và ứng dụng lâm sàng:
Xét nghiệm Ưu điểm Nhược điểm Nghiên
cứu Theo dõi aspi/clopi
Thời gian chảy máu
Xét nghiệm trực tiếp, sử dụng rộng rãi.
Không đặc hiệu, không nhậy.
Không Không
PFA 100® System Nhanh, đơn giản tương quan với kết quả lâm sàng
Phụ thuộc yếu tố Von Willebrand và Hematocric Không điều chỉnh được độ chính xác của máy ở mỗi lần đo
Có Có
Verify now Đơn giản, nhanh,
tương quan với kết quả lâm sàng
Không điều chỉnh được độ chính xác của máy ở mỗi lần đo
Có Có
Đo kết tập tiểu cầu bằng độ truyền quang
Tiêu chuẩn vàng (trong quá khứ). Tương quan với kết quả lâm sàng
Thời gian xét nghiệm lâu, đắt tiền. Giá trị chẩn đoán thấp
Đo 11 dehyro thromboxane trong nước tiểu
Đặc hiệu cyclooxy genase-1, xét nghiệm tương quan với kết quả lâm sàng.
Không đặc hiệu cho tiểu cầu, đo gián tiếp, phụ thuộc chức năng thận. Giá trị chẩn đoán không chắc chắn
Có Không
VASP Đặc hiệu cho
P2Y12 hoạt hóa Đắt tiền, cần dụng cụđặc biệt, người làm có kinh nghiệm
Có Không
Thromboelastogram Dùng kẹp ngón chân, thuận lợi cho gây mê tim mạch.
Kết quả phụ thuộc vào người làm, khó giải thích kết quả, nghiên cứu lâm sàng nhỏ Có Với bản đồ tiểu cầu. Multiplate® analyzer Dùng nhiều điện cực, máu toàn phần, thể tích nhỏ, đơn giản và nhanh
Cần dụng cụ đặc biệt Aspi/clopi
(Nguồn: 1.Đỗ Quang Huân (2010), Chuyên Đề Tim Mạch Học, Tháng 4/2010, Wedside: http://timmachhoc.vn, Đăng nhập: 10/11/2011 4/2010, Wedside: http://timmachhoc.vn, Đăng nhập: 10/11/2011
2. Patrick Gladding, Mark Webster, John Ormiston, Sarah Olsen, Harvey White (2008), American Heart Journal, 155(4), p591-599.) Harvey White (2008), American Heart Journal, 155(4), p591-599.)
Trong nghiên cứu này chúng tôi áp dụng phương pháp PFA 100® System để đánh giá chức năng tiểu cầu ở bệnh nhân dùng aspirin và clopidogrel.
Xét nghiệm phân tích chức năng tiểu cầu PFA 100 (Plaletes Function Anlyzer system 100®):
PFA -100 là một hệ thống phân tích chức năng tiểu cầu. Trong đó máu toàn phần hòa với dung dịch citrat được hút vào cái hộp (cartridge) sử dùng một lần có một khoảng hở kích thước nhỏ (147 µm) ở giữa và có màng phủ collagen/epinephrine (CEPI) hoặc collagen/ADP (CADP). Các chất chủ vận này gây kết dính tiểu cầu, kích hoạt và kết tập tiểu cầu dẫn đến tắc nhanh chóng khoảng hở và máu ngừng di chuyển được gọi là thời gian lấp kín (Closure Time - CT).
Sử dụng cartridge collagen/ADP (CADP) thông thường không nhạy với các thuốc thienopyridine vì vậy nhà sản xuất đã phát triển một cartridge mới - INNOVANCE PFA P2Y* sử dụng prostaglandin E1 (PGE1) để hoạt hóa adenyl cyclase trong cartridge.
Khoảng giá trị bình thường tham khảo của hai phương pháp phụ thuộc vào nồng độ citrate.Với nồng độ citrate khác nhau, giá trị bình thường tương ứng theo bảng 1.7:
Bảng 1.8: Giá trị bình thường của xét nghiệm PFA 100 theo nhà sản xuất:
Nồng độ kháng đông CEPI CADP PFA P2Y*
Sodium citrate 3,2% 84 – 160 giây 68 – 121 giây < 106 giây (không phụ thuộc vào
nồng độ citrate) Sodium citrate 3,8% 82 – 150 giây 62 – 100 giây
(Nguồn: Công Ty TNHH Trang Thiết Bị Y Mai Đông (2011), Nhà phân phối Các sản phẩm của Siemens Diagnostics Tp. Hồ Chí Minh, Tr 1 - 10.[1]).
