- Từ cặn chiết ethyl acetate:
Hình 3.2 Sơđồ phân lập các hợp chất từ cặn chiết etyl axetat của củ sâm đại hành
Cặn EB/Et
SKC, SiO2, gradient HX:Aceton(40:1 -1:1)
EB-A EB-B EB-C EB-D
SKC, SiO2 CHCl3:Aceton 10:1) SKC, SiO2 HX:Aceton (5:1) EB-14 (10mg)
EB-B1 EB-B2 EB-B3 EB-B4
EB-2 (12mg) EB-10 (8mg) SKC, YMC RP-18, MeOH:H2O (6:1) EB-4 (5mg) (9mg) EB-5 (15mg) EB-6 SKC, YMC RP-18 Aceton:H2O (3:1)
Cặn chiết ethyl acetate EB/Et (53 g) của củ sâm đại hành được tiến hành chạy sắc ký cột silica gel với hệ dung môi n-hexane:aceton (40:1 → 1:1, v/v) thu được bốn phân đoạn nhỏ EB-A, EB-B, EB-C, và EB-D. Tiến hành chạy sắc ký cột silica gel phân đoạn EB-B với hệ dung môi rửa giải CHCl3-aceton (10:1, v/v) thu được bốn phân đoạn từ EB-B1 đến EB-B4. Từ phân đoạn EB-B1, chạy sắc ký cột pha
đảo YMC-18 RP với hệ dung môi rửa giải MeOH- H2O (6:1, v/v) thu được chất
EB-2 (12,0 mg) và EB-10 (8,0 mg). Bằng phương pháp tương tự chạy sắc ký cột pha đảo với chất hấp phụ YMC-18 RP đối với phân đoạn EB-B3, hệ dung môi rửa giải là aceton:H2O (3:1, v/v) thu được chất EB-4 (5,0 mg), EB-5 (9,0 mg), và EB-6
(15,0 mg). Tiếp tục xử lý phân đoạn EB-D bằng cách chạy sắc ký cột silica gel và hệ dung môi n-hexane:aceton (5:1, v/v) thu được chất EB-14 (10,0 mg).
- Từ cặn nước:
Hình 3.3 Sơđồ phân lập các hợp chất từ cặn nước của củ sâm đại hành
Từ phần cặn nước (EB/W, 67 g) chạy sắc ký cột Dianion HP-20 với dung dịch MeOH có nồng độ tăng dần (0%, 25%, 50%, 75%, và 100%) thu được 5 phân đoạn: EB-E, EB-F, EB-G, EB-H và EB-K. Phân đoạn EB-G chạy sắc ký cột silica gel với hệ dung môi CHCl3:MeOH:H2O (5:1:0,15, v/v/v) thu được 3 phân đoạn: EB-G1, EB-G2, và EB-G3. Từ phân đoạn EB-G1, chạy sắc ký cột pha đảo, chất hấp phụ
Cặn EB-W
SKC, Dianion HP-20P, dd MeOH (0%, 25%, 50%, 75%, 100%)
EB-E EB-G EB-H EB-K
SKC, SiO2 CHCl3:MeOH:H2O (5:1:0,15) SKC, LH-20 MeOH EB-1 (5mg) EB-3 (9mg)
EB-G1 EB-G2 EB-G3
EB-7 (12mg) (15mg) EB-8 SKC, YMC RP- 18,Aceton:H2O (1:2) EB-9 (8mg) EB-12 (9mg) (14mg) EB-13 SKC, YMC RP-18 MeOH:H2O (1:1) EB-F EB-11 (19mg)
YMC-18 RP và hệ dung môi rửa giải acetone:H2O (1:2, v /v) thu được chất EB-7
(12,0 mg), EB-8 (15,0 mg), và EB-9 (8,0 mg). Phân đoạn EB-G3 chạy sắc ký cột YMC RP-18 YMC, hệ dung môi MeOH:H2O (1:1, v/v) thu được chất EB-12 (9,0 mg) và EB-13 (14,0 mg). Với phân đoạn EB-K, chúng tôi chạy sắc ký cột sephadex LH-20 với chất rửa giải MeOH thu được chất EB-1 (5,0 mg), EB-3 (9,0 mg), và
EB-11 (19,0 mg).