III. Điều tra hiện trạng hai loμi Lan Hμi đ−ợc nghiên cứu
1. Tạo nguyên liệu ban đầu
2.4. ảnh h−ởng của việc bổ sung BAP, BAP+NAA vμ dịch táo tới nhân
P. gratrixianum
Do không đủ nguồn giống P. hangianum nên các thí nghiệm về ảnh h−ởng của BAP, BAP+NAA vμ dịch táo đến quá trình nhân nhanh chỉ đ−ợc thực hiện với P. gratrixianum.
2.4.1. ảnh h−ởng của bổ sung BAP đến nhân nhanh P. gratrixianum
Từ kết quả nghiên cứu ở trên cho thấy kinetin đã có tác dụng kích thích quá trình nhân nhanh của P. hangianum vμ P. gratrixianum. Chúng tôi tiếp tục nghiên cứu ảnh h−ởng của BAP đối với giai đoạn nhân nhanh P. gratrixianum.
Bảng 12: Ảnh hưởng của BAP đến nhõn nhanh P. gratrixianum
Nồng độ (mg/l) Hệ số nhân (lần) 0 3,2 0,2 3,3 0,4 3,3 0,6 3,5 0,8 3,2 1,0 2,8
Các kết quả nghiên cứu đ−ợc trình bμy trên bảng 12 vμ biểu đồ 10 cho thấy việc bổ sung BAP không có tác dụng lμm gia tăng hệ số nhân của P. gratrixianum, nh− vậy chất nμy không có tác dụng rõ rệt đối với nhân nhanh P. gratrixianum.
Biểu đồ 10: Ảnh hưởng của BAP tới nhõn nhanh P. gratrixianum
2.4.2. ảnh h−ởng của tổ hợp BAP + NAA đối với quá trình nhân nhanh P. gratrixianum
Từ kết quả nghiên cứu ở trên cho thấy việc bổ sung BAP không có tác dụng kích thích đối với sự sinh tr−ởng của cây con P. gratrixianum. Trong nhiều tr−ờng hợp việc bổ sung cytokinin phối hợp với auxin có thể có tác dụng tích cực đối với quá trình nhân nhanh. Vì vậy, chúng tôi đã tiến hμnh thử nghiệm tác dụng của tổ hợp BAP + NAA đối với việc nhân nhanh P. gratrixianum. Kết quả nghiên cứu đ−ợc trình bμy trên bảng 13.
Kết quả thu đ−ợc từ bảng 13 cho thấy việc bổ sung tổ hợp BAP + NAA với nồng độ 0,5ppm BAP + 1ppm NAA đã lμm tăng đáng kể hệ số nhân của P. gratrixianum, hệ số nhân tăng thêm 2 lần so với công thức chỉ bổ sung BAP 0,5 ppm. 0 0.5 1 1.5 2 2.5 3 3.5 4 0 0.2 0.4 0.6 0.8 1 Hàm lượng BAP (mg/L) H ệ s ố nh õn ( l ầ n)
Bảng 13: Ảnh hưởng của việc bổ sung tổ hợp BAP+NAA đến nhõn nhanh P. gratrixianum Công thức Hệ số nhân (lần) 0,5ppm BAP 3,01 0,5ppm BAP + 0,8ppm NAA 4,07 0,5ppm BAP + 1,0ppm NAA 5,11 0,5ppm BAP + 1,2ppm NAA 3,09
2.4.3. ảnh h−ởng của bổ sung dịch táo đến nhân nhanh P. gratrixianum
Các kết quả nghiên cứu về ảnh h−ởng của việc bổ sung dịch táo vμo môi tr−ờng nhân nhanh P. gratrixianum đ−ợc trình bμy trên bảng 14.
Bảng 14: Ảnh hưởng của dịch tỏo đến nhõn nhanh P. gratrixianum
Hμm l−ợng táo (g/l) Hệ số nhân (lần) 0 3,3 10 4,1 20 5,3 30 4,2 40 4,1 50 4,0
Các kết quả nghiên cứu trên đây cho thấy việc bổ sung dịch táo có tác dụng tích cực đến việc nhân nhanh P. gratrixianum, ở nồng độ dịch táo 20g/l, hệ số nhân P. gratrixianum đạt 5,3 lần, trong khi đó khi không bổ sung dịch táo hệ số nhân chỉ đạt 3,3 lần.
Nhận xét chung về giai đoạn nhân nhanh
Qua các nghiên cứu về giai đoạn nhân nhanh chúng tôi nhận thấy môi tr−ờng RE vμ pH = 6 lμ thích hợp cho giai đoạn nhân nhanh ở cả hai loμi P. hangianum vμ P. gratrixianum. Kinetin đã có tác dụng tích cực đối với nhân
nhanh của cả hai loμi nμy. Việc bổ sung pepton, dịch chuối, dịch cμ rốt cũng có tác dụng tăng hệ số nhân của P. hangianum vμ P. gratrixianum so với đối chứng không bổ sung.
Tổ hợp BAP + NAA vμ dịch táo đ−ợc bổ sung vμo môi tr−ờng cũng đã lμm tăng hệ số nhân của P. gratrixianum so với đối chứng.
Kết quả nghiên cứu tìm ra môi tr−ờng thích hợp vμ các chất thích hợp để bổ sung vμo môi tr−ờng nhân nhanh P. hangianum vμ P. gratrixianum lμ rất có nghĩa để lμm gia tăng số l−ợng cây của hai loμi cây khó nhân giống nμy.
3. Giai đoạn tạo cây hoμn chỉnh
Đây lμ giai đoạn cuối của quá trình nhân giống in vitro, với yêu cầu thu đ−ợc cây khỏe, có bộ rễ tốt để sinh tr−ởng phát triển khi đ−a cây ra v−ờn −ơm.
Qua các kết quả nghiên cứu trên chúng tôi nhận thấy cả hai loμi Lan Hμi
P. hangianum vμ P. gratrixianum đều sinh tr−ởng tốt nhất trong môi tr−ờng RE. Cũng từ các kết quả thực nghiệm nhân nhanh, hai loμi Lan Hμi nμy tiếp tục đ−ợc nuôi cấy trong môi tr−ờng RE vμ chúng tôi tiếp tục nghiên cứu các chất bổ sung thích hợp để tạo cây hoμn chỉnh.
Do sự hạn chế về thời gian cần có để tạo nguồn cây nghiên cứu nên việc nghiên cứu tạo cây hoμn chỉnh mới đ−ợc thực hiện với các thí nghiệm bổ sung NAA, dịch chuối.