Nội dung 2: Nghiên cứu tính ổn định của MVVAC ở các điều kiện, nhiệt độ
bảo quản khác nhau. Các điều kiện, nhiệt độ bảo quản được lựa chọn theo khuyến cáo của WHO (Bảng 1.3): 2 - 80C; 250C; 370C; vắc xin sau hồi chỉnh, bảo quản ở nhiệt độ 2-80C.
2.4.1. Đánh giá tính ổn định về chất lượng của các loạt MVVAC sản xuấttừ năm 2009 đến năm 2013 từ năm 2009 đến năm 2013
* Cỡ mẫu và cách chọn mẫu: Tất cả các loạt vắc xin sản xuất từ năm
2009 đến năm 2013 được lấy mẫu để kiểm tra chất lượng. Tổng số 42 loạt,
mỗi loạt sản xuất 30264 lọ (Từ năm 2009 đến năm 2013, POLYVAC sản xuất MVVAC với công suất tối đa: 13 giá đựng, mỗi giá 6 khay, mỗi khay 338 lọ).
Trong đề cương nghiên cứu dự kiến mỗi năm MVVAC được sản xuất từ 1-2 đợt, mỗi đợt sản xuất chọn 3 loạt vắc xin để đưa vào nghiên cứu, dự kiến 18 loạt. Tuy nhiên, theo các tài liệu của WHO, để có được sự đánh giá đúng đắn về tính ổn định của vắc xin cần có số liệu của ít nhất 20 loạt, con số lý tưởng cho việc đánh giá này là 40 loạt . Vì vậy, tất cả các loạt sản xuất từ năm 2009 đến năm 2013 đã được đưa vào nghiên cứu để tăng cỡ mẫu.
Loạt M-0209 không được đưa vào nghiên cứu do trong quá trình sản xuất máy đông khô gặp sự cố. Loạt M-0509 cũng không đưa vào nghiên cứu do được sản xuất từ bán thành phẩm của Viện Kitasato, nghiên cứu này thực hiện trên các loạt do POLYVAC sản xuất từ những công đoạn đầu tiên đến bán thành phẩm và thành phẩm.
* Phương pháp thu thập số liệu và các chỉ số đánh giá: Ngay sau khi
sản xuất, mỗi loạt vắc xin lấy 60 lọ. Tiến hành các thử nghiệm trong phòng thí nghiệm để đánh giá chất lượng từng loạt MVVAC để xác định độ đồng đều về chất lượng thông qua các chỉ số:
Nhận dạng kháng nguyên sởi trong vắc xin bằng phương pháp miễn dịch huỳnh quang,
Tính công hiệu vắc xin qua nồng độ vi rút có trong vắc xin (Công hiệu) bằng phương pháp tạo đám hủy hoại tế bào (Plaque Forming Unit: PFU),
Xác định tính ổn định nhiệt của vắc xin khi bảo quản ở 370C/7 ngày, Xác định tính vô trùng của vắc xin bằng phương pháp màng lọc, Xác định tính an toàn trên động vật thực nghiệm,
Xác định độ ẩm tồn dư trong bánh vắc xin đông khô bằng phương pháp xác định hao hụt trọng lượng của vắc xin khi làm khô,
Quan sát trạng thái lọ vắc xin,
Tính độ lệch trọng lượng giữa các lọ vắc xin trong cùng 1 loạt (độ lệch trọng lượng),
Đếm số hạt không tan trong vắc xin (Hạt không tan), Đo pH.
Các chỉ số nhận dạng, công hiệu, độ ổn định nhiệt, độ ẩm tồn dư, an toàn chung, vô trùng, quan sát trạng thái thực hiện theo hướng dẫn của WHO . Các chỉ số độ lệch trọng lượng, hạt không tan có trong vắc xin sau hoàn nguyên, pH là các chỉ số được làm thêm theo khuyến cáo của các chuyên gia Viện Kitasato do quy trình sản xuất MVVAC mới đưa vào hoạt động, chưa đánh giá được tính ổn định trên các chỉ số này.
Phân tích số liệu:
Các chỉ số: Nhận dạng, tính vô trùng, tính an toàn chung, trạng thái vắc xin là các chỉ số định tính. Kết quả đánh giá mỗi loạt MVVAC gồm hai giá trị: Đạt hoặc không đạt.
Các chỉ số: Công hiệu, độ ổn định nhiệt, độ ẩm tồn dư, độ lệch trọng lượng, hạt không tan trong vắc xin, pH là các chỉ số định lượng. Với mỗi chỉ số này thực hiện tính toán số liệu và vẽ biểu đồ kiểm soát (biểu đồ Shewhart) theo các bước:
Bước 1: Tính toán các giá trị trung bình (TB), độ lệch chuẩn (SD), hai lần độ lệch chuẩn (2SD), ba lần độ lệch chuẩn (3SD), TB ± SD, TB ± 2SD, TB ± 3SD các lần thực hiện thử nghiệm kiểm tra chất lượng 42 loạt vắc xin.
Bước 2: Vẽ biểu đồ Shewhat theo các số liệu đã tính toán được .