2. Phương pháp thực nghiệm
2.1.2. Xác định thời gian xử lý bằng acid HCl thích hợp
Đầu tôm thẻ chân trắng được rửa sạch, loại bỏ tạp chất, để ráo. Cân mỗi mẫu thí nghiệm 100g đầu tôm cho vào cốc 250ml. Cho thêm một ít nước vào và nghiền nhỏ mẫu đến kích thước khoảng 2-3mm, sau đó tiếp tục bổ sung nước vào đảm bảo tỷ lệ nguyên liệu và nước là 1:1 và trộn thật đều.
Tiến hành thủy phân đầu tôm để thu hồi hỗn hợp acid HCl và acid lactic: Để xác định nồng độ acid HCl thích hợp, đầu tiên mẫu được thủy phân bằng acid HCl với các nồng độ khác nhau từ 0%; 0,1%; 0,2%; 0,3%; 0,4%; 0,5%. Các mẫu được ủ ở nhiệt độ phòng sau 1giờ sau đó tiếp tục thủy phân mẫu bằng acid lactic 0,4% và ủ ở nhiệt độ phòng trong 2 giờ (cố định nồng độ acid lactic là 0,4%, thời gian ủ là 2 giờ). Sau khi kết thúc quá trình thủy phân, tiến hành ép để tách riêng phần dịch và phần bã. Thu hồi caroten-protein từ phần dịch bằng cách kết hợp ba phương pháp (điều chỉnh pH 4,3 - 4,5; và bổ sung chitosan 100ppm và nâng nhiệt lên 70oC trong 10 phút), sau đó ly tâm bằng máy ly tâm thể tích lớn trong 15 phút với tốc độ 3500 vòng. Xác định hiệu suất thu hồi và hàm lượng carotenoid có trong hỗn hợp caroten-protein và từ đó chọn ra nồng độ acid HCl thích hợp.
Kết quả thăm dò: Chọn được nồng độ acid HCl thích hợp trong phương
pháp kết hợp thủy phân hai acid để thu hồi hỗn hợp caroten-protein có hiệu suất thu hồi và hàm lượng carotenoid cao nhất.
2.1.2 Xác định thời gian xử lý bằng acid HCl thích hợp Tiến hành thí nghiệm: Tiến hành thí nghiệm:
Đầu tôm thẻ chân trắng được rửa sạch, loại bỏ tạp chất, để ráo. Cân mỗi mẫu thí nghiệm 100g đầu tôm cho vào cốc 250ml. Cho thêm một ít nước vào và nghiền nhỏ mẫu đến kích thước khoảng 2-3mm, sau đó tiếp tục bổ sung nước vào đảm bảo tỷ lệ nguyên liệu và nước là 1:1 và trộn thật đều.
Hình 2.4. Sơ đồ bố trí thí nghiệm xác định thời gian xử lý HCl thích hợp
Mục đích thí nghiệm: Xác định thời gian xử lý bằng acid HCl thích hợp để
thủy phân đầu tôm ở giai đoạn đầu, trước khi kết hợp thủy phân bằng acid lactic.
Tiến hành thủy phân đầu tôm để thu hồi hỗn hợp acid HCl và acid lactic: Để xác định nồng độ acid HCl thích hợp. Với nồng độ acid HCl thích hợp được chọn sau thí nghiệm 3.1.1 ủ các mẫu ở nhiệt độ phòng, thời gian thực hiện thí nghiệm là
Đầu tôm
Nghiền nhỏ
0h
Bổ sung nồng độ acid HCl đã xác định ở thí nghiệm 3.1
1h
Chọn thời gian xử lý HCl thích hợp
Đánh giá hiệu suất thu hồi hỗn hợp caroten-protein, hàm lượng carotenoid trong hỗn hợp
Thu hồi hỗn hợp caroten-protein
2h 3h
Bổ sung thêm 0,4% acid lactic thủy phân trong 2giờ ở điều kiện nhiệt độ thường
0; 1; 2; 3; 4; 5 giờ. Sau đó tiếp tục thủy phân mẫu bằng acid lactic 0,4% và ủ ở nhiệt độ phòng trong 2 giờ (cố định nồng độ acid lactic là 0,4%, thời gian ủ là 2 giờ),. Sau khi kết thúc quá trình thủy phân, tiến hành ép để tách riêng phần dịch và phần bã. Thu hồi caroten-protein từ phần dịch bằng cách kết hợp ba phương pháp (điều chỉnh pH 4,3 - 4,5; và bổ sung chitosan 100ppm và nâng nhiệt lên 70oC trong 10 phút), sau đó ly tâm bằng máy ly tâm thể tích lớn trong 15 phút với tốc độ 3500 vòng. Xác định hiệu suất thu hồi và hàm lượng carotenoid có trong hỗn hợp caroten-protein và từ đó chọn ra thời gian acid HCl thích hợp.
Kết quả thăm dò: Chọn được thời gian xử lý bằng acid HCl thích hợp trong
phương pháp kết hợp thủy phân hai acid để thu hồi hỗn hợp croten-protein có hiệu suất thu hồi và hàm lượng carotenoid cao nhất.