- Pha vacxin
24 giờ 48 giờ 72 giờLog TCID
4.3.4.1. Kiểm tra bằng phương pháp trực tiếp: Công thử thách cường ựộc ựối với gà sử dụng vacxin
ựối với gà sử dụng vacxin
Tắnh sinh miễn dịch nói lên khả năng bảo hộ ựộng vật sau khi ựược sử dụng vacxin. Kiểm tra tắnh sinh miễn dịch của vacxin là yêu cầu cần thiết ựối với mỗi lô sản xuất. Có nhiều phương pháp kiểm tra, ựể kiểm tra tắnh sinh miễn dịch của các lô vacxin ựậu gà tế bào, chúng tôi sử dụng phương pháp công cường ựộc.
Với mỗi lô vacxin, chúng tôi chủng cho 10 gà (2-6 tuần tuổi) có cùng nguồn gốc, cùng lứa tuổi ựược lấy từ ựàn gà sạch chưa ựược sử dụng vacxin, mỗi con 1 liều quy ựịnh.
Lô thắ nghiệm 1 - 5: mỗi gà ựược chủng 1 liều vacxin ựậu gà tế bào theo ựường chủng dưới da.
Lô ựối chứng + (lô ựối chứng cường ựộc): Không sử dụng vacxin. Lô ựối chứng - (Lô ựối chứng khỏe): gà không ựược sử dụng vacxin và cũng không ựược thử thách cường ựộc.
Cả 7 lô gà trên ựược nuôi cách ly, hàng ngày theo dõi triệu trứng lâm sàng.
Virus cường ựộc ựậu gà chuẩn ựộ ựể xác ựịnh ựược liều cường ựộc. Sau 14 ngày, chúng tôi tiến hành thử thách cường ựộc với liều 102LD50/con cho gà ở lô thắ nghiệm 1, 2, 3, 4 và 5.
Tiếp tục theo dõi trong 14 ngày. Tắnh sinh miễn dịch của vacxin ựược ựánh giá thông qua số gà thắ nghiệm ựược bảo hộ.
Kết quả kiểm tra hiệu lực các lô vacxin ựậu gà trên môi trường nuôi cấy tế bào thử nghiệm ựược trình bày trên bảng 4.12.
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ẦẦẦẦẦẦẦẦ 62
Bảng 4.12: Kết quả kiểm tra tắnh sinh miễn dịch các lô vacxin ựậu gà C trên môi trường nuôi cấy tế bào.
Nội dung Lô 1 Lô 2 Lô 3 Lô 4 Lô 5 đối chứng + ( cường ựộc) đối chứng Ờ (khoẻ)
Số gà thắ nghiệm
(Con) 10 10 10 10 10 10 10
Tuổi của gà (2 Ờ 6) tuần tuổi
Liều sử dụng 1liều Không tiêm vacxin Không tiêm
vacxin Liều virus cường
ựộc (LD50) 10
2 Không công
cường ựộc Triệu chứng lâm
sàng Không Mụn ựậu trên da Không
Bệnh tắch Không Không
Số con chết 0 0 0 0 0 10 0
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ẦẦẦẦẦẦẦẦ 63
Qua bảng 4.12 cho thấy:
Ở cả 5 lô vacxin, với những gà thắ nghiệm ựược chủng vacxin, sau 14 ngày công cường ựộc, toàn bộ gà ựều sống sót và không biểu hiện triệu chứng bệnh tắch của bệnh ựậu gà, tỷ lệ bảo hộ ựạt 100%.
Lô gà ựối chứng dương (+): Gà không ựược chủng vacxin, sau 3 Ờ 5 ngày công cường ựộc, toàn bộ gà ựều có biểu hiện triệu chứng lâm sang: mụn ựậu trên da.
Lô gà ựối chứng âm (-) không sử dụng vacxin cũng như không thử thách cường ựộc: Toàn bộ gà ựều sống khỏe và phát triển bình thường.
Tham chiếu TCN 196 Ờ 94 ỘVacxin thú y Ờ Quy trình kiểm nghiệm vacxin đậu gà nhược ựộcỢ [2] và khuyến cáo của ASEAN [16], gà ựược sử dụng vacxin ựậu gà trên môi trường nuôi cấy tế bào sản xuất tại Xắ nghiệp thuốc thú y Trung Ương ựạt chỉ tiêu hiệu lực, tỷ lệ bảo hộ cao.
Kết luận: Vacxin ựậu gà nhược ựộc ựông khô thắch nghi trên môi trường tế bào xơ phôi gà ựể sử dụng phòng bệnh cho ựàn gà ựã ựạt các chỉ tiêu vô trùng, an toàn và hiệu lực. Vacxin an toàn khi dùng cho gà (2 Ờ 6) tuần tuổi liều vacxin gấp 10 lần liều sử dụng, vị trắ chủng dưới da, theo dõi 14 ngày, gà vẫn ăn uống, hoạt ựộng bình thường. Vacxin ựạt chỉ tiêu hiệu lực khi gà mẫn cảm ựược tiêm 1 liều vacxin, 14 ngày sau công cường ựộc gà ựược bảo hộ, còn gà ựối chứng thể hiện bệnh tắch ựặc trưng của bệnh ựậu gà. Qua các kết quả nghiên cứu trên khẳng ựịnh vacxin ựậu gà chủng C nhược ựộc ựông khô chế trên môi trường tế bào xơ phôi gà hoàn toàn vô trùng, có ựộ an toàn cao và hiệu lực cao.
Với phương pháp nuôi cấy virus ựậu gà chủng C trên môi trường tế bào xơ phôi gà một lớp ựã tạo ra ựược một sản phẩm vacxin ựảm bảo mọi chỉ tiêu chất lượng như: ựộ tinh khiết, tắnh vô trùng, tắnh an toàn và hiệu lực, có chất lượng tương ựương với vacxin truyền thống của Xắ nghiệp thuốc thú y Trung
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ẦẦẦẦẦẦẦẦ 64
Ương. Với phương pháp mới này, việc ựảm bảo vô trùng trong quá trình sản