Phương phâp chọn giống khâng bệnh bạc lâ phổ biến vă quan trọng nhất cho ñến nay lă phương phâp lai hữu tính. Phương phâp năy tiến hănh lai giữa câc giống có chứa gen khâng, sau ñó chọn lọc câc thế hệ phđn li. Bằng phương phâp năy nhiều giống khâng bệnh ñê ñược tạo ra. Khả năng khâng bạc lâ thường do ñơn gen quy ñịnh, vì vậy việc sử dụng phương phâp lai lại ñể chuyển gen khâng lă rất hiệu quả. Nguyín lý của phương phâp năy lă sử dụng một giống lúa tốt nhưng không mang gen khâng cần thiết ñể lai lại với một giống mang gen khâng hữu hiệu. Sau một số lần chọn lọc vă lai lại liín tục, giống mới ñược tạo thănh gần như mang toăn bộ nguồn gen tốt của cđy
Trường ðại học Nông nghiệp Hă Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ………22 lai lại vă mang thím ñược gen khâng mong muốn. Trong quâ trình lai lại, có thể kết hợp với tự phối, chọn lọc câc dạng phđn ly ñểñẩy nhanh quâ trình tạo dòng thuần.
Phương phâp lđy nhiễm nhđn tạo ñược sử dụng ñể xâc ñịnh con lai có mang gen khâng hay không. Nhưng bằng phương phâp năy ñôi khi khó phđn biệt ñược câc gen khâng khâc nhau, nếu chúng cùng biểu hiện một phổ khâng nhiễm với câc chủng vi khuẩn tương tự. ðể khắc phục nhược ñiểm năy, hiện nay phương phâp dùng chỉ thị phđn tử, dựa trín câc trình tự DNA liín kết chặt với gen khâng, ñược sử dụng nhằm xâc ñịnh câc gen khâng dễ dăng vă hiệu quả hơn.
Phương phâp lai vă kết hợp chỉ thị phđn tử ñê ñược ứng dụng rộng rêi trong lai tạo câc giống lúa khâng bệnh bạc lâ vă thu ñược nhiều thănh công ñâng kể. Năm 2001, S.Singh vă cộng sựñê âp dụng thănh công phương phâp lai ñể tập hợp 3 gen khâng xa5, Xa7 vă Xa21 văo giống lúa PR106 (một giống lúa phổ biến ở bang Punjab, Ấn ðộ) với sự trợ giúp của chỉ thị phđn tử. Câc dòng của PR106 ñê ñược tiến hănh trồng thử nghiệm vă thử khả năng khâng với bệnh bạc lâ. Kết quả câc dòng chứa 3 gen khâng trín có khả năng khâng ñược toăn bộ 17 chủng Xoo tại Punjab vă thím 6 chủng vi khuẩn có nguồn gốc từ Phillipin [43]. Năm 2000, A.C Sachez vă cộng sự cũng ñê chuyển thănh công 3 gen khâng xa5, xa13, Xa21 văo câc dòng lúa có kiểu cđy mới IR65598-112, IR65600-42, IR65600-96 bằng phương phâp lai backcross. Trong quâ trình lai chuyển gen Sanchez cũng sử dụng câc chỉ thị phđn tử ñể giúp phât hiện gen ñược chuyển (RG556, RG207 cho xa5, RG136 cho xa13), ñộ chính xâc của chỉ thị lín ñến 95% [12].
Ngoăi phương phâp chuyển gen khâng bệnh bạc lâ bằng lai hữu tính, hiện nay còn có câc nghiín cứu nhằm chuyển gen khâng bằng phương phâp cứu phôi vă lai tế băo trần. Bằng phương phâp cứu phôi, Amide-Border vă
Trường ðại học Nông nghiệp Hă Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ………23 Cộng sự (1992) ñê chuyển gen khâng từ lúa dại văo lúa trồng (dẫn theo K.S.Lee vă cộng sự). Bằng câch lai tế băo trần giữa lúa trồng Oryzae sativa L.
với nguồn cho gen khâng lă lúa dại Oryzae meyeriana, Cheng-qui Yan vă cộng sự tiến hănh thănh công việc tạo dòng tế băo mang gen khâng bạc lâ. Kết quả thu ñược 29 dòng cđy lai xoma, hình thâi biểu hiện giống cả hai bín bố mẹ vă trong ñó có 2 dòng biểu hiện tính khâng cao, 8 dòng biểu hiện tính khâng vừa (Cheng - qui Yan vă cộng sự, 2004)[18].
2.2.4 Ứng dụng công nghệ sinh học trong nghiín cứu vă chọn giống khâng bệnh bạc lâ