PHẦN II: THỰC NGHIỆM VÀ KẾT QUẢ
2.2.2.Khảo sát mối tương quan giữa mật độ quang và nồng độ IBP trong môi trường HC1 0,1 N
❖ P h ổ u v của dung dịch IB P 80 ỊẤglml trong môi trường HCl 0,1 N
Qua nghiên cứu sơ bộ, thấy độ tan của IBP trong môi trường HC1 0,1 N là khoảng 80 |~ig/ml, chúng tôi tiến hành quét phổ uv của dung dịch IBP 40 |!g/ml trong môi trường HC1 0,1 N, thu được phổ như ở hình 4.
■---■--- —---m
VVavelength (nm)
■_____________________________ __M--- ■
Hình 4. Phổ uv của IBP trong môi trường HC1 0,1 N
Hình ảnh phổ cho thấy, IBP trong môi trường HC1 0,1 N có hai cực đại ở bước sóng 204 nm và 221 nm. Do bước sóng 204 quá ngắn, có thể bị nhiều tá dược hoà tan trong môi trường này cũng hấp thụ, nên chúng tôi chọn bước sóng 221 nm để định lượng IBP trong môi trường HC1 0,1 N bằng phương pháp đo quang. Ở bước sóng này, dung dịch IBP 80 |ig/ml có mật độ quang D = 1,171 nằm ngoài khoảng tin cậy của máy (từ 0,2 đến 0,8), nên cần phải pha loãng các mẫu thử trước khi đo.
*l* Kết quả khảo sát sự tương quan giữa m ật độ quang và nồng độ IB P trong môi trường H C l 0,1 N
Pha các dung dịch chuẩn IBP có nồng độ xác định, đo mật độ quang của các dung dịch này ở bước sóng 221 nm. Kết quả thí nghiệm được trình bày ở bảng 3 và biểu diễn bằng đồ thị hình 5.
Bảng 3. M ật độ quang tương ứng với nồng độ IBP trong dung dịch HCl 0,1 N
Nồng độ (ụ,g/ml) 10 20 30 40 50
Mật độ quang 0,149 0,286 0,445 0,573 0,721
của dung dịch IBP trong môi trường HCI 0,1 N.
Nhận xét: Giữa mật độ quang đo được ở bước sóng 221 nm và nồng độ dung dịch IBP trong môi trường HC1 0,1 N, có sự phụ thuộc tuyến tính khá chặt chẽ trong khoảng khảo sát, từ 10 |ig/ml đến 50 |j.g/ml, với hệ số tương quan R ~ 1. Như vậy, để định lượng IBP trong mồi trường HC1 0,1 N ở bước sóng 221 nm đảm bảo độ chính xác, cần pha loãng các mẫu thử sao cho nồng độ đem đo quang nằm trong khoảng đã khảo sát ở trên.