4. PHẦN IV KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN
4.3.1. Xác ựịnh lợn con tiêu chảy do Ẹcoli F4
Ở mỗi ô chuồng có lợn con sau cai sữa bị tiêu chảy, thu thập mẫu phân và mẫu huyết thanh của 2 lợn dùng ựể phân lập Ẹcoli và phân tắch kháng thể
kháng Ẹcoli.
Mẫu phân ựược cấy trên 2 loại môi trường thạch máu và thạch MacConkeỵ Tất cả các mẫu ựều cho khuẩn lạc màu ựỏ cánh sen trên thạch MacConkey, kết quả xác ựịnh ựặc tắnh sinh vật hóa học chứng tỏ 100% số mẫu có Ẹcoli. Có 16 trong số 30 mẫu (53,33%) ựồng thời có khuẩn lạc dung huyết trên môi trường thạch máụ PCR ựã ựược thực hiện trên 16 mẫu dung huyết ựể xác ựịnh sự có mặt các yếu tố ựộc lực của F4 Ẹcoli, bao gồm PCR xác ựịnh gene mã hóa cho F4 và Multiplex PCR xác ựịnh các ựộc tố ựường ruột, kết quả ựược trình bày ở hình 04-06.
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ nông nghiệp ẦẦẦẦẦ..54
Hình 04-06. Kết quả PCR xác ựịnh các yếu tố ựộc lực của F4 Ẹcolị
(1) Khung trên PCR xác ựịnh gene mã hóa F4 pili (499 bp), (2) Khung dưới : multiplex PCR xác ựịnh các ựộc tố ựường ruột, LT (272 bp), STa (158 bp) và STb (133 bp).
Nhận xét : (1) Dương tắnh PCR cho vạch ựặc hiệu 499 bp chứng tỏ 11 trong số 16 mẫu có dung huyết ựều là Ẹcoli F4.
(2) Các chủng F4 Ẹcoli phân lập ựều mang ắt nhất 1 gene mã hóa cho ựộc tố ựường ruột LT, STa hoặc STb (4 chủng mang gene mã hóa STa, 1 chủng mang STa và STb, 5 chủng mang gene LT và STb và 1 chủng mang gene mã hóa cả 3 ựộc tố).
(3) Kết quả giám ựịnh gene học cho phép kết luận có ắt nhất 36,67 % (11/30) các trường hợp lợn con tiêu chảy sau cai sữa có sự tham gia của F4
Ẹcoli.