Ưu điểm của phương pháp này: chỉ cần một thể tích máu tĩnh mạch được citrate hóa (800 µL), có lợi khi dùng đánh giá chức năng tiểu cầu ở trẻ em, có thể không cần người làm có kinh nghiệm, máy thực hiện nhanh và tự động hoàn toàn. Phương pháp PFA-100 được thiết kế để tầm soát những vấn đề về cầm máu ban đầu và thay thế cho xét nghiệm thời gian máu chảy, nhanh hơn xét nghiệm đo ngưng tập tiểu cầu bằng độ truyền quang. Phương pháp này có giá trị tiên đoán âm cao, khi kết quả trong giới hạn bình thường cho phép loại trừ những rối loạn cầm máu ban đầu. Có nhiều nghiên cứu dùng xét nghiệm PFA 100 để đánh giá chức năng tiểu cầu cho hai thuốc aspirin và clopidogrel, điểm cắt lựa chọn để kết luận đáp ứng và không đáp ứng với thuốc dao động từ 160 đến 193 giây với xét nghiệm PFA CEPI
(bảng 1.8) cho aspirin và 106 đến 299 cho clopidogrel giây (bảng 1.9).
Bảng 1.9: Liều và điểm cắt để đánh giá đáp ứng và không đáp ứng điều trị với asprin:
Nghiên cứu Đối tượng và cỡ mẫu Liều aspirin (mg/ngày)
Điểm cắt (giây)
M. Lordkipanidze BMV mạn (n=201) ≥ 100 193 I. Narvaez BMV mạn (n=268) 100 - 300 174 Hobikoglu GF HCMVC (n=104) BMV mạn (n=100) 160 - 325 170 A. Aydinalp BMV mạn (n= 79) BMV mạn (n= 80) 100 300 165 Ingrid Fuchs HCMVC (n=234) 162-325 193 T. S. Poulsen HCMVC (n=298) 150 165
Nghiên cứu Tina Svenstrup Poulsen và cộng sự, sử dụng xét nghiệm PFA 100 để theo dõi điều trị aspirin ở bệnh nhân có bệnh mạch vành. Nghiên cứu bệnh chứng (n=20) được thực hiện trong 2 năm (2001 – 2003), tác giả nhận thấy điểm cắt 165 giây để kết luận đáp ứng hoặc không đáp ứng với aspirin có mối tương quan chặt với xét nghiệm đo độ kết tập tiểu cầu bằng phương pháp truyền quang (hệ số Kappa = 0.7).
Bảng 1.10: Liều và điểm cắt để đánh giá đáp ứng và không đáp ứng với điều trị bằng clopidogrel:
Nghiên cứu Đối tượng và cỡ mẫu Liều clopidogrel (mg/ngày)
Điểm cắt (giây)
Juergen Koessler BMV, có can thiệp mạch vành (n= 50) Liều tải 600 mg Liều duy trì 75 mg 106 BMV, có can thiệp mạch vành (n= 50) Liều tải 600 mg Liều duy trì 75 mg 200 Nicoline J. Breet BMV, có can thiệp
mạch vành (n= 588) Liều tải 600 mg Liều duy trì 75 mg 299 David L. McGlassona BMV, có can thiệp mạch vành (n= 101) Liều tải 300 - 600 mg Liều duy trì 75 mg 106
Một số yếu tố có thể ảnh hưởng lên kết quả của xét nghiệm PFA 100® System như:
o Nồng độ citrate: các phòng xét nghiệm phải sử dụng nồng độ citrate luôn cố định, không thay đổi (3,2% hoặc 3,8%).
o Thời gian mẫu máu được đưa đến phòng xét nghiệm: càng sớm càng tốt, tối đa trong vòng 4 giờ và không được trữ lạnh.
o Dung tích hồng cầu (Hct): closure time tăng khi Hct giảm (<25%) và ngược lại closure time giảm khi dung tích hồng cầu quá cao (> 50%).
o Số lượng tiểu cầu: closure time tăng khi số lượng tiểu cầu dưới 100.000 x 109/L và giảm khi số lượng tiểu cầu >500.000 x 109/L
o Nhóm máu và yếu tố vonWillebrand: closure time có tương quan nghịch với mức von-Willebrand trong máu, thường người có nhóm máu O closure time tăng vì trong máu người có nhóm máu O có yếu tố von – Willebrand thấp.
o Các thuốc ức chế COX như aspirin hay NSAID chỉ làm tăng closure time ở xét nghiệm PFA-100 sử dụng màng collagen/epinephrine (CEPI), còn màng phủ collagen/ADP (CADP) thì không ảnh hưởng. Thuốc ức chế thụ thể GP IIb/IIIa ảnh hưởng đến closure time của cả hai phương pháp.
o Khiếm khuyết chức năng tiểu cầu mắc phải: cầu nối tim phổi, suy gan và hội chứng urê huyết cao đều làm tăng closure time
o Một vài loại thức ăn có thể ảnh hưởng đến chức năng tiểu cầu như: thức ăn giàu acid omega 3, gừng, tỏi, nghệ, hành, nấm đen, đinh hương, bạch quả. Vì vậy, tốt nhất làm xét nghiệm xa các bữa ăn.
1.5 LƯỢC QUA CÁC NGHIÊN CỨU:
Trong bệnh lý tim mạch do xơ vữa động mạch, các xét nghiệm chức năng tiểu cầu được ứng dụng để theo dõi đáp ứng của thuốc chống kết tập tiểu cầu và được đề cập trong rất nhiều công trình nghiên cứu ngoài nước, y văn trong nước còn giới hạn, chúng tôi chưa tìm thấy công trình nghiên cứu liên quan về vấn đề này được công bố trong nước.