6 Kiểm tra khả năng sinh sắc tố nâu
3.5.1. Thu hoạch, xử lý và thử khả năng kháng khuẩn của màng BC
Chủng vi khuẩn Acetobacter xylinum M5 đ−ợc tuyển chọn dựa trên các đặc điểm về hình thái khuẩn lạc, hình thái tế bào, các chỉ tiêu sinh hoá, kết hợp với quá trình nuôi cấy tạo màng BC. Kết quả cho thấy rằng: chủng
Acetobacter xylinum M5 sinh tr−ởng tạo màng BC khá ổn định, cho màng
mỏng, dai, khả năng hấp thụ và giữ n−ớc tốt, đặc biệt là thời gian hình thành màng rất nhanh.
Chúng tôi tiến hành nuôi cấy vi khuẩn Acetobacter xylinum M5 trên môi tr−ờng gồm 1 với các điều kiện nh−: pH = 5, to = 30oC, thời gian nuôi cấy: 4 ngày để sản xuất màng BC với các kích th−ớc khác nhau, có độ dày từ 2- 3mm.
Xử lý màng BC sau nuôi cấy đ−ợc tiến hành nh− sau:
+ Màng BC sau khi tách khỏi môi tr−ờng nuôi cấy đem rửa sạch d−ới vòi n−ớc máy từ 2- 3 lần, để loại bỏ bớt hàm l−ợng axit và các sản phẩm d− của môi tr−ờng, làm pH tăng dần từ 3,5 lên 4,5 khi đo bằng giấy quỳ.
Khóa luận tốt nghiệp K31 Khoa Sinh - KTNN
+ Đem đun cách thuỷ màng BC ở 100oC trong vòng 30 phút, loại các tế bào vi khuẩn có mặt trong màng BC, sau đó rửa lại bằng n−ớc vô trùng để màng BC có giá trị pH trong khoảng từ 5,5- 6.
+ Tẩm mật ong và thử nghiệm đắp trên da.
Màng BC sau khi đ−ợc xử lý có những đặc điểm sau: màu trắng, mùi thơm dễ chịu, khả năng bám dính tốt nhất, khả năng hấp thụ n−ớc cao, tính đàn hồi tốt nh−ng độ trơ của màng BC tăng. Để làm tăng tác dụng của màng BC khi đắp cần bổ sung vào màng một số d−ỡng chất. Mật ong là nguồn d−ợc liệu thiên nhiên có chứa nhiều yếu tố có lợi cho da và sức khoẻ con ng−ời (vitamin, nhân tố khoáng, một số axit hữu cơ). Vì vậy việc sử dụng mật ong tẩm lên màng BC làm nguồn cung cấp d−ỡng chất cho da là rất tốt.
Thử khả năng kháng khuẩn của màng BC:
Theo hiệp định hệ thống hoà hợp Asean (Nxb Asean cosmetic
documents 2003) quy định trong mỹ phẩm không đ−ợc nhiễm 3 loài vi khuẩn:
Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus, E.coli. Đây là nhóm vi khuẩn
th−ờng tồn tại trên da, tóc, mũi… sản sinh những độc tố gây nguy hại đến sức khoẻ con ng−ời [15]. Vì vậy việc thử khả năng kháng khuẩn của màng BC là cần thiết và đ−ợc tiến hành theo 2 b−ớc sau: nuôi cấy 3 loài vi khuẩn trên môi tr−ờng nuôi cấy vi sinh vật kiểm định; phủ màng BC tẩm mật ong lên trên bề mặt môi tr−ờng nuôi cấy 3 loài vi sinh vật trên, quan sát hiện t−ợng sau 24 giờ (hình 3.7).
Khóa luận tốt nghiệp K31 Khoa Sinh - KTNN
Khóa luận tốt nghiệp K31 Khoa Sinh - KTNN
Hình 3.6. Khả năng kháng khuẩn của màng BC tẩm mật ong
Hình thành vòng kháng khuẩn xung quanh màng BC tẩm mật ong. Màng BC này có khả năng ức chế sinh tr−ởng của vi sinh vật kiểm định trên. Đây là một đặc tính quan trọng cần thiết của màng BC tẩm mật ong dùng làm mặt nạ.