Dựa theo phương pháp của Phạm Thị Trõn Chõu, Nguyễn Thị Hiền, Phùng Gia Tường [20, 22].
* Nguyên lý: Dưới tác dụng của acid, thuỷ phõn hoàn toàn tinh bột thành glucose. Định lượng đường khử, suy ra hàm lượng tinh bột có trong nguyên liệu.
* Tiến hành thí nghiệm: - Hoá chất:
+ Dung dịch HCl 25% + Dung dịch NaOH 10%
+ Dung dịch Fehling B: Hoà tan 200g muối Seignet, 150g NaOH trong 1 lít nước cất
Trước khi dùng pha Fehling A với Fehling B theo tỉ lệ 1/1 được thuốc thử Fehling.
+ Dung dịch KMnO4 1/30N: cõn 1,06 g KMnO4, hoà tan trong 1 lít nước cất + Dung dịch Fe2(SO4)3 trong axit sunfuric: Hoà tan 50 g Fe2(SO4)3 vào 20 g H2SO4 đậm đặc (d= 1,84) trong nước cất và dẫn tới 1 lít.
- Thí nghiệm:
+ Cõn 2 g nguyên liệu, nghiền nhỏ, trộn đều, chuyển sang cốc. Cho váo cốc 100 ml nước cất, khuấy đều trong khoảng từ 45 đến 60 phút, sau đó lọc tinh bột bằng phễu có giấy lọc. Tráng lại cốc và rửa tinh bột nhiều lần bằng nước cất để loại toàn bộ đường khỏi tinh bột.
+ Chuyển phễu lọc chứa tinh bột sang bình tam giác (250 ml), dùng đũa thuỷ tinh nhỏ chọc thủng giấy lọc, dồn tinh bột xuống bình tam giác bằng nước cất (khoảng 80-100 ml). Sau đó cho 125 ml HCl 25% vào bình tam giác, đun cách thuỷ 2,5 đến 3 giờ, thỉnh thoảng lắc bình. Sau khi kết thúc thời gian thuỷ phõn tinh bột, làm nguội bình, trung hoà dung dịch thuỷ phõn bằng NaOH 10%. Chuyển toàn bộ dung dịch sang bình định mức (250 ml), dùng nước cất dẫn đến mức của bình. Khuấy đều, lọc dung dịch, được dịch lọc trong suốt để định lượng đường khử (glucose, mantose...)
+ Định lượng đường khử bằng phương pháp Bectrand [20]: Lấy 5 ml dịch lọc mẫu ở trên, hoà cùng 20 ml dung dịch Fehling . Đun sôi hỗn hợp trong 3 phút (kể từ khi xuất hiện bọt đầu tiên), để cho kết tủa đỏ gạch lắng xuống, rửa kết tủa nhiều lần bằng nước cất nóng.
Hoà tan kết tủa bằng dung dịch Fe2(SO4)3
Chuẩn độ bằng dung dịch KMnO4 1/30N cho đến khi xuất hiện màu hồng bền trong 30 giõy.
+ Sau khi xác định được khối lượng glucose có trong dung dịch phõn tích (mg) tớnh hàm lượng tinh bột (%) trong nguyên liệu theo công thức sau:
X: Lượng glucose (mg) có trong dung dịch phõn tích V1: Số ml dung dịch thuỷ phõn (250ml)
V2: Số ml dung dịch đem phõn tích
g: Lượng nguyên liệu đem phõn tích (mg)
0,9: Hệ số tớnh chuyển từ glucose thành tinh bột
