Môi trường phân lập nấm Linh chi (giống gốc): môi trường PDA được chuẩn bị theo các bước sau:
+ Khoai tây được gọi vỏ, cắt nhỏ thành từng miếng, cho vào 2 lít nước. Đun sôi, cạn đến khi còn 1 lít, lọc bỏ xác khoai tây, để nguội lấy dịch chiết khoai tây. Rót dịch chiết vào chai chịu nhiệt 1 lít được chuẩn bị sẳn với 20g đường glucose, 20g agar, KH2PO4 3g, MgSO4.7H2O 1,5g, Vitamin B1 10−20mg. Khử trùng ở 121oC, 1 atm trong 20 phút. Phân phối môi trường vào đĩa petri (được thực hiện trong điều kiện vô trùng). Bật UV trong khoảng 20 phút để môi trường nguội và đặc lại.
Môi trường giống cấp 1: tùy theo các loài nấm khác nhau mà thành phần dùng để nhân giống cấp 2 cũng khác nhau. Ở đây ta chọn môi trường lúa là môi trường dùng nhân giống nấm Linh chi (Ganoderma).
Bảng 9. Thành phần môi trường nhân giống cấp 1
Thành phần Đơn vị
Lúa 1000g
Cám gạo 50g
Bột bắp 50g
Một kg lúa đem phơi khô rồi nấu đến khi hạt lúa vừa nở (khoảng 3 giờ), sau đó đem phơi hoặc sấy khô đến độ ẩm phù hợp (khoảng 60-70%) rồi bổ sung dinh dưỡng với tỷ lệ 5% cám gạo và 5% bột bắp so với lúa, cho hỗn hợp vào túi polypropylene, khử trùng 1210C trong 60 phút, lấy ra để nguội.
Môi trường giống cấp 2
+ Thân cây khoai mì được gọt bỏ vỏ, cắt thành từng đoạn khoảng 10 cm, rồi chẻ nhỏ vừa phải (1-1,5cm), luộc trong khoảng 4 giờ, để nguội. Rửa lại với nước sạch, để ráo trên khay, tiến hành phối trộn thêm dinh dưỡng bổ sung cám gạo:bột bắp (tỷ lệ 1:1) để bột dinh dưỡng dính vào que khoai mì, vô bọc polypropylene khử trùng ở 121oC, 1 atm, trong 60 phút, lấy ra để nguội.