- Đẩy lùi các vi sinh vật: độ ẩm và dinh dưỡng trong vùng rhizosphere tạo ra thường
5.2Dụng cụ hoá chất 1 Dụng cụ thiết bị
5. Xác địn hP tổng số
5.2Dụng cụ hoá chất 1 Dụng cụ thiết bị
5.2.1 Dụng cụ - thiết bị Bình Kenđan Ống đong Pipette: 2ml, 5 ml Bếp điện Tủ hút Bình định mức 50 ml,100 ml. Spectrophotometer 5.2.2 Hoá chất
Acid H2SO42.5 M: cho từ từ 138 ml acid H2SO4 đậm đặc vào trong 500 ml nước cất rồi định mức thành 1 lít,(a).
Dung dịch acid ascorbic 0.1 M: cân 1.76 g acid ascorbic hoà tan trong 100 ml nước cất, (b).
Dung dịch amoniummolybdate 4%: hoà tan 40g trong 1 lít nước cất,(c).
Dung dịch kaliumantimoniumtartrate KSbOC4H4O4.1/2H2O cân 0.2728 g hoà tan trong 100 ml nước cất,(d).
Dung dịch thuốc thử trộn theo tỉ lệ: (a):(b):(c):(d) = 50: 30: 15: 5 thành 100 ml. Ngoài ra, thuốc thử có thể pha như sau:
- 12 g amoniummolybdate - 0.2669 g KSbOC4H4O4 - 140 ml H2SO4 đậm đặc
3 thành phần trộn chung lại định mức 1 lít. Sau khi chuẩn pH các mẫu xong thì mới bổ sung thêm a .ascorbic vào hỗn hợp thuốc thử với lượng là 1.056 g/ 100ml dung dịch .
Có nghĩa là một mẫu cần 4 ml thì : 4 * tổng số mẫu = V thuốc thử cần dùng
Tam suất tính lượng a.ascorbic cần dùng, cân lên dạng bột trộn vào hỗn hợp dung dịch đã pha ở trên.
Ví dụ 1.056 g : 100 ml
? g : 56 ml (cho 14 mẫu * 4 ml) Lượng a.ascobic là : 56 x 1.056 / 100 = 0.59 g.
Có được hỗn hợp 4 thành phần cho vào mẫu (màu thuốc thử vàng nhạt). Chú ý hỗn hợp này chỉ sử dụng trong vòng 3 h nên cần phải tính toán phù hợp.
Dung dịch NaOH 1N: Cân 40 g NaOH pha với 1lít nước cất.
Dung dịch photphat chuẩn gốc: hoà tan 439 mg KH2PO4 khan (đã sấy ở 1050C trong một giờ) trong 1 lít nước cất. Dung dịch chuẩn có nồng độ 100 ppm.
Dung dịch làm việc: pha trước lúc dùng. Lấy 5 ml dung dịch chuẩn gốc pha loãng bằng nước cất tới 50 ml, dung dịch có nồng độ 10 ppm.
5.3 Thực hành
Phương pháp phá huỷ mẫu: Sử dụng hỗn hợp axit và chất oxi hoá mạnh hay nung chảy kiềm với hỗn hợp Na2CO3 và K2CO3 (có thể từng chất riêng biệt).
Phá huỷ mẫu bằng hỗn hợp H2SO4 và HClO4: Cân 1g đất đã ray chuẩn bị vào trong bình Kenđan dung tích 50 ml. Thêm vào bình 8 ml dung dịch H2SO4 đậm đặc, để yên khoảng 15 phút để mẫu thấm hóa chất.
Đun khoảng 15-20 phút thấy xuất hiện khói trắng. Chuyển ra ngoài để nguội rồi cho 2-3 giọt HClO4 70% (cần chú ý phải thực hiện trong tủ hút). Đốt tiếp dung dịch cho tới khi mẫu xuất hiện màu trắng thì đem ra để nguội. Dùng nước cất rửa và chuyển dung dịch vào bình định mức 100 ml, định mức đến 100 ml.
Sau đó dùng phương pháp so màu: Cho 2 ml mẫu vào các bình định mức 50 ml cho thêm 2-3 giọt phenolphtalein chuẩn độ pH bằng cách dùng NaOH 1N cho vào bình định mức, hỗn hợp có màu hồng nhạt. Tiếp tục cho H2SO4 0.1N vào chuẩn lại cho dung dịch mất màu hồng nhạt.(Các bình định mức dựng đường chuẩn cũng chuẩn pH tương tự như vậy). Tất cả các bình cho vào 4 ml dung dịch thuốc thử, định mức bằng nước cất đến 50 ml. Trộn đều hỗn hợp, để yên 10 phút để màu được lên hoàn toàn. Đem đi đo màu trên máy spectrophotometer tại bức sóng 882 nm.
Chuẩn bị đường chuẩn
STT 0 1 2 3 4 5
VPO43- chuẩn (ml) 0 2 4 6 8 10
V thuốc thử (ml) 4 4 4 4 4 4
Nước cất Định mức 50 ml