏng nguyờn vi rỳt viờm gan B và vi rỳt HIV.
Cộng hợp: IgG chuột khỏng vi rỳt Flavi gắn enzym peroxydaza. Cơ chất hiện màu: Ortho – Phenylendiamin (OPD) tinh thể.
Dung dịch đệm pha cơ chất: dung dịch đệm photphat – citrat cú chứa 0,03%
hydrogenperoxide.
Dung dịch rửa bản nhựa: PBS – T.
Dung dịch pha loóng: PBS pH. 7,2, BSA, đỏ phenol, 0,1%Tween. Dung dịch dừng phản ứng: H2SO4.4N.
Bộ sinh phẩm PEN TAX phỏt hiện khỏng thể IgM khỏng vi rỳt VNNB; bộ sinh phẩm MAC-ELISA chẩn đoỏn Dengue do Viện Quốc gia cỏc bệnh truyền
nhiễm (NIID) Tokyo, Nhật Bản cung cấp; Bộ sinh phẩm Pan-Bio do tổ chức PATH cung cấp, kỹ thuật thực hiện theo hướng dẫn của nhà sản xuất.
3.3.3.2. Dụng cụ và trang thiết bị:
Pipet tự động hoặc bỏn tự động loại: 10–40 àl, 20–200 àl và 100–1000 àl; ống đong 500 ml hoặc 1000 ml; hệ thống mỏy rửa, mỏy ủ, mỏy đọc ELISA và
cỏc dụng cụ cần thiết khỏc.
3.4. Phương phỏp xử lý số liệu:
Phõn tớch và xử lý kết quả theo phương phỏp thống kờ Y học.
Đỏnh giỏ tỷ lệ bảo vệ của vắc-xin theo cụng thức:
VE (%) = [(P1 – P2) : P1] x 100
VE: hiệu quả phũng bệnh của vắc-xin.
P1: tỷ lệ mắc bệnh ở nhúm trẻ khụng tiờm vắc-xin. P2: tỷ lệ mắc bệnh ở nhúm trẻ tiờm vắc-xin.
(adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});