Dụng cụ thí nghiệm tại trại bao gồm cân đồng hồ loại 500 g, 20 kg, 60 kg, máng ăn, bầu nước, thúng, thao, lồng bắt gà, một số dụng cụ chăn nuôi khác.
Các dụng cụ phòng thí nghiệm, môi trường và hóa chất dùng cho thí
nghiệm vi sinh như: nồi hấp Autoclave, tủ cấy vô trùng, tủ ấm, pipet,
micropipet, ống nghiệm, đĩa petri, đèn cồn, que chang, que cấy vòng, máy lắc Vortex, nước muối 9o
/oo, môi trường MacConkey Agar (MC), môi trường Nutrient Agar (NA), môi trường Simmons Citrate Agar (SCA), môi trường MR-VP Broth, môi trường Peptone, thuốc thử α-napthol, KOH, thuốc thử Kowacs... tại phòng thí nghiệm vi sinh của Trung tâm R&D thuộc công ty Vemedim Cần Thơ.
3.2 Phƣơng pháp thí nghiệm 3.2.1 Bố trí thí nghiệm
Thí nghiệm được bố trí theo mô hình hoàn toàn ngẫu nhiên với 3 nghiệm thức, mỗi nghiệm thức lập lại 3 lần, mỗi đơn vị thí nghiệm gồm 100 gà thịt giống Nòi lai đang ở tuần tuổi thứ 5 (Bảng 3.3 mô tả sơ đồ bố trí thí nghiệm tại trại). Như vậy, tổng cộng có 900 con gà thịt trong thí nghiệm với các nghiệm thức lần lượt là
- Nghiệm thức 1 (NT CĂLL): cho ăn KPBS liên tục trong suốt thời gian
thí nghiệm.
- Nghiệm thức 2 (NT CĂCT): cho ăn KPBS liên tục trong 7 ngày, sau đó
cho ăn KPCS trong 7 ngày. Lặp lại liệu trình đến hết thời gian thí nghiệm.
- Nghiệm thức 3 (NT ĐC): cho ăn KPCS liên tục trong suốt thời gian thí nghiệm.
Bảng 3.3 Sơ đồ bố trí thí nghiệm
NT
CĂLT CĂCT ĐC
Ô thí nghiệm Ô1 Ô2 Ô4 Ô3 Ô5 Ô9 Ô7 Ô8 Ô6
Số gà thí nghiệm 100 100 100 100 100 100 100 100 100
3.2.2 Quy trình chăm sóc, nuôi dƣỡng
-Cắt mỏ gà: gà trước khi thả xuống nền đều được cắt mỏ bằng máy cắt mỏ gà tự động, lần cắt mỏ kế tiếp được tiến hành khi chúng có dấu hiệu mổ nhau (trong mỗi đợt gà thường có khoảng 3-4 lần cắt mỏ).
-Cho ăn: gà được cho ăn tự do, thức ăn thừa thu lại cân khối lượng vào mỗi buổi sáng trước khi cho thức ăn mới đã cân khối lượng vào. Mỗi ngày cho ăn 4 lần lúc 7 giờ, 10 giờ, 13 giờ và 16 giờ.
-Nước uống: mỗi ngày thay bầu nước 3 lần lúc 7 giờ 30, 13 giờ 30 và 16 giờ 30. Ngoài ra, pha thêm Vime C electrolyte cho gà uống trong những ngày thời tiết nóng hoặc vừa tiêm phòng.
Máng ăn và bầu nước phải được điều chỉnh sao cho chiều cao của miệng máng ngang tầm với lưng của gà. Hình 3.6 minh họa chiều cao máng ăn, bầu nước cho gà.
- Chế độ chiếu sáng: ban ngày sử dụng ánh sáng tự nhiên, chiều 17 giờ bật đèn đến 22 giờ tắt ( tương đương khoảng 16 giờ chiếu sáng). Trại sử dụng bóng đèn loại 40 W, treo cách nền chuồng > 2 m, khoảng cách 2 bóng đèn là 2,5 m. Trong trường hợp ban ngày nhưng ánh sáng không đủ do trời mưa hoặc mây che mặt trời làm tối chuồng nuôi thì cũng mở rèm che hoặc bật bóng đèn cho đủ ánh sáng cho gà, đảm bảo gà mổ thức ăn được.
