Cân khoảng 3g thân rễ Ngải tiên cho vào ống nghiệm to, thêm 1ml nước cất, đun sôi. Đối với cao sử dụng 1g và hòa tan bằng nước nóng. Lọc qua giấy lọc vào 1
ống nghiệm khác. Thêm 1ml dung dịch thuốc thử Felling A và 1ml dung dịch Felling B. Đun cách thủy sôi vài phút. Thấy xuất hiệu tủa đỏ gạch Phản ứng dương tính.
Kết luận sơ bộ: Thân rễ Ngải tiên chứa đường khử.
3.2.2.10. Định tính acid amin
Cân khoảng 3g thân rễ Ngải tiên cho vào cốc có mỏ, thêm 20ml nước cất, đun sôi vài phút. Đối với cao sử dụng 1g và hòa tan bằng nước nóng. Lọc qua giấy lọc vào 1 ống nghiệm khác. Thêm vài giọt thuốc thử Ninhydrin 3%. Đun cách thủy sôi vài phút. Thấy xuất hiệu màu tím Phản ứng dương tính.
Kết luận sơ bộ: Thân rễ Ngải tiên có chứa acid amin.
3.2.2.11. Định tính polysaccharid
Chuẩn bị dịch chiết như đối với phản ứng định tính acid amin. Chia dịch chiết vào 3 ống nghiệm:
Ống 1: 4ml dịch chiết + 5 giọt thuốc thử Lugol Ống 2: 4ml nước cất + 5 giọt thuốc thử Lugol Ống 3: 4ml dịch chiết.
Thấy màu ở ống 1 đậm hơn ống 2 và ống 3 Phản ứng dương tính. Kết luận sơ bộ:Thân rễ Ngải tiên chứa polysaccharid.
3.2.2.12. Định tính chất béo
Cân khoảng 3g bột thân rễ Ngải tiên vào cốc có mỏ 100ml, thêm 10ml ether dầu hỏa, bọc kín, ngâm 1 giờ. Lọc qua giấy lọc gấp nếp lấy dịch lọc. Nhỏ 1 giọt dịch chiết lên mảnh giấy trắng, sấy nhẹ cho bay hết hơi dung môi, không thấy vết mờ trên giấy Phản ứng âm tính.
Kết luận sơ bộ: Thân rễ Ngải tiên không chứa chất béo.
3.2.2.13. Định tính caroten
Cho vào ống nghiệm nhỏ khoảng 2ml dịch chiết ether dầu hỏa của thân rễ Ngải tiên, cô cách thủy đến cắn, nhỏ vài giọt H2SO4 đặc vào cắn. Không thấy xuất hiện màu xanh lá Phản ứng âm tính.
3.2.2.14. Định tính sterol
Cho vào ống nghiệm nhỏ khoảng 2ml dịch chiết ether dầu hỏa của thân rễ Ngải tiên, cô cách thủy đến cắn. Thêm vào ống nghiệm khoảng 1ml anhydride acetic, lắc kỹ cho tan hết cắn. Để nghiêm ống nghiệm 450, thêm từ từ H2SO4 đặc theo thành ống nghiệm. Quan sát thấy mặt phân cách có vòng tím đỏ, lớp chất lỏng phía trên có màu xanh lá Phản ứng dương tính.
Kết luận sơ bộ: Thân rễ Ngải tiên chứa sterol.
3.2.2.15. Định tính iridoid
Cân khoảng 3g bột thân rễ Ngải tiên vào ống nghiệm to, thêm 10 dung dịch HCl 1% ngâm trong 5 giờ. Lọc qua giấy lọc gấp nếp lấy dịch lọc. Cho vào ống nghiệm nhỏ 1ml dịch lọc trên, thêm 1ml thuốc thử Trim-Hill (10ml acid acetic + 1ml CuSO4 0,2% + 0,5ml HCl đặc). Không thấy xuất hiện màu xanh. Phản ứng âm tính.
Kết luận sơ bộ: Thân rễ Ngải tiên không chứa iridoid.
Kết luận sơ bộ chung: Sau khi tiến hành định tính sơ bộ 15 nhóm chất hữu cơ và cất tinh dầu thì ta thấy thân rễ Ngải tiên chứa Flavonoid, Saponin, Tinh dầu, Acid hữu cơ, Đường khử, Acid amin, Sterol, Polysarcarid.
Bảng 3.1: Kết quả sơ bộ định tính các nhóm chất trong thân rễ Ngải tiên Nhóm chất Phản ứng định tính Kết quả Kết luận 1 Phản ứng với hơi NH3 + Phản ứng với dd NaOH 10% ++ Phản ứng với dd FeCl3 5% + Phản ứng Cyanidin ++ Phản ứng diazo hóa + 2 Phản ứng Libermann + Phản ứng Legal - Phản ứng Baljet - Phản ứng Keller-Kiliani +
3 Saponin Quan sát hiện tượng tạo bọt ++ Có Quan sát hiện tượng phá huyết +
4
Phản ứng mở, đóng vòng lacton -
Không có Phản ứng diazo hóa -
Phản ứng chuyển dạng đồng phân cis- trans - Vi thăng hoa -
5
Phản ứng với dd FeCl3 5% + Phản ứng với dd gelatin 1% -
Phản ứng dd chì acetat 10% +
6 Anthranoid Phản ứng Borntraeger - Không có
7
Phản ứng với TT Mayer -
Phản ứng với TT Dragendorff -
Phản ứng với TT Bouchardat -
8 Acid hữu cơ Phản ứng với Na2CO3 + Có
9 Đường khử Phản ứng với TT Fehling A và Fehling B ++ Có
10 Acid amin Phản ứng với TT Ninhydrin 3% ++ Có
11 Chất béo Tạo vết mờ trên giấy - Không có
12 Caroten Phản ứng với H2SO4 đặc - Không có
13 Sterol Phản ứng Liebermann + Có
14 Polysaccharid Phản ứng với TT Lugol ++ Có
15 Iridoid Phản ứng với thuốc thử Trim-Hill - Không có Không có Không có Flavonoid Coumarin Tanin Alcaloid Có Glycoside tim Không có