năng phân giải urea và gelatine
Bảng 3. Đặc điểm hình thái, khả năng phân giải urea và gelatin của các chủng nấm men Chủng nấm men Hình dạng tế bào Khuẩn lạc năng Khả phân giải gelatine Khả năng phân giải urea Hình dạng Kích thước (mm)
Đ-ST1(1) Oval nhỏ Tròn, bìa nguyên, mô (có đỉnh), bề mặt
khô nhăn, màu trắng sữa 2,2 - -
Đ-ST1(2) Oval lớn Tròn, bìa nguyên, mô (không đỉnh), bề
mặt trơn láng, màu trắng đục 2,8 - -
V-ST1(1) Elip dài Tròn, bìa răng cưa, mô (có đỉnh), bề mặt
khô nhăn, màu trắng sữa 2,2 - -
V-ST1(2) Oval lớn Tròn, bìa nguyên, mô (có đỉnh), bề mặt
khô nhăn, màu trắng sữa. 3 - -
D-ST1(1) Elip dài Tròn, bìa nguyên, mô (có đỉnh), bề mặt
khô nhăn, màu trắng sữa 2,3 - -
D-ST1(2) Oval lớn Tròn, bìa răng cưa, mô (có đỉnh), bề mặt
khô nhăn, màu trắng đục 2,4 - -
Đ-ST2(1) Oval lớn Tròn, bìa nguyên, mô (có đỉnh), bề mặt
trơn láng, màu trắng đục 2,9 - -
Đ-ST2(2) Elip dài Tròn, bìa nguyên, mô (không đỉnh), bề
mặt khô nhăn, màu trắng sữa 2,5 - -
V-ST2(1) Oval lớn Tròn, bìa nguyên, mô (có đỉnh), bề mặt
trơn láng, màu trắng sữa 2,9 - -
V-ST2(2) Elip dài Tròn, bìa nguyên, mô (có đỉnh), bề mặt
khô nhăn, màu trắng sữa 2,8 - -
D-ST2(1) Oval lớn Tròn, bìa nguyên, mô (có đỉnh), bề mặt
khô nhăn, màu trắng sữa 2,6 - -
D-ST2(2) Elip dài Tròn, bìa răng cưa, mô (có đỉnh), bề mặt
khô nhăn, màu trắng sữa 3,1 - -
Đ-HG(1) Oval lớn Tròn, bìa răng cưa, mô (có đỉnh), bề mặt
trơn láng, màu trắng đục 2,3 - -
Đ-HG(2) Oval nhỏ Tròn, bìa răng cưa, lài, bề mặt trơn láng,
màu trắng đục 2,1 - -
Đ-HG(3) Elip dài Tròn, bìa nguyên, mô (có đỉnh), bề mặt
khô nhăn, màu trắng sữa 2,2 - -
V-HG(1) Elip dài Tròn, bìa nguyên, mô (có đỉnh), bề mặt
khô nhăn, màu trắng sữa 2,5 - -
V-HG(2) Oval lớn Tròn, bìa nguyên, mô (không đỉnh), bề
D-HG(1) Elip dài Tròn, bìa nguyên, mô (có đỉnh), bề mặt
khô nhăn, màu trắng sữa 2,8 - -
Đ-VL(1) Elip dài Tròn, bìa nguyên, mô (không đỉnh), bề
mặt khô nhăn, màu trắng sữa 2,3 - -
Đ-VL(2) Oval lớn Tròn, bìa răng cưa, mô (có đỉnh), bề mặt
khô nhăn, màu trắng sữa 2,1 - -
Đ-VL(3) Elip dài Tròn, bìa nguyên, lài, bề mặt khô nhăn,
màu trắng sữa 2,9 - -
Đ-VL(4) Oval lớn Tròn, bìa răng cưa, lài, bề mặt khô nhăn,
màu trắng ngà. 2,6 - -
V-VL(1) Oval lớn Tròn, bìa nguyên, mô (không đỉnh), bề
mặt khô nhăn, màu trắng sữa 2,6 - -
V-VL(2) Oval nhỏ Tròn, bìa nguyên, mô (có đỉnh), bề mặt
khô nhăn, màu trắng sữa 1,8 - -
D-VL(1) Oval lớn Tròn, bìa nguyên, mô (có đỉnh), bề mặt
khô nhăn, màu trắng sữa 2,6 - -
D-VL(2) Cầu Tròn, bìa nguyên, mô (không đỉnh), bề
mặt trơn láng, màu trắng đục 2,7 - -
D-VL(3) Elip dài Tròn, bìa răng cưa, mô (có đỉnh), bề mặt
khô nhăn, màu trắng sữa 2,9 - -
V-CT1(1) Cầu Tròn, bìa nguyên, mô (không đỉnh), bề
mặt khô nhăn, màu trắng sữa 2,6 - -
V-CT1(2) Oval lớn Tròn, bìa nguyên, mô (có đỉnh), bề mặt
khô nhăn, màu trắng sữa 2,9 - -
D-CT1(1) Oval lớn Tròn, bìa nguyên, lài, bề mặt khô nhăn,
màu trắng sữa 2,2 - -
D-CT1(2) Elip dài Tròn, bìa nguyên, mô (có đỉnh), bề mặt
trơn láng, màu trắng sữa 2,8 - -
D-CT1(3) Elip dài Tròn, bìa nguyên, mô (có đỉnh), bề mặt
khô nhăn, màu trắng sữa 2,4 - -
D-CT1(4) Elip dài Tròn, bìa nguyên, mô (có đỉnh), bề mặt
trơn láng, màu trắng đục 2,1 + -
V-CT2(1) Elip dài Tròn, bìa răng cưa, mô (có đỉnh), bề mặt
khô nhăn, màu trắng sữa 2,7 - -
V-CT2(2) Oval nhỏ Tròn, bìa nguyên, lài, bề mặt trơn láng,
màu trắng đục 2,9 - -
D-CT2(1) Oval lớn Tròn, bìa răng cưa, mô (có đỉnh), bề mặt
khô nhăn, màu trắng sữa 2,3 - -
D-CT2(2) Elip dài Tròn, bìa nguyên, mô (có đỉnh), bề mặt
khô nhăn, màu trắng sữa 2,7 + +
D-CT2(3) Oval nhỏ Tròn, bìa nguyên, mô (không đỉnh), bề
mặt khô nhăn, màu trắng sữa 2,9 - -
D-CT2(4) Elip dài Tròn, bìa răng cưa, mô (có đỉnh), bề mặt
khô nhăn, màu trắng sữa 2,2 - -
Ghi chú: dấu “+” có khả năng phân giải, “ - ” không có khả năng phân giải. Giá trị trong bảng là giá trị trung bình 3 lần lặp lại.
