Các chủng nấm men phân lập được kiểm tra khả năng chịu ethanol trên môi trường YPD (yeast extract, peptone, D-glucose, tetracyline, agar) có bổ sung ethanol ở các mức nồng độ 0%, 3%, 6%, 9% và 12% (v/v), ủ các đĩa petri ở 30°C trong 48 giờ, quan sát phát triển khuẩn lạc của các chủng nấm men. Khả năng chịu cồn của 20 chủng nấm men được thể hiện ở Bảng 11.
Bảng 11. Khảo sát khả năng chịu ethanol của 20 chủng nấm men
STT Chủng nấm men Nồng độ ethanol (% v/v) 0 3 6 9 12 1 ML1 + + + + - 2 ML2 + + + + + 3 ML3 + + + - - 4 Ins1 + + + + + 5 Ins2 + + + - - 6 Ins3 + + + + + 7 Mau 1 + + + - - 8 Mau 2 + + + + + 9 Mau 3 + + + - - 10 TM1 + + + + + 11 TM2 + + + - - 12 TM3 + + + + - 13 MN1 + + + - - 14 MN2 + + + - - 15 MN3 + + + - - 16 MN4 + + + + + 17 CT1 + + + - - 18 CT2 + + + + + 19 CT3 + + + + + 20 CT4 + + + - -
Ghi chú: (+): xuất hiện khuẩn lạc, (-): không xuất hiện khuẩn lạc. Giá trị ghi trong bảng là trung bình của 3 lần lặp lại.
Sau 48 giờ cấy nấm men trên môi trường dinh dưỡng, tất cả 20 chủng nấm men đều phát triển trong môi trường có bổ sung 0%, 3%, 6% ethanol. Ở môi trường có bổ sung 9% ethanol thì chỉ còn 10 chủng trong số 20 chủng sống sót trong môi trường này, các chủng đó là ML1, ML2, Ins1, Ins3, Mau 2, TM1, TM3, MN4, CT2 và CT3.
Tiếp tục kiểm tra 10 chủng nấm men ở môi trường có bổ sung ethanol 12%. Kết quả cho thấy chỉ có 2 chủng ML1, TM3 là không phát triển ở môi trường này, 8 chủng còn lại có thể phát triển được ở môi trường có bổ sung 12% ethanol. Đặc biệt có 3 chủng TM1, CT2, Ins 3 đều hình thành khuẩn lạc trên môi trường có bổ sung 12% ethanol. Tóm lại, khi môi trường dinh dưỡng bổ sung nồng độ ethanol càng cao thì số chủng nấm men càng ít. Điều này cho thấy ảnh hưởng của nồng độ ethanol đến sự phát triển của nấm men. Ethanol ức chế quá trình phát triển của nấm men, nồng độ càng cao sẽ gây hiện tượng nấm men ngộ độc (Amore et al., 1990; Dasari et al., 1990).
Hình ảnh một số chủng nấm men phát triển được trên môi trường có bổ sung 0%, 3%, 6%, 9%, 12% ethanol được minh họa trong Hình 11.
Hình 11. Khuẩn lạc của một số chủng nấm men chịu cồn ở các nồng độ 0% (A), 3% (B), 6% (C), 9%(D) và 12% (E)