4. KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN
4.1.3.1. Kiểm tra thuần khiết
để kiểm tra chỉ tiêu vô trùng của lô giống gốc, chúng tôi lấy mẫu và tiến hành kiểm tra theo 10 TCN 161 Ờ 92 ỘVacxin thú y Ờ Quy trình kiểm tra vô trùngỢ.
Với 3 ống giống gốc ựược hoàn nguyên trở lại dạng ban ựầu bằng dung dịch PBS- vô trùng. Môi trường ựược sử dụng trong thắ nghiệm là thạch máu, nước thịt, nước thịt gan yếm khắ và thạch nấm. Mỗi loại môi trường ựược sử dụng 2 ống, hút 1 ml huyễn dịch trên vào các môi trường qui ựịnh. Môi trường ựã cấy kiểm tra ựem bồi dưỡng trong tủ ấm 37oC, theo dõi 7 ngày. Riêng môi trường nấm sau khi cấy huyễn dịch ựể ở nhiệt ựộ phòng (25 Ờ 30oC) ựể theo dõi. Kết quả kiểm tra ựược trình bày trên bảng 4.3.
Bảng 4.3: Kết quả kiểm tra vô trùng lô giống gốc ựậu gà nhược ựộc
chủng C trên môi trường nuôi cấy tế bào
Loại môi trường kiểm tra STT Thời gian theo dõi (ngày) Thạch máu Thạch nấm Nước thịt Yếm khắ Kết quả 1 7 -- -- -- -- đạt 2 7 -- -- -- -- đạt 3 7 -- -- -- -- đạt
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ẦẦẦẦẦẦẦẦ 45
Qua kết quả kiểm tra trên bảng 4.3 cho thấy, sau 7 ngày theo dõi, cả 3 mẫu giống gốc ựậu gà chủng C ựược kiểm tra vô trùng trên các loại môi trường thạch máu, nước thịt, nước thịt gan yếm khắ và thạch nấm ựều cho kết quả âm tắnh (-), không có vi khuẩn mọc trên các môi trường kiểm tra. Lô giống gốc ựạt yêu cầu theo TCN 161 Ờ 92 ựã ựề ra. Kết quả này cũng ựáp ứng ựược yêu cầu của tiêu chuẩn ASEAN [16] và OIE [25].
điều ựó chứng tỏ lô giống gốc ựậu gà chủng C nuôi cấy trên môi trường tế bào hoàn toàn vô trùng.
4.1.3.2. Kiểm tra an toàn
Tắnh an toàn của lô giống gốc phải ựược chứng minh ngay trong giai ựoạn nghiên cứu và là một yêu cầu bắt buộc ựối với mỗi loại giống. Tiêu chắ kiểm tra an toàn cũng phải ựược tiến hành ựối với từng lô giống. Phương pháp kiểm tra an toàn ựược khuyến cáo nên kiểm tra trực tiếp trên ựộng vật ựắch dự ựịnh sử dụng virus giống. Lô giống ựược kết luận là ựạt yêu cầu khi không có phản ứng cục bộ hay phản ứng toàn thân ựối với vật sử dụng virus giống.
Với lô giống gốc ựậu gà chủng C nuôi cấy trên môi trường tế bào ựược chúng tôi kiểm tra an toàn trực tiếp trên gà nuôi và ựược tiến hành theo tiêu chuẩn ngành 196 Ờ 94 ỘVacxin thú y Ờ Quy trình kiểm nghiệm vacxin đậu gà nhược ựộcỢ.
Ống giống gốc ựược pha trở lại bằng dung dịch PBS- vô trùng.Với mỗi lô thắ nghiệm, chúng tôi chủng dưới da cho 10 gà (1-2 tuần tuổi), mỗi con 10 liều virus giống. Sau khi tiêm, chúng tôi theo dõi phản ứng cục bộ nơi chủng và phản ứng toàn thân trong 14 ngày.
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ẦẦẦẦẦẦẦẦ 46
Bảng 4.4: Kết quả kiểm tra an toàn lô giống gốc ựậu gà nhược ựộc chủng