Các chủng nấm men phân lập không có khác biệt lớn về hình thái, kích thước khuẩn lạc: kích thước khuẩn lạc nhỏ (từ 1 đến 4 mm), đa số đều có bìa nguyên, trừ
chủng V-ST1(1), D-ST1(2), D-ST2(2), Đ-HG(1), Đ-HG(2), Đ-VL(2), Đ-VL(4), D- VL(3), V-CT2(1), D-CT2(1), D-CT2(4) bìa răng cưa; màu trắng sữa hoặc màu trắng đục; độ nổi mô chiếm đa số, chỉ một số chủng D-CT1(1), Đ-VL(3), Đ-HG(2) khuẩn lạc lài. Khi quan sát dưới kính hiển vi (ở vật kính E100), dựa vào đặc điểm hình dạng tế bào của 39 chủng nấm men đã phân lập có thể xếp thành 4 nhóm hình dạng đặc trưng.
Nhóm 1 - Tế bào nấm men hình oval nhỏ có 5 chủng: D-CT2(3), Đ-HG(2), Đ- ST1(1), V-CT2(2), V-VL(2).
Nhóm 2 - Tế bào nấm men hình oval lớn có 14 chủng: D-CT1(1), D-CT2(1), D- ST1(2), D-ST2(1), Đ-HG(1),Đ-ST1(2), Đ-ST2(1), Đ-VL(2), Đ-VL(4), V-CT1(2), V- HG(2), V-ST1(2), V-ST2(1), V-VL(1).
Nhóm 3 - Tế bào nấm men hình elip có 18 chủng: D-CT1(2), D-CT1(3), D- CT1(4), D-CT2(2), D-CT2(4), D-HG(1), D-ST1(1), D-ST2(2), D-VL(1), D-VL(3), Đ- HG(3), Đ-ST2(2), Đ-VL(1), Đ-VL(3), V-HG(1), V-CT2(1), V-ST1(1), V-ST2(2).
Nhóm 4 - Tế bào nấm men hình cầu có 2 chủng: D-VL(2), V-CT1(1).
Hình 9. Một số hình dạng đặc trưng của tế bào nấm men được phân lập
Ghi chú:(a): Nhóm 1- Nhóm tế bào hình oval nhỏ; (b): Nhóm 2- Nhóm tế bào hình oval lớn (c): Nhóm 3-Nhóm tế bào hình elip dài; d): Nhóm 4- Nhóm tế bào hình cầu
(a)
(d) (c)
Khả năng phân giải urea
Khả năng phân giải urea (hoạt tính urease) nhằm phát hiện ra nấm men có mang enzyme urease, đây là một trong những thí ngiệm được tiến hành để phân loại, định danh sơ bộ các chủng nấm men phân lập được.
Kết quả Bảng 3 cho thấy, trong tổng số 39 chủng nấm men khảo sát, chỉ có 1 chủng D-CT2(2) có khả năng phân giải urea (làm môi trường Christensen urea broth chuyển sang màu đỏ thẫm), chứng tỏ chủng nấm men này có mang enzyme urease.
Khả năng phân giải gelatine
Khả năng phân giải gelatine nhằm phát hiện ra nấm men có mang enzyme gelatinase, đây là một trong những thí ngiệm được tiến hành để phân loại, định danh sơ bộ các chủng nấm men phân lập được.
Nguyễn Lân Dũng et al. (2004) đã phân lập được 4 chủng nấm men có khả năng thủy phân gelatine, kết quả định danh 4 chủng nấm men đó là Saccharomycopsis capsularis, Saccharomycopsis fibuliger và 2 chủng thuộc loài Endomyces fibuliger.
Kết quả khảo sát cho thấy có 2 chủng nấm men có khả năng phân giải gelatine gồm D-CT1(4) và D-CT2(2), sau khi lấy ra khỏi tủ lạnh, dung dịch trong ống không đông đặc lại, chứng tỏ 2 chủng D-CT1(4) và D-CT2(2) có mang enzyme gelatinase. Hai chủng nấm men này có thể thuộc 2 trong 3 chủng Saccharomycopsis capsularis, Saccharomycopsis fibuliger, Endomyces fibuliger.