3.2.4.1. Nghiên cứu ảnh hưởng của khối lượng phân tử chitosan đến kích thước hạt, điện tích và tính ổn định hạt nano chitosan bằng phương pháp tạo gel với TPP.
-Nội dung nghiên cứu ảnh hưởng của khối lượng phân tử chitosan đến kích thước hạt nano chitosan và điện thế hạt. Khối lượng phân tử chitosan là 20 kDa , 30 kDa và 300 kDa .
- Chitosan cĩ các khối lượng phân tử khác nhau 20kDa, 30 kDa và 300 kDa được pha với nồng độ 0,2% (w/v) trong dung dịch acid acetic 0.35%, sau khi hịa tan chitosan, dung dịch được điều chỉnh pH đến 5.5 bằng NaOH 1M. - TPP được pha với nồng độ 0,5% (w/v) trong nước khử ion.
- Hạt nano được tạo bằng cách nhỏ dung dịch TPP vào dung dich chitosan với tỷ lệ Chitosan: TPP là 5:1 (w/w) trong điều kiện khuấy từ 900 rpm, thời gian phản ứng là 60 phút ở nhiệt độ phịng. Sau đĩ lấy dung dịch hạt nano chitosan ly tâm với tốc độ 12.000 vịng/phút trong 60 phút thu cặn. Rửa cặn lặp lại hai lần bằng nước khử ion rồi đơng khơ. Mẫu được bảo quản ở 50C trong tủ lạnh.
+ Các chỉ tiêu theo dõi
- Kích thước trung bình hạt nano chitosan (nm). - Phân bố kích thước hạt (nm).
- Điện thế hạt nano chitosan (mV). +Phương pháp đo:
Hạt nano chitosan được chụp và xác định kích thước, phân bố kích thước bằng kính hiển vi điện tử truyền quang (Transmission electronic microscope, TEM) JEOL, JEM 1400, Nhật Bản. Phân bố kích thước hạt nano chitosan được xác định bằng cách đo kích thước ngẫu nhiên của 50 hạt nano chitosan.
3.2.4.2. Nghiên cứu ảnh hưởng của tỉ lệ chitosan và TPP đến kích thước hạt,điện tích và tính ổn định hạt nano chitosan.
- Nội dung này nghiên cứu ảnh hưởng của tỷ lệ chitosan: TPP đến kích thước và điện thế hạt nano chitosan, với mục đích tìm ra tỷ lệ thích hợp nhất và hồn thiện qui trình tối ưu tạo hạt nano chitosan trong điều kiện Việt Nam. -Dung dịch chitosan nồng độ 0,2% (w/v) với Mw là 30 kDa được pha trong acid acetic 0.35% (w/v). Sau khi hịa tan, điều chỉnh pH của dung dich chitosan 0,2% đến 5.5 bằng NaOH 1M.
-TPP nồng độ 0,5 % (w/v) được pha trong nước khử ion.
-Nhỏ giọt TPP vào dung dịch CS trong điều kiện khuấy từ tốc độ 900 vịng/phút ở nhiệt độ phịng 300C trong 60 phút. Tỷ lệ khối lượng chitosan/TPP là 3:1; 4:1; 5:1; 6:1 và 7:1. Sau đĩ lấy dung dịch hạt nano
chitosan ly tâm với tốc độ 12.000 vịng/phút trong 60 phút thu cặn. Rửa cặn lặp lại hai lần bằng nước khử ion rồi đơng khơ. Mẫu được bảo quản ở 50C trong tủ lạnh.
+ Các chỉ tiêu theo dõi
- Kích thước trung bình hạt nano chitosan (nm). - Phân bố kích thước hạt (nm).
- Điện thế hạt nano chitosan (mV).
+Phương pháp đo với thiết bị, kỹ thuật như nội dung 3.2.4.1