III. Điều tra hiện trạng hai loμi Lan Hμi đ−ợc nghiên cứu
1. Tạo nguyên liệu ban đầu
1.2. ảnh h−ởng của tuổi quả đến sự nẩymầm hạt P.hangianum vμ P.
gratrixianum
Kết quả nghiên cứu về tỷ lệ nẩy mầm của hạt Lan Hμi ở các độ tuổi khác nhau đ−ợc trình bμy trên bảng 2, biểu đồ 2.
Hỡnh 23: Nảy mầm của hạt P. hangianum trờn mụi trường RE
Hỡnh 24: Nảy mầm của hạt P. gratrixianum trờn mụi trường RE
Kết quả từ bảng 2 vμ biểu đồ 2 cho thấy: Sau 1 tháng theo dõi, hạt của cả hai loμi Lan Hμi với độ tuổi 6 vμ 8 tháng đều ch−a có dấu hiệu nảy mầm, trong khi đó hạt 10 tháng tuổi của P. hangianum đạt 7% vμ P. gratrixianum đạt 12% nảy mầm sau 1 tháng. Kết quả nghiên cứu cho thấy: cả hai loμi Lan Hμi P. hangianum vμ P. gratrixianum đều đạt tỷ lệ nẩy mầm cao nhất với hạt có 10 tháng tuổi. ở tuổi nμy sau 3 tháng gieo hạt, tỷ lệ nẩy mầm của P. hangianum lμ 68% vμ của P. gratrixianum lμ 75%.
Bảng 2: Sự nảy mầm của hạt Lan Hài ởđộ tuổi khỏc nhau
Tỷ lệ nẩy mầm (%) Loμi Tuổi quả
(tháng) Sau 1 tháng Sau 2 tháng Sau 3 tháng
6 0 0 2 8 0 9 18 P. hangianum 10 7 38 68 6 0 1 3 8 0 5 25 P.gratrixianum 10 12 48 75 0 10 20 30 40 50 60 70 80 6 8 10 Tuổi quả (thỏng) T ỉ l ệ n ả y m ầ m ( % ) P. hangianum P.gratrixianum Biểu đồ 2: Tỉ lệ nẩy mầm của hạt sau 3 thỏng gieo
Theo nhiều nhμ nghiên cứu, nói chung hạt các loμi lan có thể nẩy mầm ở giai đoạn ch−a chín (5-6 tháng tuổi). Ví dụ: Lan Hồ Điệp có thể nẩy mầm tốt ở độ tuổi khoảng 4-6 tháng, Lan Cypripedium: 3,5 tháng. Một số loμi Lan khác nảy mầm ở giai đoạn tuổi lớn hơn: Miltonia: 9 tháng, Dendrobium: 12 tháng,
Cymbidium: 10 tháng.
Các kết quả nghiên cứu của một số tác giả khác về tỷ lệ nảy mầm của hạt Lan Hμi ở các độ tuổi khác nhau cho thấy: Tùy theo từng loμi, hạt Lan Hμi có thể nảy mầm tốt trong khoảng từ 4 đến 10 tháng tuổi. Theo Lý Niên vμ Lý Dũng Nghị, tuổi quả thích hợp để nảy mầm P. delenatii (Hμi Hồng) lμ 5 tháng, P.
philippinense: 4 tháng. Theo Saitho N. vμ Misawa M (2002): tuổi quả thích hợp để gieo hạt P. armeniacum vμ P. micranthum lμ 6-8 tháng.
Trong nghiên cứu của chúng tôi, tỷ lệ nẩy mầm của hai loμi Lan Hμi Hằng vμ Hμi Tam Đảo đạt cao nhất ở hạt có tuổi quả lμ 10 tháng tuổi. Kết quả nghiên cứu của chúng tôi cũng phù hợp với nhận xét của Luke (1971) cho rằng dù hạt lan có thể nảy mầm khi mới đạt đ−ợc 1/2 giai đoạn chín nh−ng gieo hạt từ quả đã đạt 2/3 giai đoạn chín vẫn cho kết quả tốt hơn.
1.3. ảnh h−ởng của các chất bổ sung đến sự nảy mầm của hạt P.
gratrixianum
Do thiếu nguồn giống Lan P. hangianum nên những thí nghiệm về ảnh h−ởng của các chất bổ sung chỉ đ−ợc thực hiện với P. gratrixianum.
1.3.1. ảnh h−ởng của hμm l−ợng đ−ờng.
Đ−ờng có vai trò quan trọng trong nhân giống in vitro nói chung vμ cây Lan nói riêng. Đ−ờng đặc biệt quan trọng đối với những cây nảy mầm trong bóng tối nh− Lan Hμi vì lúc nμy chúng sinh tr−ởng hòan tòan dị d−ỡng. Nói chung hμm l−ợng đ−ờng th−ờng đ−ợc bổ sung để nuôi cấy Lan lμ khoảng 20g/l. Đối với loμi Lan Hμi mới đ−ợc nghiên cứu nμy, chúng tôi đã tiến hμnh thử nghiệm để xác định hμm l−ợng đ−ờng thích hợp nhất cho môi tr−ờng gieo hạt.