-Vệ sinh chuồng: khoảng 7-10 ngày cào trên bề mặt trấu một lần để phân sẽ được phân hủy nhanh. Nếu thấy nước rớt làm ướt nền trấu thì thay bằng lớp trấu mới, định kỳ 2-3 tháng thay trấu mới một lần. Khi thay trấu phải nhẹ nhàng tránh gây xáo trộn mạnh.
- Kiểm tra sức khỏe gà mỗi ngày 2 lần vào buổi sáng và buổi chiều, bắt ra nuôi riêng những con bệnh và những con nghi mắc bệnh truyền nhiễm.
3.2.3 Quy trình phòng bệnh ở trại
Đàn gà thí nghiệm được tiêm vaccine, sử dụng thuốc theo hướng dẫn của công ty Vemedim. Quy trình phòng bệnh của trại được thể hiện ở Bảng 3.4
Bảng 3.4 Quy trình phòng bệnh của trại
Vaccine Kháng sinh và các thuốc khác
Ngày
tuổi Tên vaccine (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
Cách dùng Ngày tuổi Bệnh Kháng sinh 1, 2, 3 Marek 1-3 Tăng sức đề kháng Vimix Plus, Vitamin C100, Phòng CRD, E.coli, viêm rốn Tilmo-Vime 250 + Vime Coam 4 NC hệ F (lần 1)
Nhỏ mắt, mũi 5-7 Bổ sung vitamin, khoáng, tăng sức đề kháng, chống stress Vimix Plus, Vitamin C100,
7 Gumboro Nhỏ mắt, mũi 8-9 Ngừa Cầu trùng
lần 1 Vicox Toltra, Vimecox SPE3, Dilacox 10 Đậu Đâm màng cánh 11-13 Phòng hô hấp, tiêu hóa Doxyt, Vimenro, 14 Cúm gà H5N1 Tiêm dưới da cổ 18 NC Lasota (lần 2)
Miệng 2 giọt 22-25 Phòng hô hấp mãn tính Tilmo, Tylo, Norflox 21 Gumboro lần 2 Nhỏ mắt, mũi Phòng cầu trùng lần 2 Vicox toltra, Vimecox SPE3... 34-36 Tăng sức đề kháng Vimix Plus, Vitamin C100, (Nguồn: Công ty Vemedim, 2014)
3.2.4 Phƣơng pháp lấy mẫu
Thí nghiệm được tiến hành trong 8 tuần (tương đương 56 ngày), gà được nuôi từ đầu tuần tuổi thứ 5 đến hết tuần tuổi thứ 12.
- Tất cả gà thí nghiệm được cân khối lượng ban đầu trước khi tiến hành thí nghiệm và cân lại khối lượng lúc gà được 6, 8, 10 và 12 tuần tuổi. Hằng ngày cân lượng thức ăn cho ăn buổi sáng, cân lượng thức ăn thừa vào buổi sáng hôm sau, ghi nhận tình trạng sức khỏe, số gà chết.
- Đối với chỉ tiêu định lượng E. coli trong 1g phân gà, vì phân gà rất ít không đủ 1g phân trên một con gà nên nghiên cứu tiến hành lấy mẫu gộp, mỗi mẫu bắt ngẫu nhiên 2-3 gà thịt trong ô thí nghiệm. Dùng cồn sát trùng hậu môn, dùng tâm bông vô trùng ngoáy sâu vào trực tràng của gà. Khi tâm bông đã thấm ướt phân thì lấy ra, cho vào ống nghiệm rồi ghi ký hiệu mẫu. Chỉ tiêu này lấy theo đợt, lúc gà được 6, 8, 10 và 12 tuần tuổi, mỗi đơn vị thí nghiệm lấy 3 mẫu, như vậy mỗi đợt lấy tổng cộng 27 mẫu.
