đến tỷ lệ nhiễm khuẩn
Khử trùng 5 mẫu giống hạt thí nghiệm trên 4 loại môi trường: CT1 : Cồn 70o trong 15 – 20 phút.
CT2: Khử trùng bằng HgCl2 0.01%, lắc trong 10 phút
CT3 : Ca(OCl)2 nồng độ 0.70% + 0.1% Tween 20, lắc trong 15 – 20 phút. CT4 : Viên khử trùng y tế Johson nồng độ 10%, lắc trong 15 – 20 phút. Sau thí nghiệm 1 tìm ra được công thức khử trùng tối ưu (CT tối ưu 1).
Thí nghiệm 1 được tiến hành vào ngày 4/2/2010. Hạt được khử trùng trên 4 loại môi trường là các công thức: CT1, CT2, CT3, CT4. Mỗi thí nghiệm tiến hành trên 20 hạt Cam. Hạt được rửa sạch bằng nước cất 1 – 2 lần rồi tiến hành khử trùng trong buồng cấy vô trùng bằng cách ngâm ngập hạt trong các dung dịch khử trùng. Hạt được rửa lại bằng nước cất vô trùng 5 lần rồi tiến hành cấy vào ống nghiệm (dung dịch Johson 10% không cần phải rửa lại bằng nước cất) chứa môi trường rắn MS 30g/L saccarose pH 5.7. Thời gian nuôi cấy khoảng từ 3 đến 4 tuần: 2 tuần đầu để trong bóng tối sau đó chuyển mẫu sang phòng nuôi cấy mô khoảng 2 tuần ở chế độ sáng 16h, nhiệt độ 20 – 260C, ẩm độ 60 – 70 %. Sau 2 tuần tuổi ta tiến hành đo các chỉ tiêu sau: Tỷ lệ nhiễm, tỷ lệ sinh trưởng và phát triển của cây Cam. Sau 2 tuần tuổi ta có kết quả nhiễm như sau:
Bảng 1. Đo kết quả nhiễm ở cây Cam 14 ngày tuổi
Công thức Số hạt reo Số hạt nhiễm % nhiễm
CT1 20 16 80%
CT2 20 0 0%
CT3 20 5 25%
Biểu đồ 1. Tỷ lệ nhiễm số hạt reo sau 2 tuần tuổi
Bảng đo chiều cao (cm) của cây Cam 28 ngày tuổi ở 4 thí nghiệm khử trùng
Bảng 2: Đo chiều cao Cam Vinh 28 ngày tuổi
Cây CT1 CT2 CT3 CT4 1 8,6 7,3 8,9 9,4 2 8,7 7,2 9,1 11,4 3 8,4 7,2 8,6 12,3 4 7,8 0* 8,6 8,7 5 7,4 9,0 11,8 6 6,4 9,3 10,5 7 0 9,9 8,6 8 6,6 10,5 8,8 9 6,8 10,4 11,6 10 0 8,6 9,3 11 6,8 9,3 9,5 12 7,0 10,2 10,4 13 6,9 9,7 11,4 14 6,8 8,9 10,6 15 7,2 9,6 10,7 16 0 11,2 17 6,6 18 7,3 19 6,9 20 7,1 Trung bình (cm) 8,4 5,6 9,4 10,4 Tỷ lệ nảy mầm 20% 80% 75% 80%
Biểu đồ 2. Chiều cao cây trung bình sau 28 ngày tuổi
Hình 4: ảnh hưởng của hóa chất khử trùng hạt giống
Qua 2 bảng trên ta thấy: Khử trùng bằng Hgcl2 cho tỷ lệ nhiễm thấp nhất (0%). Trong khi đó khử trùng bằng cồn 700 gần như nhiễm toàn bộ (80%). Khử trùng bằng Johson và nước Javen cho tỷ lệ nhiễm là 20% và 25%.
Theo dõi khả năng nảy mầm của hạt và sinh trưởng của cây con ta thấy:
- Khử trùng bằng Hgcl2 tuy không bị nhiễm nhưng khả năng nảy mầm và khả năng sinh trưởng chậm hơn. Cụ thể một số hạt không nảy mầm mà hóa nâu (do mô bị chết hoại), chiều cao cây thấp hơn( 5,6 cm) trong khi khử trùng bằng các chất khác thì hạt nẩy mầm và sinh trưởng tốt hơn. Tỷ lệ nảy mầm của Hgcl2 bằng với dung dịch Johson =80%. Tỷ lệ nẩy mầm của nước Javen là 75%, Tỷ lệ nẩy mầm của Cồn 700 là 20%. Khả năng sinh trưởng của các môi trương khác là:Với Cồn là 8,4(cm), Javen là 9,4( cm), Johson là 10,4( cm).
Chất lượng cây: Hgcl2: Thân nhỏ, lá hơi quăn, nhiều cây thân vàng. Còn đối với Cồn, dung dịch Johson và Javen thì cây mập, thân và lá xanh, lá to bản.
=> Kết luận : Khử trùng bằng dung dịch Johson 10% lắc trong 15-20 phút cho kết quả tốt nhất.