ðược tiến hành ủịnh tuype theo phương phỏp Kauffmann (1972) * Xỏc ủịnh nhúm khỏng nguyờn O bằng huyết thanh ủa giỏ
Sử dụng phản ứng ngưng kết nhanh với khỏng nguyờn O của vi khuẩn
Salmonella. Phương phỏp tiến hành như sau:
Phiến kớnh sạch ủược chia làm 2 phần. Dựng ống hỳt Pasteur hoặc que cấy vụ trựng, nhỏ mỗi bờn phiến kớnh 1 giọt nước sinh lý. Dựng que cấy vụ trựng, lấy một ớt khuẩn lạc ủiển hỡnh của chủng vi khuẩn Salmonella cần
ủịnh typ ủó mọc trờn mụi trường thạch mỏu, trộn ủều với nước sinh lý ủó nhỏ sẵn ở 2 bờn phiến kớnh thành huyễn dịch khỏng nguyờn. Sau ủú, tiến hành nhỏ một giọt huyết thanh ủa giỏ nhúm O vào huyễn dịch khỏng nguyờn
ủó chuẩn bịở hai bờn thớ nghiệm, cũn bờn ủối chứng thỡ nhỏ 1 giọt nước sinh lý (ủối chứng õm) và trộn ủều. Sau 1 – 2 phỳt ủọc kết quả.
Phản ứng dương tớnh khi cú cụm ngưng kết xuất hiện, nước xung quanh trong
ðối chứng õm: Hai bờn hỗn dịch vẫn ủục ủều
Nếu cả 2 bờn ủều xuất hiện ngưng kết , thỡ ủú là ngưng kết giả, phải làm lại thớ nghiệm.
Trường ðại học Nụng nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học nụng nghiệp……… 50
Chọn những chủng Salmonella ủó ngưng kết với huyết thanh ủa giỏ nhúm O, tiến hành làm ngưng kết như trờn với tất cả huyết thanh nhúm O
ủơn giỏ thuộc nhúm ủó ngưng kết. Nếu chủng vi khuẩn ngưng kết với huyết thanh O ủơn giỏ nào thỡ thuộc Serotyp O ủú.
* Xỏc ủịnh khỏng nguyờn H với khỏng huyết thanh H ủa giỏ ủối với vi khuẩn Salmonella:
Cho vào ống tuyp 2,5ml canh trựng một lượng tương ủương dung dịch Salin và formol. ðể ở nhiệt ủộ phũng trong 3 giờ. Sau ủú, lấy một typ vụ trựng mới, cho vào ủú 0,25 ml hỗn dịch núi trờn, cho thờm vào ủú 0,25ml khỏng huyết thanh ủó pha sẵn hoặc 1 giọt khỏng huyết thanh H ủa giỏ, ủun cỏch thuỷ 500C trong 1 giờ.
* ðọc kết quả
+ Phản ứng dương tớnh khi khỏng nguyờn và khỏng huyết thanh kết hợp với nhau, tạo nờn kết tủa bụng rừ ở ủỏy ống nghiệm.
+ Phản ứng õm tớnh khi khụng cú kết tủa ởủỏy ống nghiệm.
*Xỏc ủịnh khỏng nguyờn H với khỏng huyết thanh ủơn giỏ của vi khuẩn
Salmonella
Tương tự như xỏc ủịnh khỏng nguyờn O ủơn giỏ nhưng phải tiến hành làm 2 phản ứng với 2 pha: pha 1 (ủặc hiệu) và pha 2 (khụng ủặc hiệu).
Sau ủõy là cấu trỳc khỏng nguyờn của 3 chủng Salmonella thường gặp: S. typhimurium O1,4, [4],12 Hi: 1,2
S. enteritidis O1, 9, 12 H [f],g, m, [p]: [ 1,7] S. choleraesuis O 6, 7 Hc, 1, 5