3.3 Các chỉ tiêu theo dõi
3.3.1 Chỉ tiêu về khối lƣợng và tăng trọng
Ghi nhận khối lượng gà đầu thí nghiệm và sau 2 tuần nuôi, khối lượng và tăng trọng của gà được tính theo các công thức sau
3.3.2 Chỉ tiêu tiêu tốn thức ăn và hệ số chuyển hóa thức ăn
Mức tiêu tốn thức ăn (TTTĂ) được đánh giá qua lượng thức ăn ăn vào hằng ngày. Hằng ngày ghi nhận lượng thức ăn cho ăn, thức ăn dư và rơi vãi vào buổi sáng hôm sau. TTTĂ được tính theo công thức
Tăng trọng qua các tuần tuổi (g/con)
Khối lượng trung bình cuối tuần (g/con)
Khối lượng trung bình đầu tuần (g/con) Khối lượng trung bình
qua các tuần tuổi (g/con)
Tổng trọng lượng (g) Tổng số con
Tăng trọng tuyệt đối qua các tuần tuổi (g/con)
Khối lượng tuần t (g) – khối lượng ban đầu (g) Thời gian t (ngày)
Tiêu tốn thức ăn qua các tuần tuổi (g/con/ngày)
Tổng TĂ cho ăn (g) – Tổng TĂ dư (g) Tổng số con x 56
Hệ số chuyển hóa thức ăn (HSCHTĂ) được tính theo công thức
3.3.3 Tỷ lệ hao hụt
Chỉ tiêu này phản ánh khả năng thích nghi của gà đối với tiểu khí hậu chuồng nuôi và quy trình chăm sóc nuôi dưỡng. Quan sát tình trạng sức khỏe, tình hình bệnh tật của đàn gà rồi ghi nhận lại những con mắc bệnh, kết quả chuẩn đoán, điều trị và ghi lại số gà chết. Tỷ lệ hao hụt được tính như sau
3.3.4 Định lƣợng vi khuẩn E. coli trong 1g phân gà bằng phƣơng pháp đếm khuẩn lạc
a. Phƣơng pháp pha loãng mẫu theo dãy thập phân
Cân 1 g phân cho vào ống nghiệm chứa 9 ml nước muối sinh lý 9 ‰. Lắc đều bằng máy lắc Vortex, khi đó ta có độ pha loãng 10-1
. (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
Dùng micropipette hút 1 ml dung dịch trên cho vào ống nghiệm có chứa 9 ml nước muối sinh lý 9 ‰, trộn lên bằng máy lắc Vortex ta có độ pha loãng 10-2. Tiếp tục pha loãng như trên ta sẽ được các độ pha loãng tiếp theo cho đến khi đạt độ pha loãng 10-5. Mỗi lần chuyển từ nồng độ này sang nồng độ khác cần thay đầu cole vô trùng.
b. Phƣơng pháp cấy mẫu
Chuẩn bị đĩa thạch môi trường MC vô trùng. Lấy dung dịch ở ba nồng độ pha loãng cuối cùng, mỗi nồng độ 0,1 ml cho vào đĩa môi trường MC đã chuẩn bị sẵn, mỗi nồng độ sử dụng 2 đĩa môi trường tương đương với 2 lần lập lại.
Dùng que chang đã tiệt trùng chang đều dịch cấy cho đến khô. Sau đó lật ngược đĩa lại đem vào tủ ấm ủ mẫu ở 37oC trong 24 giờ.
Sau thời gian ủ mẫu kiểm tra sự mọc của các đĩa, đếm số khuẩn lạc đặc trưng, khuẩn lạc E. coli mọc trên môi trường MC hình tròn, lồi, màu đỏ hồng và có đường kính 1-2 mm (Hình 3.7), trên môi trường EMB khuẩn lạc E. coli
có màu tím đen có ánh kim (Hình 3.8). Chọn 5 khuẩn lạc đặc trưng cấy vào môi trường NA để thử phản ứng IMViC++ – – khẳng định vi khuẩn E. coli.
HSCHTĂ các tuần (kg TĂ/kg tăng trọng)
Tổng TĂ tiêu tốn/tuần tuổi (kg/tuần)
Tổng tăng trọng/tuần tuổi (kg/tuần)
Tỷ lệ hao hụt (%) Số con đầu kỳ – số con cuối kỳ
c. Thử nghiệm IMViC
IMViC (Hình 3.9) là các thử nghiệm dùng để phân biệt vi khuẩn E. coli
với các vi khuẩn đường ruột khác. IMViC là gọi tóm tắt chung của các thử nghiệm khả năng sinh Indol (I) cho kết quả dương tính (+), Methyl Red (MR) dương tính (+), Voges-Proskauer (VP) âm tính (–) và khả năng biến dưỡng Citrate (iC) âm tính (–).
- Thử nghiệm khả năng sinh Indol: bắt khuẩn lạc từ môi trường NA cấy vào ống nghiệm chứa môi trường Peptone, ủ ở nhiệt độ 37o
C trong 24 giờ. Sau đó nhỏ vài giọt thuốc thử Kovacs để yên vài phút rồi đọc kết quả. Phản ứng dương tính (+) khi bề mặt môi trường từ một vòng màu vàng chuyển thành màu đỏ, âm tính (–) khi bề mặt môi trường xuất hiện vòng màu vàng.
