1: HT17 8; 2 HT18.4 ; 3 HT19 1; 4 HT18
3.3.1.Hoạt tính enzyme của xạ khuẩn
Trong quá trình sống, xạ khuẩn cần phải tổng hợp nên các enzyme. Các enzyme được hình thành trong tế bào và một số được tiết ra môi trường xung quanh. Trong sản xuất enzyme từ xạ khuẩn chủ yếu là thu nhận các enzyme ngoại bào. Không phải tất cả các VSV đều có khả năng sinh enzyme như nhau, vì vậy, khi tuyển chọn chủng giống phải tiến hành phân lập, kiểm tra và lựa chọn các chủng có hoạt tính enzyme mạnh, sinh nhiều enzyme mong muốn theo từng mục đích.
36
Các chủng xạ khuẩn tiếp tục được nghiên cứu về khả năng sinh enzyme ngoại bào. Trong các thí nghiệm, chúng tôi sử dụng 3 loại cơ chất để kiểm tra khả năng sinh enzyme là: tinh bột, carboxymetylcellulose (CMC) và casein. Kết quả kiểm tra bước đầu, chúng tôi đã chọn ra 5 chủng có hoạt tính enzyme mạnh nhất và kí hiệu là: HT10.6, HT12.7, HT12.5, HT17.15, HT18.8.
Kết quả kiểm tra hoạt tính enzyme của 5 chủng lựa chọn được trình bày trên bảng 3.9.
Bảng 3.9. Hoạt tính enzyme của 5 chủng xạ khuẩn lựa chọn
Kí hiệu chủng
Hoạt tính enzyme (D - d, mm)
Amylase Cellulase Protease
HT10.6 12,1 ± 0,1 11,9 ± 0,1 12,1 ± 0,2 HT12.7 6,9 ± 0,5 9,9 ± 0,1 10,1 ± 0,1 HT12.5 + 10,9 ± 0,1 11,2 ± 0,1 HT17.15 + 10,0 ± 0,6 9,9 ± 0,1 HT18.8 + 7,2 ± 0,2 7,1 ± 0,1 Chú thích: ( +) : Hoạt tính yếu (≤ 4 mm)
Bước tiếp theo, 5 chủng lựa chọn trên được nuôi lắc trên môi trường dịch thể để kiểm tra hoạt tính enzyme của dịch lên men. Kết quả kiểm tra được trình bày trong bảng 3.10 cho thấy, nhìn chung, các chủng giữ được cả 3 hoạt tính enzyme nói trên, nhưng mức độ biểu hiện hoạt tính có sự khác nhau. Hoạt tính protease biểu hiện mạnh nhất và yếu nhất là hoạt tính amylase.
Bảng 3.10. Hoạt tính enzyme của dịch lên men 5 chủng XK đã lựa chọn
Kí hiệu chủng
Hoạt tính enzyme (D - d, mm)
Amylase Cellulase Protease
HT10.6 + 10,2 ± 0,1 12,2 ± 0,3 HT12.7 12,5 ± 0,1 16,1 ± 0,1 16,2 ± 0,3 HT12.5 + + 4,9 ± 0,1 HT17.15 + 8,0 ± 0,1 12,2 ± 0,7 HT18.8 + + + Chú thích: (+): Hoạt tính yếu (≤4 mm) 37
Chủng HT12.7 có hoạt tính enzyme mạnh nhất, đặc biệt là hoạt tính cellulase và protease, tiếp theo là các chủng HT10.6 và HT17.15, 2, 2 chủng còn lại là HT12.5 và HT18.8, cả 3 hoạt tính enzyme đều biểu hiện rất yếu (hình 3.9).
Hình 3.9. HT enzyme của 5 chủng xạ khuẩn lựa chọn
1: HT17.15 2: HT12.7 3: HT12.5 4: HT10.6 5: HT18.8.
Căn cứ từ kết quả trên, chúng tôi đã lựa chọn chủng HT12.7 để tiếp tục nghiên cứu khả năng chịu nhiệt của enzyme.