Kết quả từ các thí nghiệm trên nhận thấy, quá trình lên men sinh tổng hợp protease từ A. niger trên cơ chất bột đậu nành ở độ ẩm 55%, môi trƣờng lên men ban đầu có pH = 5 với thời gian ủ 72 giờ là những thông số tối ƣu nhằm tạo ra chế phẩm enzyme protease có hoạt tính cao nhất. Tuy nhiên, nhiệt độ một yếu tố cũng quan trọng và có ảnh hƣởng rất lớn đến quá trình nuôi cấy và khả năng sinh enzyme của vi sinh vật. Trong cùng thời gian nuôi ủ tối ƣu (72 giờ), ở các nhiệt độ khác nhau (28C, 31C, 34C, 37C ) sẽ thu đƣợc protease có hoạt tính khác nhau. Kết quả khảo sát đƣợc thể hiện ở hình 4.1.
Hình 4.1: Ảnh hƣởng của nhiệt độ đến hoạt tính protease thu đƣợc từ quá trình lên men
Aspergillus niger
Kết quả ở hình 4.1 cho thấy, hoạt tính protease cao nhất khi nhiệt độ nuôi ủ
Aspergillus niger S5 ở 31C, hoạt tính thu đƣợc là 0,126 0,012 U/g. Ở 28C, hoạt tính thu đƣợc cũng khá cao (0,109 0,010 U/g). Tuy nhiên, khi nhiệt độ càng tăng thì hoạt tính enzyme càng giảm (chỉ còn 0,078 0,005 U/g ở 34C và 0,073 0,006 U/g ở 37C). Điều này có thể giải thích do ở nhiệt độ cao, quá trình trao đổi chất và phát triển của vi sinh vật bị hạn chế (Haq et al., 2006); đồng thời, enzyme protease bị biến tính và mất hoạt tính xúc tác do sự kéo dài và phá vỡ của các liên kết hydro trong cấu trúc của enzyme (Conn et al., 1987) dẫn dến hoạt tính protease giảm dần. Nghiên cứu của Ikram et al. (2006) trên dòng Penicillium chrysogenum cũng đã chứng tỏ rằng nhiệt độ thích hợp để sản xuất protease là 31C.
Kết quả thí nghiệm này cho thấy quá trình lên men rắn sinh tổng hợp protease từ nấm mốc thích hợp ở khoảng nhiệt độ ôn hòa, từ 28C và 31C. Tuy nhiên, nhiệt độ tối thích và dễ thực hiện nhất sẽ là ở 31C và thời gian ủ thích hợp giúp thu nhận hoạt tính protease cao nhất là 72 giờ.
CHƢƠNG 5 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