Hình 3.7 Khuẩn lạc E. coli trên môi trường MC
Hình 3.8 Khuẩn lạc E. coli trên môi trường EMB
Hình 3.9 Kết quả thử nghiệm IMViC định danh vi khuẩn E. coli
1. Thử nghiệm Methyl Red (+) 2. Thử nghiệm Voges-Proskauer (–) 3. Thử nghiệm khả năng sinh Indol (+)
- Thử nghiệm Methyl Red (MR): bắt khuẩn lạc từ môi trường NA cấy vào ống nghiệm chứa môi trường MR-VP Broth, ủ ở nhiệt độ 37o
C trong 24 giờ. Sau đó nhỏ vài giọt thuốc thử Methyl Red, đọc kết quả. Phản ứng dương tính (+) khi môi trường từ màu vàng chuyển sang màu đỏ, âm tính (–) khi môi trường có màu vàng.
- Thử nghiệm Voges-Proskauer (VP): bắt khuẩn lạc từ môi trường NA cấy vào ống nghiệm chứa môi trường MR-VP Broth, ủ ở nhiệt độ 37o
C trong 24 giờ. Sau đó nhỏ vào ống nghiệm 3-4 giọt α-napthol, 3 giọt KOH, để yên vài phút rồi đọc kết quả. Phản ứng dương tính (+) khi có màu đỏ xuất hiện trên bề mặt môi trường, âm tính (–) khi bề mặt môi trường không đổi màu.
- Thử nghiệm khả năng biến dưỡng Citrate (iC): Dùng que cấy lấy sinh khối khuẩn lạc từ môi trường NA ria lên môi trường thạch nghiêng SCA, ủ ở nhiệt độ 37o
C trong 24 giờ. Phản ứng dương tính (+) khi môi trường chuyển sang màu xanh dương , âm tính (–) khi môi trường giữ nguyên màu xanh lục.
d. Cách tính kết quả
Dựa vào số khuẩn lạc đếm được và tỷ lệ khẳng định, tính mật độ của vi khuẩn E. coli theo công thức
N
A (CFU/g ) = * R (n1 + 0.1 n2 + 0.01 n3) * V * d
Trong đó: (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
N: Tổng số số khuẩn lạc đếm được trên các đĩa d: độ pha loãng của bật n1
n1: số đĩa nuôi cấy ở độ pha loãng đầu
n2, n3: số đĩa nuôi cấy ở các độ pha loãng tiếp theo V : thể tích dung dịch pha loãng đem nuôi cấp R: là tỷ lệ khẳng định
3.3.5 Hiệu quả kinh tế
Do thí nghiệm được bố trí trong cùng điều kiện nên hiệu quả kinh tế được tính dựa trên số tiền bán gà trừ đi tổng chi phí thức ăn và các khoản chi khác.
3.3.6 Xử lý số liệu
Các số liệu thu thập được xử lý xơ bộ bằng phần mềm Microsoft Excel và xử lý thống kê bằng phần mềm Minitab Version 16 theo mô hình tuyến tính tổng quát (General Linear Model). So sánh giá trị trung bình các cặp nghiệm thức bằng phương pháp Tukey với khoảng tin cậy 95%.
Chƣơng 4
KẾT QUẢ THẢO LUẬN
4.1 Nhận xét chung về đàn gà trong thời thí nghiệm
Nhìn chung trong thời gian thực hiện thí nghiệm đàn gà tương đối khỏe mạnh, không có dịch bệnh nặng xảy ra. Tuy nhiên, kết quả phân lập các mẫu bệnh phẩm tại phòng thí nghiệm của trung tâm R&D công ty Vemedim cho thấy tỷ lệ gà bị nhiễm Staphylococcus còn nhiều nên dẫn đến tỷ lệ hao hụt cao. Kết quả mổ khám cho thấy tỷ lệ gà nhiễm giun sán tương đối cao nên cũng ảnh hưởng đến tăng trọng của gà.
Bên cạnh đó, do được nuôi ở điều kiện chuồng hở, nhiệt độ môi trường ở huyện Thới Lai, thành phố Cần Thơ từ tháng 3 đến tháng 5 năm 2014 tương đối cao, nhiệt độ môi trường nóng nhất có thể lên đến 38-39oC, buổi chiều thường có mưa to. Đây cũng là một trong những tác nhân gây stress cho đàn gà trong thời gian thí nghiệm.
