mức liều của TE.
Như đã đề cập ở phần tổng quan, để gây mô hình suy giảm trí nhớ có nhiều phương pháp như: mô hình chuyển gen, mô hình nuôi cấy tế bào, mô hình gây độc tế bào thần kinh do toxin, phẫu thuật gây suy giảm trí nhớ [28], [32], [31],[20]. Đối tượng được sử dụng cho các mô hình gây suy giảm trí nhớ cũng khá đa dạng, có thể là ruồi giấm, tế bào và chuột. Tuy nhiên số lượng nghiên cứu sử dụng chuột chiếm đa số trên lâm sàng. Với ưu điểm dễ triển khai, nguồn cung cấp dồi dào, chi phí thấp và dễ chăm sóc trong quá trình nghiên cứu, nên chúng tôi sử dụng chuột làm động vật tiến hành thực nghiệm.
Trimethyltin (TMT) là một chất chất độc thần kinh mạnh gây ra thoái hoá tế bào thần kinh trung ương cả người và động vật. Tiêm TMT gây ra tổn thương các tế bào thần kinh hình tháp ở hồi hải mã và cả ở các khu vực liên quan ở chuột, hơn nữa cấu trúc hồi hải mã là vùng đặc biệt dễ bị tổn thương. Các nghiên cứu trước đây đã báo cáo rằng tiêm TMT làm tăng nguy cơ chết tế bào thần kinh, thông qua khả năng gây kích thích tăng nồng độ canxi nội bào và tổn thương ty thể. Ở loài gặm nhấm, TMT được phát hiện là nguyên nhân gây ra tình trạng thiếu hụt nhận thức phụ thuộc vào hồi hải mã, bao gồm cả trí nhớ ngắn hạn bằng thử nghiệm tránh thụ động và nhận dạng đối tượng mới; trí nhớ làm việc không gian bằng thử nghiệm mê lộ Y [23]. Do đó, chuột mất tế bào thần kinh gây bởi TMT là một mô hình tiềm năng để đánh giá các tác nhân điều trị trên lâm sàng cho nhiều loại suy giảm trí nhớ, tạo điều kiện mô phỏng chặt chẽ sinh lý bệnh tương tự như ở người.
Trên thực tế, mô hình sử dụng chuột chuyển gen AD cũng được sử dụng nhiều trong các nghiên cứu. Tuy nhiên biểu hiện bệnh lý còn phụ thuộc vào biến đổi gen của động vật thí nghiệm và mô hình này thường thiếu sự xuất hiện đầy đủ các đặc điểm bệnh lý khác xác định AD. Vì vậy khi so sánh, mô hình gây suy giảm trí nhớ sử dùng chất gây độc thần kinh trên chuột được tiến hành đơn giản, dễ dàng và các biểu hiện thoái hoá thần kinh được thể hiện gần với thực tế hơn. Tuy nhiên cần lưu ý trong quá trình thực nghiệm, TMT là chất gây độc nên liều lượng sử dụng cho động vật thí nghiệm cần được tính toán tránh gây chết và an toàn trong khi tiến hành đối với người thực hiện.
33
Trong các bệnh lý của suy giảm trí nhớ thì sự thoái hoá, tổn thương tế bào thần kinh do stress oxy hoá đóng vai trò quan trọng trong các nguyên nhân và yếu tố nguy cơ [4], [7], [41]. Điều này dẫn đến vai trò của các chất nguồn gốc từ dược liệu có tác dụng chống oxy hoá, bảo vệ tế bào thần kinh khỏi các tác nhân gây thoái hoá, và khả năng cải thiện suy giảm trí nhớ. Những nghiên cứu thực nghiệm được tiến hành chứng minh tác dụng cải thiện suy giảm trí nhớ của các flavonoid phân lập từ dược liệu do tác dụng chống oxy hoá, mở ra hướng đi mới trong phòng và điều trị các bệnh lý thần kinh [2].
Về Talipariti elatum Sw, đây là một loại cây đặc trưng và phổ biến ở Cuba. Các nghiên cứu cho thấy tác dụng chống oxy hoá, dọn gốc tự do, bảo vệ tế bào thần kinh trên in vitro của gossypitrin trong hoa của T. elatum [28]. Do tác dụng chống oxy hoá, bảo vệ tế bào thần kinh nên T. elatum có tiềm năng trong khả năng cải thiện suy giảm trí nhớ. Việc đa dạng các nguồn nguyên liệu thiên nhiên có tác dụng trong điều trị các bệnh lý thần kinh giúp tạo cơ hội phát triển các thuốc mới trong tương lai. Chính vì thế chúng tôi tiến hành nghiên cứu này để đánh giá tác dụng cải thiện suy giảm trí nhớ của
T. elatum.
Nghiên cứu nằm trong khuôn khổ hợp tác giữa Viện Dược liệu, Việt Nam và Viện CIDEM, Cuba. Phòng thí nghiệm thần kinh thực nghiệm tại CIDEM đã triển khai nghiên cứu in vivo mô hình suy giảm trí nhớ trên chuột gây bởi scopolamin để chứng minh tác dụng cải thiện suy giảm trí nhớ của T. elatum. Kết quả cho thấy tác dụng cải thiện suy giảm trí nhớ của TE ở hai mức liều 10 mg/kg CN và 40 mg/kg CN. Vì thế chúng tôi tiếp tục tiến hành nghiên cứu đánh giá tác dụng ở hai mức liều này trên mô hình chuột mất tế bào thần kinh bởi TMT. Trong thử nghiệm thử độc tính cấp đường uống cho thấy cao chiết từ T. elatum, liều tối đa dung nạp đường uống ở động vật thí nghiệm là 2000 mg/kg CN [9]. Do đó, đánh giá tác dụng cải thiện suy giảm trí nhớ ở hai mức liều trên là an toàn đối với động vật thí nghiệm. Chúng tôi sử dụng hai mô hình hành vi là thử nghiệm OLT và thử nghiệm mê lộ chữ Y, tiến hành nhuộm Nissl xác định cơ chế hoá sinh tác dụng cải thiện suy giảm trí nhớ của T. elatum. Ở cả hai mức liều, T.
elatum đều cho thấy tác dụng cải thiện suy giảm trí nhớ trên mô hình hành vi và cho
thấy cải thiện tình trạng tế bào thần kinh bằng phương pháp nhuộm Nissl trên chuột TMT. Tuy nhiên, mỗi mức liều trong từng thử nghiệm thể hiện tác dụng cải thiện suy giảm trí nhớ và khả năng bảo vệ tế bào thần kinh là khác nhau. Ví dụ, mức liều TE 10 mg/kg CN có tác dụng cải thiện trí nhớ ngắn hạn trong thử nghiệm OLT, không có tác
34
dụng cải thiện suy giảm trí nhớ không gian trong thử nghiệm Y-maze, nhưng có tác dụng tăng hồi phục tế bào thần kinh cả vùng CA1 và CA3 ở hồi hải mã. Điều này cho thấy mỗi mức liều có những tác động khác nhau đối với trí nhớ liên quan đến hồi hải mã. Chính vì thế, cần nghiên cứu đánh giá thêm các mức liều khác để lựa chọn liều có hiệu quả điều trị tốt nhất. Do điều kiện tiến hành có hạn, nên trong nghiên cứu này chúng tôi mới chỉ đánh giá tác dụng cải thiện suy giảm trí nhớ của T. elatum trên hai mức liều 10 mg/kg và 40 mg/kg CN.