Cấu trúc chung của một hệ biểu hiện trong E. coli cần có những đặc điểm như chứa đựng promoter mạnh, phù hợp với tế bào biểu hiện, chứa đựng trình tự khởi đầu và trình tự kết thúc phiên mã, chứa vùng đa nối với vị trí cắt duy nhất trong vector đối với từng enzim hạn chế, chứa một đoạn peptid tín hiệu để làm dấu hiệu cho sự tiết của protein tái tổ hợp ra ngoài tế bào chất và mang một vài dấu chuẩn chọn lọc để phục vụ cho mục đích sàng lọc thể biến nạp.
Tương tự như vector tách dòng, vector biểu hiện pET32(+) có đầy đủ các yếu tố di truyền đảm bảo chức năng cơ bản của một plasmit như: sao mã, phiên mã độc lập và ổn định qua các thế hệ tế bào. Ngoài ra, hệ vector pET- 32(+) còn có nhiều đặc điểm quan trọng, vượt trội hơn so với các hệ biểu hiện khác như:
Gen ngoại lai được điều khiển bởi promoter T7- đây là promotor mạnh và có tính đặc hiệu cao, có khả năng biểu hiện protein ngoại lai lớn chiếm 10- 30% tổng số protein tế bào, có độ nhạy cao với các chất cảm ứng nên có thể điều khiển dễ dàng sự biểu hiện của gen ngoại lai. Không giống như các promotor khác có nguồn gốc từ tế bào E. coli, T7 ARN polymeraza là một enzim hoạt động rất mạnh, có tốc độ kéo dài chuỗi nhanh gấp 5 lần so với các ARN polymeraza có nguồn gốc từ E. coli.
Trên vector đã thiết kế một đoạn gen Trx mã hoá protein Thioredoxin. Thioredoxin được phân lập đầu tiên từ E. coli và tìm thấy ở nấm, virut, vi khuẩn, thực vật… Trong hệ biểu hiện E. coli, Thioredoxin chiếm khoảng 40% tổng protein của tế bào. Thioredoxin góp phần làm tăng khả năng biểu hiện của gen ngoại lai khi dung hợp với nó. Ngoài ra vị trí cắt của enterokinaza được thiết kế trước vùng đa điểm cắt để tách protein tái tổ hợp ra khỏi Thioredoxin [1].
Tất cả các ưu điểm trên cho thấy pET-32a(+) không chỉ thiết kế riêng cho việc biểu hiện gen ngoại lai mà còn thuận lợi cho việc tinh sạch trong quá trình thu nhận protein tái tổ hợp. Do đó chúng tôi đã lựa chọn vector này để biểu hiện cho protein tái tổ hợp của gen ngoại lai fljB mã hoá cho kháng nguyên roi H: 1,2 của vi khuẩn S. typhimurium.