Mảnh nhỏ với đường kính 2 cm của lá dừa Ta sau khi ươm 60 ngày được đo cường độ quang hợp bằng máy Hansatech ở nhiệt độ 25oC, ánh sáng 2500 lux. Cường độ quang hợp được biểu hiện bằng µl oxygen giải phóng /cm2 lá /phút. Mỗi mẫu đo 3 lần và kết quả là giá trị trung bình của ba lần lặp lại.
2.10. Theo dõi sự ảnh hưởng của các chất điều hòa tăng trưởng thực vật trên
sự nảy mầm của phôi dừa in vitro
Trước khi cấy, mỗi quả dừa Ta, dừa Xiêm, dừa Sáp được lột bỏ vỏ quả. Sau đó, đem hạt dừa vào tủ cấy, dùng dao phẫu thuật cẩn thận lấy phôi ở vị trí mắt lớn, nơi có phôi. Sau đó, phôi được đặt trực tiếp vào ống nghiệm không qua khử trùng.
Phôi để nguyên trong mộng dừa được cấy trên mười môi trường. Riêng trên BA 10 mg/l được đặt một số phôi bị hủy đỉnh sinh trưởng (bằng kim) trước khi cấy, nhằm kích thích tạo chồi bên (bảng 2.1).
Phôi cô lập được cấy trên ba môi trường: Y3, GA3 5 mg/l và BA 10 mg/l. Phôi được nuôi ở nhiệt độ 270C 2. Độ ẩm 70% ± 5. Ánh sáng 2500 lux ± 300.
Theo dõi sự xuất hiện và kéo dài của chồi và rễ dừa từ phôi in vitro. Mỗi môi trường nuôi cấy được đo chiều dài chồi và rễ của 3 phôi và kết quả là giá trị trung bình của 3 lần lặp lại.
Kết quả cho thấy phôi dừa phát triển tốt trong môi trường nuôi cấy nào.
Bảng 2.1: Mười môi trường nuôi cấy in vitro
STT Môi trường Kí hiệu
1 MS
2 Y3
3 Y3 có bổ sung GA3 5 mg/l GA3 5 mg/l 4 Y3 có bổ sung GA3 20 mg/l GA3 20 mg/l 5 Y3 có bổ sung nước dừa 11 tháng tuổi 10% Nước dừa 10% 6 Y3 có bổ sung GA3 20 mg/l và nước dừa
11 tháng tuổi 10%
GA3 20 mg/l và nước dừa 7 Y3 có bổ sung BA 10 mg/l BA 10 mg/l 8 Y3 có bổ sung AIA 2 mg/l AIA 2 mg/l 9 Y3 có bổ sung BA 1 mg/l và AIA 0,1 mg/l BA 1 mg/l và
AIA 0,1 mg/l 10 Nước dừa 11 tháng tuổi 100% Nước dừa 100%
Xử lí thống kê
Số liệu trong các bảng kết quả được phân tích thống kê nhờ chương trình Statistical Program Scientific System (SPSS) phiên bản 11.5 cho windows. Sự khác biệt có ý nghĩa ở mức xác suất 0,05 của các giá trị được thể hiện bởi các chữ số khác nhau kèm theo.
Chương 3: KẾT QUẢ - THẢO LUẬN KẾT QUẢ
3.1. Quan sát hình thái, cấu tạo quả dừa Ta
3.1.1. Kích thước các thành phần cấu tạo quả
Quả dừa Ta 11 tháng tuổi có màu xanh vàng, chuyển dần sang màu nâu và có màu nâu lúc 12 tháng tuổi (ảnh 3.1).
Quả dừa to tròn với đường kính quả và chiều dài quả tương đương nhau, vỏ dừa mỏng, gáo mỏng, cơm dừa dày và có màu trắng đục (bảng 3.1 và ảnh 3.2). Giai đoạn 14 ngày sau khi ươm giống, chồi mầm xuất hiện ở mắt lớn của hạt dừa, đồng thời mộng dừa lớn dần lên và choáng hết nội nhũ lỏng đến nội nhũ rắn của hạt (ảnh 3.3).
Bảng 3.1: Kích thước các thành phần của quả dừa Ta ở giai đoạn 12 tháng tuổi
Các thành phần của quả dừa Ta Kích thước (cm) Đường kính quả 17,39 ± 0,26
Chiều dài quả 18,06 ± 0,19
Bề dày vỏ 2,57 ± 0,03
Bề dày gáo 0,29 ± 0,01
Ảnh 3.1. Quả dừa Ta ở giai đoạn Ảnh 3.2. Lát cắt dọc quả dừa Ta ở 12 tháng tuổi giai đoạn 12 tháng tuổi
1. Vỏ dừa 2. Gáo dừa 3. Cơm dừa 4 . Phôi dừa
Ảnh 3.3. Lát cắt dọc quả dừa Ta ở giai đoạn 0, 7 và 14 ngàysau khi ươm
1. Vỏ dừa 2. Gáo dừa 3. Cơm dừa 4. Chồi mầm 5. Rễ mầm 6. Mộng dừa
3.1.2. Quan sát hình thái giải phẫu chồi