3.1 Vật liệu nghiên cứu3.1.1Vật liệu 3.1.1Vật liệu
- Compost 1: phân ủ được làm từ lá Jatropha curcas. - Compost 2: phân ủ được làm từ bánh dầu J. curcas.
- Compost 3: phân ủ được làm từ hỗn hợp các bộ phận của J. curcas.
- Compost 4: phân ủ từ hỗn hợp các bộ phận của J. curcas có bổ sung thêm nấm Trichoderma. harzianum.
- Compost 5: phân ủ được làm từ bèo lục bình (Eichhronia crassipes). - Compost 6: phân ủ được làm từ rác sinh hoạt.
- Sinh vật thử nghiệm: tuyến trùng cảm nhiễm tuổi 2 được tách từ rễ cây tiêu.
Compost ủ từ bèo lục bình Compost ủ từ rác sinh hoạt
3.1.2 Dụng cụ và thiết bị
- Đĩa petri loại nhỏ, bình tia.
- Rây lọc đường kính khoảng 90mm, cao 15mm. - Kính hiển vi soi nổi, Olympus SZ- PT (Nhật Bản) - Máy đo pH Precisa (Thụy Sỹ)
- Máy đo độ dẫn điện EC
- Máy Kjeldahl tự động của hãng Prolabo (Pháp) - Máy xay
- Cân phân tích Mettler Toledo (Thụy Sỹ)
3.1.3 Hóa chất
- Nước cất, nước muối sinh lý
- Hóa chất dùng để xác định chỉ tiêu hóa học của compost: K2Cr2O7, (NH4)2SO4.6H2O, H2SO4, HNO3, HCl, NaOH, H3BO3,…
- Hóa chất dùng để pha chất chỉ thị : N-phenylantranilic acid, Na2CO3.
3.2 Phương pháp nghiên cứu
3.2.1 Phương pháp xác định độ ẩm [6]
Nguyên tắc: dựa trên nguyên lý sấy khô mẫu đến trọng lượng ổn định ở nhiệt độ 1050C. Khối lượng mẫu mất đi khi sấy đến khối lượng không đổi được coi là lượng nước có trong mẫu.
Thực hiện:
- Cân chính xác 2 – 3 g mẫu trên cân phân tích cho vô chén đựng mẫu với trọng lượng đã biết.
- Đặt chén đựng mẫu vô tủ sấy, mở nắp chén và sấy ở nhiệt độ 1050C trong 6 giờ.
- Đậy nắp chén đã sấy khô và đưavào bình hút ẩm làm nguội đến nhiệt độ phòng. Cân chén trên cân phân tích có độ chính xác đến 0,002 g.
Kết quả: Độ ẩm (%) = m m m1− 2 x 100
Trong đó:
m1 = khối lượng chén và khối lượng mẫu trước khi sấy (g) m2 = khối lượng chén và khối lượng mẫu sau khi sấy (g) m = khối lượng mẫu phân tích (g)
3.2.2 Phương pháp xác định pH [6]
Mẫu được ngâm trong nước cất theo tỷ lệ 1:5 (g/ml).
Dầm kỹ mẫu bằng đũa thủy tinh và dùng máy khuấy trong 15 phút sau đó để yên khoảng 1 giờ.
Sau đó lọc bằng giấy lọc. Dung dịch lọc thu được dùng để xác định pH bằng máy đo pH với điện cực thủy tinh Precisa (Thụy Sỹ).
3.2.3 Xác định độ dẫn điện (EC) [6]
Mẫu được ngâm với nước cất theo tỷ lệ 1:5 (g/ml).
Dầm kỹ mẫu bằng đũa thủy tinh và dùng máy khuấy trong 15 phút sau đó để yên khoảng 1 giờ.
Lọc bằng giấy lọc băng xanh. Dung dịch lọc thu được dùng để xác định độ dẫn điện bằng máy đo Orion model 115 (Mỹ).
3.2.4 Xác định hàm lượng chất hữu cơ tổng số theo phương phápWALKEYBLAC[6] WALKEYBLAC[6]
Nguyên tắc: oxy hóa chất hữu cơ bằng lượng Biocromate kali (K2Cr2O7) dư trong môi trường acid đậm đặc, lượng K2Cr2O7 dư được xác định bằng muối Morh chuẩn, từ đó xác định được lượng K2Cr2O7 đã dùng để oxy hóa mẫu.
