40 mẫu cây mắa có biểu hiện triệu chứng chồi cỏ ựược thu thập trên ựồng ruộng tại các vùng bị bệnh ở Nghệ An, mẫu mắa biểu hiện triệu chứng trắng lá thu thập tại Bình Dương và 5 cây mắa không biểu hiện triệu chứng thu từ vùng Hà Nộị Các mẫu ựược xử lý, cắt lát siêu mỏng và chụp ảnh bằng kắnh hiển vi ựiện tử tại Viện Vệ sinh Dịch tễ TW theo phương pháp của Wongkaew and Fletcher (2004).
Học viện Nông nghiệp Việt Nam Ờ Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 43
3.2.1.1. Phát hiện Phytoplasma trong mô cây mắa biểu hiện triệu chứng chồi cỏ bằng kắnh hiển vi ựiện tử
Kết quả chụp ảnh hiển vi ựiện tử ựã phát hiện ựược các cấu trúc ựiển hình có dạng hình cầu, ô van của Phytoplasma trong mô cây mắa có triệu chứng chồi cỏ mà không phát hiện ựược trong mô cây mắa không có triệu chứng bệnh, kắch thước từ 108-181nm. Ngoài thể Phytoplasma, không phát hiện ựược bất kỳ tác nhân gây bệnh nào khác như vi rút, vi khuẩn, hay nấm trong mô cây mắa bị bệnh chồi cỏ (Hình 3.6).
Hình 3.6. Hình ảnh hiển vi ựiện tử chụp mô cây mắa biểu hiện và không biểu hiện triệu chứng chồi cỏ mắa thu tại Nghệ An (Viện Vệ sinh Dịch tễ TW, 2012).
Thể Phytoplasma ựược tìm thấy trong mô cây mắa biểu hiện triệu chứng chồi cỏ thu tại Nghệ An (Bên trái). Không phát hiện ựược Phytoplasma trong mô cây mắa khỏe thu tại Hà Nội (Bên phải). Trong cả 2 trường hợp không phát hiện ựược tác nhân gây bệnh nào khác như vi rút, vi khuẩn.
3.2.1.2. Phát hiện Phytoplasma trong mô cây mắa biểu hiện triệu chứng trắng lá bằng kắnh hiển vi ựiện tử
Học viện Nông nghiệp Việt Nam Ờ Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 44 Bằng phương pháp chụp ảnh dưới kắnh hiển vi ựiện tử, ựã ghi nhận ựược cấu trúc ựiển hình của Phytoplasma có kắch thước giao ựộng từ 158-199nm trong ống libe của cây mắa bị bệnh và có dạng hình cầu hay ô van (Hình 3.7).
Hình 3.7. Phát hiện các thể Phytoplasma trong mô cây mắa biểu hiện triệu chứng trắng lá.
Hình ảnh thể Phytplasma trong mô libe cây mắa biểu hiện triệu chứng trắng lá mắa quan sát dưới kắnh hiển vi ựiện tử (Bên trái). Không phát hiện thấy sự có mặt của Phytoplasma trong mô mắa khỏe (Bên phải).
Sự hiện diện của Phytoplasma trong mô các cây mắa bệnh là cơ sở khoa học ựể sử dụng kỹ thuật PCR với một số cặp primer ựặc hiệu chuyên dùng giám ựịnh Phytoplasma gây bệnh thực vật.