Kết quả gây nhiễm virus PRRS phân lập được trên môi trường tế bào

2. Mục đích nghiên cứu

3.3.2. Kết quả gây nhiễm virus PRRS phân lập được trên môi trường tế bào

MARC-145 lần 2

Chúng tôi tiến hành thu dịch tế bào của 13 mẫu để gây nhiễm lần 2 trên môi trường tế bào MARC-145. Kết quả được trình bày trong bảng 3.5

Bảng 3.5. Kết quả gây nhiễm virus PRRS phân lập trên môi trường tế bào MARC-145 lần 2. Nhóm lợn Loại mẫu Tỷ lệ tế bào bị phá hủy (%) Kết quả CPE 24h 36h 48h 72h 96h 120h 1 DTBHT 1 0 0 0 0 0 0 - 1 DTBHT 2 0 20 30 50 80 90 + 1 DTBHP 1 0 0 0 0 0 0 - 2 DTBHT 3 0 0 0 0 0 0 - 2 DTBP 1 0 20 30 45 70 90 + 2 DTBHP 2 0 0 30 45 85 100 + 3 DTBHT 4 0 20 45 60 85 100 + 3 DTBHP 3 0 0 20 45 60 85 + 3 DTBHP 4 0 0 0 0 0 0 - 4 DTBHT 5 0 0 0 0 0 0 - 4 DTBP 2 0 0 30 45 60 95 + 5 DTBP3 0 0 0 0 0 0 - 5 DTBHP 5 0 0 0 0 0 0 -

Chú thích: HP: hạch phổi, HT: huyết thanh, P: phổi, DTB: dịch tế bào (+): có bệnh tích , (-): không có bệnh tích

Qua bảng 3.5, chúng tôi nhận thấy những mẫu nghi ngờ lần gây nhiễm 1 sau khi gây nhiễm lần 2 có biểu hiện bệnh tích tế bào sớm hơn (48h sau gây nhiễm) và phá hủy 85% tế bào sau 120h. Do vậy, có thể xếp mẫu này vào nhóm có biểu hiện bệnh tích. Đối với 2 mẫu huyết thanh và 1 mẫu phổi đã có bệnh tích ở lần gây nhiễm 1, chúng tôi quan sát thấy thời gian biểu hiện bệnh tích sớm hơn (36h sau gây nhiễm) và tỷ lệ phá hủy cũng cao hơn (90-100% sau 120h gây nhiễm). Có thể kết luận, virus đã thích ứng tốt hơn trên môi trường tế bào MARC-145 sau 2 lần gây nhiễm.

Như vậy, sau 2 lần gây nhiễm trên môi trường tế bào MARC-145, trong số 13 mẫu có 6 mẫu biểu hiện bệnh tích tế bào (2 mẫu hạch phổi và 2 mẫu huyết thanh và 2 mẫu phổi), chiếm 46,0%. Những mẫu còn lại không gây bệnh tích tế bào có thể do virus đã chết trong quá trình bảo quản và vận chuyển.

3.3.3. Kết quả gây nhiễm virus PRRS phân lập trên môi trường tế bào MARC-145 lần 3. 145 lần 3.

Để kiểm tra tính thích ứng của virus PRRS, chúng tôi tiếp tục gây nhiễm dịch nuôi cấy tế bào của 2 mẫu đã phân lập được, và theo dõi tỷ lệ tế bào bị phá hủy tại các thời điểm.

Bảng 3.6. Kết quả gây nhiễm virus PRRS phân lập trên môi trường tế bào MARC-145 lần 3.

Nhóm

lợn Loại mẫu

Tỷ lệ tế bào bị phá hủy (%) Tên virus

phân lập 24h 36h 48h 60h 72h 84h 1 DTBHT2 0 30 55 75 95 100 HUA/HP1963 2 DTBP 1 0 20 30 60 85 100 HUA/HP2228 2 DTBHP 2 0 20 30 50 90 100 HUA/HP1 3 DTBHT 4 0 20 45 60 85 100 HUA/HP2 3 DTBHP 3 0 20 40 55 85 100 HUA/HP3 4 DTBP 2 0 10 30 60 90 100 HUA/HP4

Sáu chủng virus PRRS này gây bệnh tích tế bào rõ ràng qua các lần gây nhiễm, đã được Bộ môn Vi sinh vật – Truyền nhiễm đăng ký thông tin trên ngân hàng gen quốc tế (GenBank) với tên gọi HUA/HP1963, HUA/HP2228, HUA/HP1, HUA/HP2, HUA/HP3, HUA/HP4

Qua các bảng, ta thấy 6 chủng virus đã phát triển tốt trên tế bào MARC- 145. Với chủng HUA/HP1963 ngay ở lần gây nhiễm đầu tiên đã có dấu hiệu thích ứng tốt với tế bào Marc-145, sau 72h đã phá hủy 65% tế bào, sau 120h đã phá hủy tới 85% tế bào. Tương tự như thế với 2 chủng HUA/HP2228 và HUA/HP2. Đến lần 2, thời gian gây bệnh tích tế bào sớm hơn: sau 36h gây nhiễm đã phá hủy 20% số tế bào và sau 120h đã phá hủy 90-100% tế bào

Với 3 chủng còn lại là HUA/HP1, HUA/HP3, HUA/HP4 mặc dù chưa thích ứng tốt với tế bào Marc-145 sau lần gây nhiễm đầu tiên, nhưng tới lần gây nhiễm thứ 2 đã thích ứng rất nhanh, bệnh tích tế bào xuất hiện sau 48h gây nhiễm và sau 120h đã phá hủy 85-100% tế bào.

Sau lần gây nhiễm thứ 3, cả 6 chủng đều xuất hiện bệnh tích sau khi gây nhiễm 36h và phá hủy 100% tế bào sau 84h.

Đối chứng tế bào Tế bào gây nhiêm virus sau 60h HUA/HP1963 HUA/HP2228 HUA/HP1 HUA/HP2 HUA/HP3 HUA/HP4