- Cấy truyền từ môi trường PDA sang môi trường PDA
3.2.Sự sinh trưởng, phát triển của Cordyceps sp1 trên môi trường PDA 1 Khả năng sinh trưởng, phát triển của Cordyceps sp1 trên môi trường PDA
3.2.1. Khả năng sinh trưởng, phát triển của Cordyceps sp1. trên môi trường PDA
Môi trường PDA pha chế đơn giản và thích hợp cho sự sinh trưởng, phát triển của nhiều loài EPF.
Khi lấy bào tử hữu tính từ quả thể Cordyceps sp1. phân lập trên môi trường PDA, nuôi trong tủ Colifom ở 220C thì sau 24 - 48 giờ, nó sẽ phát triển thành bào tử thứ cấp (bào tử chồi). Trong 24 giờ tiếp theo, bào tử chồi sẽ nảy mầm, bắt đầu có sự xuất hiện của sợi nấm và có thể nhận thấy bằng mắt thường. Thể sợi nấm sinh trưởng trên môi trường PDA hình thành khuẩn lạc.
Trên môi trường PDA, khuẩn lạc của Cordyceps sp1. có hình tròn, các sợi nấm đan xen với nhau dày đặc và có màu trắng. Mặt sau của khuẩn lạc có màu hơi vàng đến vàng nâu theo thời gian sinh trưởng.
Tốc độ sinh trưởng khuẩn lạc Cordyceps sp1. trên môi trường PDA có độ dày 5 mm nuôi trong điều kiện tủ Colifom ở nhiệt độ 220C được thể hiện ở bảng 3.1.
Bảng 3.1. Sự sinh trưởng, phát triển của nấm Cordyceps sp1. trên môi trường PDA theo thời gian
Sau cấy (ngày) Đường kính khuẩn lạc (2R)
TB + SD (mm)
Chiều cao khuẩn lạc (H) TB + SD (mm) 5 10,22 + 1,88 1,63 + 0,2 10 20,10 + 3,27 2,20 + 0,3 15 30,48 + 4,71 1,06 + 0,21 20 37,88 + 5,88 1,18 + 0,26 25 42,89 + 5,29 0,88 + 0,38
Ghi chú:- Nhiệt độ nuôi 220C, ẩm độ tủ nuôi 65%. - SD: Độ lệch chuẩn.
Kết quả thực nghiệm từ bảng 3.1 cho thấy, đường kính khuẩn lạc tăng theo thời gian và đạt 42,89 mm sau 25 ngày nuôi. Ở thời gian đầu, tốc độ tăng trưởng theo chiều ngang của khuẩn lạc cao hơn thời gian sau (3 lần theo dõi đầu tăng gần 10 mm, lần thứ 4 tăng 7 mm và lần thứ 5 tăng 5 mm). Khả năng ăn rộng của khuẩn lạc bị giới hạn bởi môi trường, trong đĩa nuôi cấy nhiều điểm còn bị giới hạn bởi các khuẩn lạc khác, mỗi khuẩn lạc có phạm vi riêng và không sinh trưởng, xâm phạm, xen lẫn nhau.
Độ cao khuẩn lạc đạt cao nhất ở ngày thứ 10 (2,20 + 0,3 mm), sau đó giảm thấp dần (0,88 + 0,38 mm ở 25 ngày). Như vậy, kết quả thực nghiệm đã cho thấy nấm Cordyceps hoàn toàn có thể sinh trưởng tốt trên môi trường PDA.