2. Mục ựắch của ựề tài
3.1 MÔ TẢ SƠ LƯỢC QUÁ TRÌNH SẢN XUẤT VẮCXIN PHÙ đẦU BẰNG
BẰNG CÔNG NGHỆ LÊN MEN SỤC KHÍ.
Hiện nay công nghệ lên men ựược áp dụng phổ biến trên thế giới trong việc sản xuất vắc xin. Công nghệ lên men thực chất là áp dụng các tiến bộ khoa học như công nghệ chế tạo máy, ựiện tử tin học, công nghệ vi sinh vật,Ầvới mục ựắch cung cấp ựầy ựủ các ựiều kiện tối ưu cho vi sinh vật phát triển như vòng khuấy, oxy, nhiệt ựộ,Ầ
Trên thực tế, công nghệ lên men có thể áp dụng ựược vào nuôi cấy virus và vi khuẩn.
Với virus, người ta ứng dụng công nghệ lên men vào sản xuất môi trường tế bào phục vụ quá trình nuôi cấy virus. Khi chế tạo môi trường tề bào, người ta chủ ựộng ựưa vào ựó những Ộviên biỢ có cấu tạo ựặc biệt giúp chúng lơ lửng trong môi trường, tạo ựiều kiện làm tăng bề mặt tiếp xúc của tế bào cần nuôi với môi trường nuôi cấy, qua ựó làm tăng số lượng tế bào cần nuôi. Các tế bào ựó sẽ bám vào các Ộviên biỢ nhờ ựó làm tăng bề mặt tiếp xúc giữa virus và các tế bào nuôi. Số lượng tế bào tăng lên thì virus cũng tăng theo do ựó hiệu suất nuôi cấy cũng tăng.
Với vi khuẩn, công nghệ lên men sẽ giúp tối ưu hóa các chỉ tiêu phục vụ nuôi cấy vi khuẩn như: nồng ựộ Oxy, pH, nhiệt ựộ,Ầqua ựó vi khuẩn luôn có ựiều kiện tốt nhất ựể tiếp xúc với dưỡng chất và dưỡng khắ trong ựiều kiện pH tối ưu do vậy nâng cao ựược hiệu quả nuôi cấy cụ thể là làm tăng ựược mật ựộ vi khuẩn, giảm thời gian nuôi cấy,...
*Ưu ựiểm khi áp dụng sản xuất vắc xin phù ựầu bằng công nghệ lên men sục khắ.
- điều khiển bằng máy vi tắnh nên ựộ chắnh xác cao.
- Chất lượng vắc xin tăng cao (do ựậm ựộ kháng nguyên lớn >20 tỷ/1ml, giảm khối lượng ựưa vào và số lần tiêm).
Quá trình sản xuất vắc xin phù ựầu vô hoạt tiêm phòng bệnh phù thũng ở lợn bằng công nghệ lên men sục khắ phải trải qua các khâu:
a. Sản xuất kháng nguyên
b. Vô họat kháng nguyên bằng focmol.
c. Lắc giải ựộc tố d. Chuẩn bị chất bổ trợ
e. Pha loãng và hấp phụ kháng nguyên lê chất bổ trợ. f. Ra chai
Ở mỗi khâu sản xuất ựều yêu cầu tiêu chuẩn kĩ thuật chặt chẽ từ nguyên liệu môi trường, thao tác kĩ thuậtẦChỉ cần một khâu bị sai sót có thể làm ảnh hưởng ựến toàn bộ quá trình sản xuất vắc xin gây nhiều thiệt hại về kinh tế cũng như công lao ựộng. Vì vậy, ở mỗi khâu chúng tôi ựều tiến hành kiểm tra các chỉ tiêu kĩ thuật một cách chặt chẽ. Các chỉ tiêu kiểm tra bao gồm: nhuộm Gram soi và ria cấy trên thạch ựĩa kiểm tra hình thái của vi khuẩn cũng như khuẩn lạc. Bên cạnh ựó là kiểm tra thuần khiết và ựếm số canh trùng nuôi cấy ựể biết ựược ựộ thuần khiết cũng như sự biến ựổi về mật ựộ của vi khuẩn trong môi trường sản xuất. Quá trình sản xuất vắc xin trên tuân thủ theo quy trình sản xuất ựược trình bày ở hình 3.1
Hình 3.1 Tóm tắt quy trình sản xuất vắc xin phù ựầu bằng công nghệ lên men sục khắ
Ban giữ giống sx vắc xin
Giống sx gốc vắc xin
E.coli phù ựầu
Kiểm tra chất lượng giống gốc
Chuẩn bị giống sản xuất Và lên men sinh khối
Xử lý bằng formol 36% (Tỷ lệ bổ sung 0.6 %)
Lắc giải ựộc
Giai ựoạn hấp phụ keo phèn (Tỷ lệ bổ sung 20%)
Kiểm tra bán thành phẩm
Kiểm nghiệm vắc xin
- Phiết kắnh nhuộm gram, soi kiểm tra hình thái, tắnh chất bắt màu và sự sắp xếp trong vi trường.
- Ria cấy
- KT thuần khiết - đếm số lượng VK
Kiểm tra vô trùng
Kiểm tra an toàn ựộc tố
KT thuần khiết giống trong MT tăng sinh ựể nhân giống sản xuất
KT vô trùng
KT vô trùng KT an toàn KT hiệu lực
Nhập kho bảo quản Nhiệt ựộ 2 Ờ 80