1: HT17 8; 2 HT18.4 ; 3 HT19 1; 4 HT18
3.3.2.Khả năng chịu nhiệt của enzyme
Các enzyme ngoại bào được ứng dụng nhiều trong công tác bảo vệ môi trường để xử lý các rác thải hữu cơ. Chính vì vậy, khả năng chịu nhiệt của enzyme là một trong các đặc điểm cần phải được nghiên cứu.
Để xác định khả năng chịu nhiệt của enzyme từ chủng HT12.7, chúng tôi tiến hành nuôi lắc chủng xạ khuẩn này trong môi trường dịch thể để thu dịch enzyme thô. Tiến hành xử lý dịch enzyme thô ở các mức nhiệt độ: 400C; 500C; 600C; 700C và 800C trong thời gian 20, 40, và 60 phút. Hoạt tính enzyme được xác định bằng phương pháp khuếch tán trên đĩa thạch. Kết quả được trình bày trên bảng 3.11.
Bảng 3.11. Khả năng bền nhiệt của dịch enzyme chủng HT12.7
38
Đối chứng (dịch enzyme chưa xử lý nhiệt độ): Amylase: 17,2 ± 0,1; Cellulase: 22,1 ± 0,3; Protease: 24,8 ± 0,5; ( -) : Không có hoạt tính
Kết quả trên cho thấy, hoạt tính enzyme của chủng HT12.7 tương đối bền vững với nhiệt độ, hoạt tính có sự thay đổi khi tăng dần thời gian xử lý ở cùng một mức nhiệt độ. Khả năng phân giải 3 nguồn cơ chất có sự khác nhau. Hoạt tính của 3 loại enzyme đều tương đối ổn định ở 2 mức nhiệt độ 400C và 500C. Hoạt tính giảm rất nhanh ở các mức nhiệt độ 600C, 700C và 800C. Các enzyme cellulase và protease có khả năng chịu nhiệt tốt hơn, ở 800C hoạt tính enzyme vẫn không bị mất, trong khi đó, với enzyme amylase, hầu như không còn hoạt tính ở 700C và 800C.
39
Tài liệu chia sẻ tại: wWw.SinhHoc.edu.vn
Thời gian (phút) Enzyme Hoạt tính enzyme (D-d, mm) 400C 500C 600C 700C 800C 20 Amylase 17,1 ± 0,2 16,8 ±0,2 11,1 ±0,1 - - Cellulase 22,1 ± 0,1 21,5 ±0,7 11,2 ±0,1 9,9 ± 0,1 9,8 ± 0,1 Protease 24,8 ±0,1 23,8 ±0,1 17,8 ±0,2 11,2,±,0,2 9,1 ± 0,1 40 Amylase 16,9 ± 0,2 16,8 ±0,1 5,3 ± 0,5 - - Cellulase 20,2 ± 0,6 20,1 ±0,7 11,0 ±0,1 6,0 ± 0,1 4,9 ± 0,1 Protease 24,1 ± 0,5 22,9 ±0,1 15,8 ±0,3 11,4 ± 0,4 6,7 ± 0,1 60 Amylase 15,9 ± 0,3 15,8 ±0,2 3,9 ± 0,1 - - Cellulase 18,9 ± 0,1 17,9 ±0,1 10,0 ±0,1 6,1 ± 0,1 - Protease 23,9 ± 0,1 22,9 ±0,1 13,1 ±0,1 11,1 ± 0,1 6,1 ± 0,1
Hình 3.10. Khả năng chịu nhiệt của Cellulase
Hình 3.11. Khả năng chịu nhiệt của Amylase
40
Hình 3.12. Khả năng chịu nhiệt của Protease
Hình 3.13. Vòng phân giải cơ chất của enzyme sau khi đã xử lý với nhiệt độ trong thời gian 20 phút
41