CHƯƠNG III: KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN
3.2.3.Khảo sát độ đúng
3.2.3.1 M.B.I
Kết quả diện tích vết mẫu thử và mẫu thử thêm chuẩn như sau: Mẫu thử: Y1 = 4354 (pixel)
Mẫu thử + 1mg M.B.I chuẩn: Y2 = 4553 (pixel) Mẫu thử + 2mg M.B.I chuẩn: Y3 = 4750 (pixel)
Từ các giá trị diện tích vết thu được ta thay giá trị Y vào phương trình đường hồi qui Y = 197531X + 2530.6, từ đó suy ra:
Nồng độ M.B.I có trong mẫu thử:
X1 = (Y1 – 2530.6)/197531 = (4354 -2530.6)/197531 = 0.00923 (g/ml).
Dung dịch sau phản ứng được lấy ra 10µl pha vừa đủ 200µl dung dịch. Nên lượng M.B.I có trong dung dịch sau phản ứng là: 0.00923*20 = 0.1846 (g/ml).
Hiệu suất phản ứng: H =mtt/mlt =0.1846/(273*10-3) = 67.62(%). Tương tự, ta có thể áp dụng cho những mẫu thử khác.
Nồng độ M.B.I có trong mẫu thử + 1mg M.B.I chuẩn:
X2 = (Y2 – 2530.6)/197531 = (4553 -2530.6)/197531 = 0.01024 (g/ml). Nồng độ M.B.I có trong mẫu thử + 2mg M.B.I chuẩn:
X3 = (Y3 – 2530.6)/197531 = (4749 -2530.6)/197531 = 0.01123 (g/ml).
Bảng 3.5. Kết quả khảo sát độ đúng của M.B.I
Mức thêm vào (mg)
Hàm lượng chuẩn tìm thấy (mg) Tỉ lệ phục hồi (%) 1 1.01 101 2 2 100 3.2.3.2 Felodipin Vết 1: M.B.I chuẩn. Vết 2: Mẫu thử.
Vết 3: Mẫu thử + 1mg M.B.I chuẩn. Vết 4: Mẫu thử + 2mg M.B.I chuẩn.
Kết quả diện tích vết mẫu thử và mẫu thử thêm chuẩn như sau: Mẫu thử: Y1 = 6275 (pixel)
Mẫu thử + 0.5mg felodipin chuẩn: Y2 = 6390 (pixel)
Mẫu thử + 1mg felodipin chuẩn: Y3 = 6509 (pixel) Mẫu thử + 2mg felodipin chuẩn: Y4 = 6730 (pixel)
Từ các giá trị diện tích vết thu được ta thay giá trị Y vào phương trình đường hồi qui Y = 229420X + 2604.8, từ đó suy ra:
Nồng độ felodipin có trong mẫu thử:
X1 = (Y1 – 2604.8)/229020 = (6275 - 2604.8)/229420 = 0.016 (g/ml).
Dung dịch sau phản ứng được định mức đến 10ml nên lượng felodipin có trong dung dịch sau phản ứng là: 0.016*10 = 0.16 (g/ml).
Hiệu suất phản ứng: H =mtt/mlt =0.16/(384*0.5*10-3) = 83.32(%). Tương tự, ta có thể áp dụng cho những mẫu thử khác.
Nồng độ felodipin có trong mẫu thử + 0.5mg felodipin chuẩn:
X2 = (Y2 – 2604.8)/229020 = (6390 - 2604.8)/229420 = 0.0165 (g/ml). Nồng độ felodipin có trong mẫu thử + 1mg M.B.I chuẩn:
Vết 1: Mẫu thử.
Vết 2: 1 ml mẫu thử + 0.5mg felodipine chuẩn. Vết 3: 1ml mẫu thử + 1mg felodipine chuẩn. Vết 4: 1ml mẫu thử + 2mg M.B.I chuẩn. Vết 5: Felodipine chuẩn.
X3 = (Y3 – 2604.8)/229020 = (6509 - 2604.8)/229420 = 0.01702 (g/ml). Nồng độ felodipin có trong mẫu thử + 2mg M.B.I chuẩn:
X4 = (Y4 – 2604.8)/229020 = (6730 - 2604.8)/229420 = 0.01798 (g/ml).
Bảng 3.6. Kết quả khảo sát độ đúng của felodipin.
Mức thêm vào (mg) (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
Hàm lượng chuẩn tìm thấy (mg) Tỉ lệ phục hồi (%) 0.5 0.5 100 1 1.02 102 2 1.98 99
Nhận xét: từ các kết quả tính toán được qua khảo sát độ đúng cho thấy tỷ lệ phục hồi nằm trong giới hạn cho phép 98 – 102%. Hơn nữa, qua sắc ký đồ hình 3.5 và 3.6 cho thấy vết mẫu thử thêm chuẩn rõ nét và có cùng Rf với vết chuẩn.
Kết luận chung: qua kết quả nhận được từ khảo sát độ lặp lại, tính tuyến tính và độ đúng cho thấy đạt yêu cầu thẩm định. Do đó, ta có thể sử dụng phương pháp sắc ký lớp mỏng để định lượng M.B.I và felodipin có trong mẫu thử, để từ đó xác định được nồng độ M.B.I cũng như felodipin có trong hỗn hợp sau phản ứng. Phương pháp này giúp ta nhanh chóng xác định hiệu suất phản ứng với kỹ thuật đơn giản và không mất nhiều thời gian với sai số có thể chấp nhận được.