Thực hiện:
- Cân 0,1g mẫu nghiền mịn cho vô bình nón 250ml, thêm 10ml dung dịch Bicromate kali 1N sao cho dung dịch thấm đều vào mẫu, thêm 15ml H2SO4 (d=1,84).
- Mẫu trắng: lấy 10 m Bicromate kali 1N và 15ml H2SO4 (d=1,84) đặc cho vô bình nón 250 ml. Đậy bình bằng phễu thủy tinh, để yên 30 phút, làm nguội. Thêm 100-150ml nước cất, lắc đều, thêm 0,3 m chỉ thị N -phenylantranilic 0,1% rồi chuẩn độ.
Kết quả:
% chất hữu cơ =
Trong đó:
V0 : thể tích muối Morh 0,2N dùng cho mẫu đối chứng (ml) V : thể tích muối Morh 0,2N dùng cho mẫu phân tích (ml) g : lượng mẫu cân( g)
3.2.5 Xác định tổng C hữu cơ [6]
Hàm lượng C hữu cơ (%) được xác định và tính theo công thức sau: % C =
3.2.6 Phương pháp xác định hàm lượng axit humic [6]
Nguyên tắc: axit humic là thành phần của chất mùn trong phân bón được tách bằng NaOH 0,1N (pH=13). Axit humic được kết tủa bằng axit, sau đó định lượng như là chất hữu cơ thông thường.
Tiến hành:
- Cân 2g mẫu đã nghiền mịn (chính xác tới 0,002g) cho vô bình nón 250ml thên 100ml NaOH 0,1N (pH=13), đậy kín và lắc bình trong 30 phút, để qua đêm.
- Lọc dung dịch, loại bỏ cặn, dung dịch trong dùng để xác định axit humic. - Lấy 25ml dung dịch lọc trên cho vô cốc 100-150ml và kết tủa bằng H2SO4 1N (dùng 8-10ml). Kết tủa đến khi xuất hiện cặn đục bền và được xem là hoàn toàn và ổn định ở pH=1.
- Đun cốc trên bếp điện (không đun sôi) để cho axit humic đông tụ. Để nguội và lọc qua giấy lọc, tráng cốc và rửa kết tủa bằng H2SO4 0,05N.
6,9 . (V0 – V) V0. g
% Chất hữu cơ 1,724
- Hòa tan kết tủa trên giấy lọc bằng NaOH 0,05N nóng vô bình định mức 100ml. Quá trình hòa tan kết thúc khi dung dịch chảy xuống là trong. Để nguội thêm nước tới vạch và lắc đều.
- Để xác định axit humic, lấy 25ml dung dịch cho vô bình nón 250ml, cô khô, để nguội. Sau đó xác định chất hữu cơ theo phương pháp WALKEYBLAC.
Kết quả:
Hàm lượng axit humic được tính bằng phần trăm (%) theo công thức sau: % Acid humic =
Trong đó:
V0:thể tích muối Mohr 0,2 N dùng cho mẫu đối chứng (ml) V : thể tích muối Mohr 0,2 N dùng cho mẫu phân tích (ml) g :lượng mẫu cân (g):
3.2.7 Xác định Nitơ tổng số theo phương pháp micro Kjeldahl [6]
Nguyên tắc: mẫu được vô cơ hoá bằng axit H2SO4 (d=1,84) đậm đặc với sự tham gia của chất xúc tác, muối amonium sunfat (NH4)2SO4 được tạo thành tác dụng với kiềm mạnh (NaOH) sẽ phóng thích ra NH3. Và qua dung dịch 0,25N H3BO3 tự phân ly. Lượng BO2- được tạo thành tương đương lượng NH3 bị đẩy ra trong quá trình cất đạm và được định lượng bằng cách chuẩn độ ngược với HCl (0,25N).
Thực hiện:
- Vô cơ hoá mẫu: cân 0,2g mẫu đã nghiền mịn (chính xác đến 0,002g) cho vào ống phá mẫu chuyên dụng, bổ sung 1g chất xúc tác và hút 5ml axit H2SO4 (d=1,85) đậm đặc, nối với bộ thu khí và bắt đầu phá mẫu trên bếp đun chuyên dụng của máy
110,4 . (V0 – V)V0. g