sâm
Phân lập vi khuẩn acid acetic a. Mục đích
Phân lập các dòng vi khuẩn acid acetic lên men thủy sâm.
b. Phương pháp thực hiện
Môi trường YPGD bổ sung 0,5% CaCO3 và 4% ethanol, cho vào mỗi ống nghiệm pha loãng 9 mL nước muối sinh lý (NaCl 0,85%) khử trùng 121ºC trong 15 phút.
Lắc đều mẫu thủy sâm, pha loãng mẫu nồng độ 10-1 đến 10-7.
Hút 200 L mẫu pha loãng ở các nồng độ thích hợp cấy trãi lên môi trường YPGD bổ sung 0,5% CaCO3 và 4% ethanol.
Chuyên ngành Vi Sinh Vật Học 31 Viện NC & PT Công nghệ Sinh học
Quan sát chọn các khuẩn lạc tạo vòng halo trên môi trường.
Cấy ria nhiều lần khuẩn lạc trên môi trường YPGD bổ sung 0,5% CaCO3 và 4% ethanol cho đến khi đạt dòng thuần.
Định danh sơ bộ vi khuẩn acid acetic a. Mục đích
Định danh các dòng vi khuẩn acid acetic lên men thủy sâm.
b. Phương pháp thực hiện
Chuẩn bị môi trường YPGD loãng bổ sung NaOH 0,1N đến khi môi trường đạt pH 7.
Pha dung dịch Bromothymol blue với công thức 0,1 g Bromothymol blue, cho vào 16 mL NaOH 0,1N, thêm nước vừa đủ 250 mL.
Lấy một lượng vừa đủ khuẩn lạc các dòng đã thuần cho vào môi trường.
Nhỏ 1-2 giọt dung dịch Bromothymol blue đã pha (môi trường chuyển sang màu xanh).
Ủ ở 30ºC trong 24 giờ quan sát (tất cả đều chuyển từ màu xanh lam sang vàng).
Tiếp tục ủ ở 30ºC trong 48-72 giờ (cứ 24 giờ quan sát một lần). Môi trường vẫn màu vàng vi khuẩn thuộc giống Gluconobacter.
Môi trường chuyển sang màu xanh vi khuẩn thuộc giống Acetobacter.