Các kết quả nghiên cứu đ−ợc trình bμy trên bảng 3 vμ biểu đồ 3.
Từ các kết quả trên bảng 3 nhận thấy việc bổ sung đ−ờng có tác dụng tốt đối với sự nẩy mầm của hạt Lan P. gratrixianum, tỷ lệ nẩy mầm tăng dần khi tăng nồng độ đ−ờng từ 10g/l lđến 25g/l. ở nồng độ đ−ờng 20g/l cho tỷ lệ nẩy mầm khá tốt: đạt tỷ lệ 50% sau 3 tháng. Tuy vậy nồng độ đ−ờng 25g/l môi tr−ờng đã cho kết quả nẩy mầm cao nhất: tỷ lệ nẩy mầm đạt 65% sau 3 tháng.
Bảng 3: Ảnh hưởng của hàm lượng đường đến tỉ lệ nảy mầm của P. gratrixianum
Tỷ lệ nẩy mầm (%) Hμm l−ợng
đ−ờng (g/l) Sau 1 tháng Sau 2 tháng Sau 3 tháng
10 8 2 3 15 1 3 28 20 3 17 50 25 5 25 65 30 4 12 37 35 2 5 17
Biểu đồ 3: Tỉ lệ nẩy mầm của P. gratrixianum sau 3 thỏng gieo cấy
1.3.2. ảnh h−ởng của việc bổ sung dịch chuối
Chúng tôi đã tiến hμnh thử nghiệm tác dụng của dịch chuối ở các nồng độ khác nhau đ−ợc bổ sung vμo môi tr−ờng gieo hạt P. gratrixianum.
Các kết quả đ−ợc trình bμy trên bảng 4.
Kết quả nghiên cứu trên bảng 4 cho thấy việc bổ sung dịch chuối vμo môi tr−ờng gieo hạt P. gratrixianum không cho kết quả tích cực. ở các nồng độ chuối khác nhau đều nhận thấy tỷ lệ nảy mầm thấp hơn so với đối chứng.
0 10 20 30 40 50 60 70 10 15 20 25 30 35 Hàm lượng đường (g/L) T ỉ l ệ n ẩ y m ầ m ( % )
Bảng 4: Ảnh hưởng của dịch chuối đến nảy mầm của P. gratrixianum
Tỷ lệ nẩy mầm (%) Hμm l−ợng dịch
chuối (g/l) Sau 1 tháng Sau 2 tháng Sau 3 tháng
0 0 1 52
50 0 1 13
100 1 3 10
150 0 0 0
250 0 0 0
1.3.3. ảnh h−ởng của bổ sung than hoạt tính.
Các nghiên cứu đã đ−ợc tiến hμnh để thử nghiệm khả năng nẩy mầm của
P.gratrixianum trong điều kiện môi tr−ờng có vμ không có than hoạt tính.
Kết quả đ−ợc trình bμy trên bảng 5.
Bảng 5: Ảnh hưởng của than hoạt tớnh đến nẩy mầm của hạt P. gratrixianum
Tỷ lệ nẩy mầm (%) Hμm l−ợng than
hoạt tính (g/l) Sau 1 tháng Sau 2 tháng Sau 3 tháng
0 0 7 25
2 5 20 75
Kết quả thử nghiệm cho thấy việc bổ sung than hoạt tính có tác dụng tốt hơn hẳn đối với sự nẩy mầm của P. gratrixianum so với điều kiện không có than hoạt tính. Khi bổ sung than hoạt tính với nồng độ 2g/l, tỷ lệ nẩy mầm lμ 75% sau 3 tháng. Trong khi đó ở môi tr−ờng không có than hoạt tính, tỷ lệ nẩy mầm chỉ đạt 25% sau 3 tháng.
Có ý kiến cho rằng trong giai đoạn nẩy mầm của hạt Lan không nên sử dụng than hoạt tính để bổ sung vμo môi tr−ờng gieo hạt (Ernst, 1975). Từ kết quả thí nghiệm, chúng tôi cho rằng có lẽ điều nμy có thể thay đổi tuỳ theo loμi, đối với một số loμi Lan Hμi, việc bổ sung than hoạt tính không có tác dụng tích cực
đối với sự nảy mầm, trong khi đó đối với một số loμi nh− P. gratrixianum thì lại nhận thấy tác dụng tích cực.
2. Giai đoạn nhân nhanh
Những thông báo về nghiên cứu nhân nhanh Lan Hμi hiện nay ch−a có nhiều vμ th−ờng tập trung vμo các loμi Lan Hμi lai, có lẽ đó lμ vì việc nhân nhanh các loμi bản địa thuần chủng th−ờng gặp nhiều khó khăn hơn.
Những nghiên cứu b−ớc đầu đã đ−ợc thực hiện nhằm tìm hiểu những điều kiện ảnh h−ởng đến việc nhân nhanh hai loμi Lan Hμi P. hangianum vμ P. gratrixianum.
Hỡnh 25: Lan Hài giai đoạn nhõn nhanh