Ảnh hưởng của dung dịch đệm đến hoạt tính enzyme trích ly từ nộ

nội tạng cá lóc

Theo Price và Steven (2002), điều chỉnh pH trong quá trình trích ly là một trong những phương pháp hiệu quả làm tăng khả năng hòa tan của enzyme vào dung môi, do đó tăng hiệu suất thu nhận. Mỗi enzyme có giá trị pH thích hợp cho quá trình trích ly. Từ kết quả nghiên cứu của Tran et al.

(2014) đã xác định pH thích hợp cho quá trình trích ly enzyme lipase từ nội tạng cá lóc là 6. Tiến hành trích ly bằng 4 loại dung dịch đệm có pH 6 theo tỉ lệ nguyên liệu với dung môi là 1:4 ở nhiệt độ trích ly 45C và thời gian trích ly 3 giờ. Kết quả thí nghiệm được trình bày ở Bảng 4.3.

Bảng 4.3: Ảnh hưởng của dung dịch đệm đến hoạt tính enzyme lipase trích ly từ nội tạng cá lóc

Loại dung dịch đệm Hoạt tính enzyme lipase (U/g, CKNL)

Nước cất 9,280,30a

Đệm phosphate 13,560,27c

Đệm citrate 9,900,26b

Đệm acetate 10,120,19b

(Các chữ cái khác nhau trong cùng một cột biểu thị sự khác biệt có ý nghĩa của các nghiệm thức khảo sát theo kiểm định LSD ở mức độ tin cậy 95%)

Từ kết quả thí nghiệm cho thấy, sử dụng dung dịch đệm phosphate pH 6 cho hoạt tính enzyme lipase cao nhất đạt 13,560,27 (U/g, CKNL), trích ly bằng nước cất cho hoạt tính lipase thấp nhất là 9,280,30 (U/g, CKNL). Đồng thời, hoạt tính enzyme lipase không có sự khác biệt về thống kê khi sử dụng đệm citrate (9,900,26 U/g, CKNL) và đệm acetate (10,120,19 U/g, CKNL). Trong nghiên cứu trích ly, tinh sạch và xác định tính chất của enzyme lipase từ cá đối xám (Liza parsia Hamilton, 1822) cho thấy cả hai enzyme lipase lip-1 và lip-2 cho hoạt tính ổn định hơn khi trích ly bằng đệm phosphate so với trích ly bằng đệm Tris-HCl (Islam et al., 2008). Theo Poonsuk và Thiraratana

(2008) cho thấy dung dịch đệm sử dụng trong trích ly ảnh hưởng đáng kể đến hoạt tính enzyme lipase và protease, hoạt tính enzyme lipase cao nhất khi trích ly bằng đệm carbonate-bicarbonate đối với loài cá ngừ Thunnus albacares và

Katsuwonus pelamis, trong khi đó đệm Tris-HCl phù hợp cho việc trích ly

lipase từ cá ngừ Thunnus tonggol. Qua đây khẳng định những enzyme lipase có nguồn gốc khác nhau sẽ có dung dịch đệm thích hợp khác nhau.

Dựa trên kết quả khảo sát, đệm phosphate với pH 6,0 được sử dụng làm dung môi ly trích enzyme cho các khảo sát tiếp theo.

Luận văn tốt nghiệp Đại học khóa 37 Trường Đại học Cần Thơ