7. Hoạt chất Abamectin
2.1.4. Dịch trích Thủy xương bồ (Acorus calamus L.)
Thu mẫu: thủy xương bồ được thu tại thị xã Bình Minh, tỉnh Vĩnh Long và đem về phòng thí nghiệm Bộ môn Bảo Vệ Thực Vật để ly trích.
Chuẩn bị mẫu: Bộ phận thân rễ cây Thủy Xương Bồ sẽ được tách lấy, rửa sạch bằng nước, loại bỏ phần rễ phụ và phần vỏ khô bên ngoài. Sau đó tiến hành việc ly trích mẫu.
Hình 2.4: Hình (a)cây thủy xương bồ (Acorus calamus L.), (b) phần căn hành được làm sạch và (c) phần căn hành được cắt ra.
Hình 2.3: Nhân nuôi bọ xí muỗi trong nhà lưới: (a) ấu trùng BXM được nuôi trong hộp nhựa; (b) thành trùng của BXM được cho bắt cặp và đẻ trứng trong nhà lưới;
Theo Lê Chí Hùng (2010), quy trình ly trích được thực hiện như sau:
- Bước 1: dùng dao cắt nhỏ bộ phận thân rễ của cây Thủy Xương Bồ và nghiền sấy khô, sau đó cho vào bình tam giác thể tích 500 ml.
- Bước 2: cho tiếp 200 ml dung môi ethyl acetate vào bình tam giác tương ứng với 200 gram mẫu được nghiền và ngâm trong 24h.
- Bước 3: tách lấy phần dịch lỏng của hỗn hợp cho vào một phiễu phân tách. Hỗn hợp còn lại trong bình tam giác được rửa với 50 ml ethyl acetate (lặp lại 3 lần).
- Bước 4: lọc dung dịch thu được qua một cột có nhồi miếng bông gòn 70 gram sodium sulfate (Na2SO4) mục đích là loại bỏ nước ra khỏi dịch trích, dung dịch sau khi đi qua cột nhồi hứng lại trong một bình cầu. Cho tiếp vào phiễu 200 ml ethyl acetate, lắc đều rồi tách lấy phần hữu cơ, lọc qua nhồi Na2SO4 để kết hợp với phần hữu cơ trong bình cầu. lập lại 3 lần thì ngưng.
- Bước 5: lấy bình cầu có chứa dung dịch đã loại nước đem bay hơi dung môi bởi hệ thống bay hơi dung môi (máy cô quay chân không RE300B) ở nhiệt độ 400C và áp suất chân không 90 torr trong 30 phút để cô đặc dung dịch xuống còn khoảng 2 ml. Dùng ống hút thủy tinh hút hỗn hợp cô đặc cho vào lọ thủy tinh có màu tối dung tích 3 ml được quấn giấy bạc có nắp đậy Teflon. Đem lọ thủy tinh chứa dịch trích thân rễ cây TXB đặt vào một buồng hút chân không trong 3 giờ để đảm bảo dung môi ethyl acetate bay hơi hoàn toàn.