4.2 Ảnh hƣởng của các nghiệm thức lên khối lƣợng và tăng trọng của gà trong thời gian khảo sát
4.2.1 Khối lƣợng của gà qua các tuần tuổi khảo sát
Khối lượng cơ thể là một chỉ tiêu quan trọng vì nó quyết định phần lớn hiệu quả trong chăn nuôi và là mục đích của việc áp dụng những thành tựu khoa học kỹ thuật nhằm nâng cao khối lượng cơ thể trong một khoảng thời gian. Để đánh giá khối lượng gà, nghiên cứu tiến hành cân khối lượng đàn gà thí nghiệm ở các tuần tuổi 4, 6, 8, 10 và 12. Cân hết toàn bộ gà trong ô thí nghiệm và không phân biệt trống, mái. Khối lượng bình quân của đàn gà thí nghiệm qua các giai đoạn khảo sát được trình bày trong Bảng 4.1
Bảng 4.1 Khối lượng bình quân của đàn gà qua các giai đoạn khảo sát (g/con)
Tuần tuổi
NT
SE P
CĂLT CĂCT ĐC
Đầu thí nghiệm (Tuần 4) 373,57 382,23 372,97 3,61 0,209
Tuần 6 525,03 532,50 521.97 12,97 0,844
Tuần 8 675,76a 670,01ab 644,96b 6,50 0,033
Tuần 10 854,38 839,36 809,36 14,36 0,158
Tuần 12 1.114,21a 1.088,37a 947,89b 16,80 0,001
Ghi chú: Các trung bình trong một hàng có chữ số a,b khác nhau thì sai khác có ý nghĩa (P≤0,05)
Hình 4.1 Biểu đồ khối lượng bình quân gà ở các tuần tuổi khảo sát 0 200 400 600 800 1000 1200 4 6 8 10 12 tuần tuổi K hố i l ư ợng , g /c on ) CĂLT CĂCT ĐC
hưởng của chế phẩm men vi sinh Bactozyme lên tăng trọng của gà. Sự khác biệt này có ý nghĩa thống kê (P≤0,05) ở tuần tuổi thứ 8 và 12. Đặc biệt là ở tuần 12, khối lượng bình quân của gà có sự khác biệt có ý nghĩa thống kê giữa nghiệm thức (NT) CĂLT, CĂCT so với NT ĐC. Khối lượng gà đầu thí nghiệm (tuần 4) tuy có sự khác biệt nhưng sai khác này không có ý nghĩa thống kê (P=0,209). Hình 4.1 Biểu đồ khối lượng bình quân của gà tại các giai đoạn khảo sát cho thấy rõ sự chênh lệch khối lượng cơ thể gà giữa các tuần tuổi và các nghiệm thức.
Ở tuần tuổi thứ 8 khi theo dõi khối lượng gà của từng nghiệm thức, nghiên cứu cho thấy khối lượng bình quân ở NT CĂLT (675,76 g) và NT CĂCT (670,01 g) đều đạt khối lượng tốt hơn NT ĐC (644,96 g), sai khác có ý nghĩa ở NT CĂLT và NT ĐC. Tương tự ở tuần tuổi 12, khối lượng bình quân của gà ở NT CĂLT (1.114,21g) và NT CĂCT (1.088,37 g) có khối lượng tốt hơn NT ĐC (947,89 g) và sai khác này có ý nghĩa thống kê. Kết quả trên chứng tỏ việc bổ sung chế phẩm men vi sinh Bactozyme vào khẩu phần của gà đã có những ảnh hưởng tích cực đến khối lượng của gà. Tuy nhiên sai khác giữa NT CĂLT và NT CĂCT ở tuần 8 và 12 không có ý nghĩa thống kê và khối lượng gà ở NT CĂLT đều cao hơn NT CĂCT. (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
Ở tuần 6 và tuần 10 khối lượng bình quân của gà ở NT CĂLT và NT CĂCT có cao hơn NT ĐC nhưng sai khác giữa các nghiệm thức không có ý nghĩa thống kê (P>0,05). Nguyên nhân có thể do ở tuần 6 trại đang có bệnh do vi khuẩn Staphylococcus, toàn đàn được điều trị bằng kháng sinh nên có thể đã ảnh hưởng đến khả năng tiêu hóa và hấp thu cũng như các tác động tích cực