1. 3N ội dung thực hiện
3.2.4 Thí nghiệm 4: Khảo sát dung môi trích ly thích hợp trong quy trình
phân tích đồng thời các chất dichlorvos, trifluralin, diazinon, malathion trên sản phẩm thủy sản và nước
3.2.4.1 Mục đích
Nhằm tìm ra chất chiết tách cho kết quả tốt nhất.
3.2.4.2 Chuẩn bị mẫu thí nghiệm Spike chuẩn trước:
Cân 2g mẫu cá, tôm (nghiền) cho vào ống ly tâm 15ml, spike 100l hỗn hợp chuẩn thuốc trừ sâu ở nồng độ 1ppm vào, vortex và để khoảng 15 phút, thêm dung dịch dùng ly trích (Acetonitril, ethylacetat hoặc acetonitril : aceton (tỉ lệ 1:1)), vortex khoảng 1 phút, lắc 20 phút, ly tâm 20 phút (tốc độ 5000 rpm, 250C), gạn lấy phần dịch trong cho vào bình cầu thuỷ tinh nếu cô cạn bằng hệ thống cô quay hoặc ống fancol mới khi thổi khô 450C. Phần rắn cho lại dung môi ly trích chiết tách lần 2.
Riêng dung dịch ly trích bằng acetonitrile chia ra trong 2 ống fancol cho vào 5ml nước và 5ml Choloform lắc đều, ly tâm 10 phút (5000 rpm, 250C), dung dịch tách thành 2 lớp, lấy lớp dưới cho vào bình cầu thuỷ tinh nếu làm khô bằng hệ thống cô quay hoặc ống fancol mới khi thổi khô 450C, bỏ lớp dung dịch phía trên.
Trên mẫu nước: 50ml vào bình chiết tách có van xả, spike 50l dung dịch chuẩn nồng độ 1 ppm vào lắc đều, thêm dung môi chiết tách (acetonitrile, etylacetate, dichlomethan) vào lắc 1 phút, cho choloform vào dung dịch tách 2
lớp, vặn van xả lấy lớp dưới cho vào ống fancol đi thổi khô. Riêng dung môi ly trích dichlomethan không thêm choloform.
Cô cạn dung dịch, hoàn nguyên lại 1 ml n-hexane (vortex 1 phút), lọc qua fiter (Ø = 0.2µm) cho vào vial, chạy sắc ký.
Spike chuẩn sau: tiến hành như các bước spike chuẩn trước, sau khi cô cạn dung dịch mới spike chuẩn vào.
Chuẩn bị mẫu trắng: mẫu trắng cũng được tiến hành chuẩn bị giống như mẫu thí nghiệm.
Chạy sắc ký: mẫu sau khi chiết tách và làm sạch xong thì tiến hành chạy sắc ký ngay.
3.2.4.3 Bố trí thí nghiệm
Hình 3.4 Sơ đồ bố trí thí nghiệm 4 (trên mẫu cá và tôm) - A1: Acetonitrile
- A2: Ethylacetat
- A3: Acetonitrile : Aceton
A3 Mẫu
Dung dịch chuẩn thuốc trừ sâu
A1
Chiết tách
Cô quay ở 450C Hoàn lưu 1ml n-hexane Lọc (Ø = 0.2µm) cho vào vai
Vortex 1 phút, Lắc 20 phút Ly tâm 20 phút
Chạy sắc ký khí A2
Hình 3.5 Sơ đồ bố trí thí nghiệm 4 (trên mẫu nước)
Thí nghiệm bố trí hoàn toàn ngẫu nhiên với một nhân tố B (dung môi ly trích) - B1: Acetonitrile - B2: Ethylacetate - B3: Ethylacetate-SPE - B4: Dichloromethan Số lần lặp lại: 2lần Số nghiệm thức: 3 x 2 = 6 3.2.4.4 Đánh giá
Hiệu suất thu hồi, độ nhiễu nền của sắc ký đồ và độ ổn định.