KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN
QUY TRÌNH SẢN XUẤT CHẾ PHẨM SINH HỌC BIOFUN1 (MR4) VÀ BIOFUN 2 (BR5) đỂ PHÒNG CHỐNG RỆP SÁP HẠI CÀ PHÊ
NỘI DUNG QUY TRÌNH 1. Sản xuất giống cấp 1
Giống cấp 1 ựược sử dụng môi trường nuôi cấy là N1 hoặc Sabauraud trong ống nghiệm ở ựiều kiện phòng từ 5 ựến 7 ngàỵ Khi bề mặt hình thành và phủ kắn lớp bào tử là ựủ tiêu chuẩn ựể ựưa vào sản xuất giống cấp 2.
2. Giống cấp 2
Sử dụng gạo ựã luộc và sấy khô, cân 120gr trong bình tam giác 500ml thêm 60ml nước CaCO3 0,5%, khử trùng ở 1210C trong 30 phút. để nguội môi trường và cấy giống cấp 1 vào và nuôi ở ựiều kiện phòng từ 5 ựến 7 ngàỵ
3. Nhân sinh khối
Cân 200gr gạo trong mỗi túi nilon chịu nhiệt có cổ túi và nút bông, thêm 70ml nước vào mỗi túi, khử trùng ở 1210C trong 30 phút. để nguội và
cấy giống cấp 2 vàọ
Nuôi cấy trong ựiều kiện phòng (20 Ờ 280C) sau 4 ngày thì tiến hành mở nút cổ túi ựể thoáng khắ sau ựó 3 ngày tiến hành ựổ ra nia ở ựộ dầy 3cm, tiếp tục ựể hình thành bào tử trong 2 ngày sau ựó ựem sấỵ
4. Sấy chế phẩm
Sấy trong tủ sấy có ựuổi khắ ở ựiều kiện 380C trong 5Ờ 8 giờ, kiểm tra thủy phần tới 8% là ựạt. Với chế phẩm tinh thì tiếp tục công ựoạn 5 (tách triết bào tử), còn chế phẩm thô thì tiếp theo công ựoạn 6.
5. Tách chiết bào tử
đổ chế phẩm ựã sấy khô vào máy tách chiết bào tử ựể thu bào tử tinh. Dùng máy tách bào tử có mặt sàng 0,3 mm ựặt trên máy lắc ngang tốc ựộ 200 lần/phút, thu bào tử tinh từ phễu thu dưới mặt sàng.
6. Kiểm tra chất lượng chế phẩm
Lấy mẫu 1gr chế phẩm pha loãng ở 10-5 và cấy 0,1ml dịch nên ựĩa môi trường nuôi cấy N1 hoặc Sabauraud ựặt ở 280C trong 5 ngày ựể ựếm số bào tử sống.
7. đóng gói và bảo quản chế phẩm
7.1. Với sản phẩm thô: đóng gói và bảo quản trong ựiều kiện phòng.
7.2. Với sản phẩm tinh (bào tử tinh): Trộn với phụ gia 1 (PG1) với tỷ lệ 10% trọng lượng bào tử sau ựó ựóng gói và bảo quản.
11. Phân phối, sử dụng
Khi vận chuyển cần tránh tiếp xúc với nơi có nhiệt ựộ cao (bào tử sẽ chết ở ựiều kiện 490C), tránh ánh sáng mặt trời trực tiếp và tránh tiếp xúc với ẩm ựộ caọ
SƠ đỒ TÓM TẮT QUY TRÌNH
Thu thập nguồn rệp sáp nhiễm
nấm bệnh ngoài tự nhiên Lựa chọn các mẫu ựiển hình
Phân lập Giám ựịnh
đánh giá lựa chọn chủng đánh giá bằng khả năng
sinh emzyme ngoại bào
đánh giá bằng khả năng lây nhiễm lại trên rệp
sáp
Sản xuất giống cấp 1
Sản xuất giống cấp 2 Nhân sinh khối
Sấy chế phẩm
Tách chiết bào tử
Kiểm tra chất lượng Kiểm tra chất lượng
Phối trộn phụ gia
đóng gói đóng gói
Hình 3.21. Giống nấm cấp 1 Hình 3.22. Giống nấm cấp 2
Hình 3.23. Nhân sinh khối
3.4. Khảo nghiệm chế phẩm và xây dựng mô hình ựánh giá hiệu quả phòng chống rệp sáp hại cà phê phòng chống rệp sáp hại cà phê