Dựa trín kinh nghiệm dđn gian cũng như câc nghiín cứu đê được công bố trước đđy [1 ], [2], [5], [6], chúng tôi đê tiến hănh lựa chọn vă thu thập câc mẫu thực vật có khả năng khâng viím từ một số địa phương gồm: Hă Nội, Phú Thọ, Hă Tđy, Hưng Yín. Câc mẫu thu được sau đó được GS.TS. Phan Kế Lộc giúp định tín khoa học. Thực vật được sấy khô ở 50°c, nghiền thănh bột mịn vă chiết với dung môi methanol - nước (4:1) theo tỉ lệ lg nguyín liệu: 10 ml dung môi trẽn hệ thống chiết siíu đm. Sau đó,
phần dịch chiết sẽ được thu lại vă tiến hănh quay cất chđn không để thu cặn chiết. Câc cặn chiết của câc đối tượng thực vật nghiín cứu tiếp tục được hòa tan trở lại trong câc dung môi thích hợp vă sử dụng trục tiếp cho câc thí nghiệm săng lọc câc chất khâng vicm. Danh sâch câc dịch chiết thực vật lựa chọn cho nghicn cứu săng lọc được trình băy ở bảng 2.1.
2.1.2. Hóa chất
- Câc thănh phần môi trường nuôi cấy DMEM vă câc thănh phần liín quan như FBS (fetal bovine serum), trypsin, khâng sinh được mua từ hêng Invitrogen, Hoa Kỳ.
- Lipopolysaccharide (LPS) được mua tù’ hêng Sigma
- Câc kit ELISA định lượng cytokine IL6, IL10, TNFa, IFNy được mua từ hêng BD Biosciences, Hoa Kỳ.
- Kit đếm tế băo (Cell Counting Kit-8 - CCK-8) được mua từ hêng Dojindo Laboratories, Kumammoto, Nhật Bản.
- Khâng thể p38 tổng số vă P-p38 mua từ hêng Invitrogen, Hoa Kỳ.
- Chuột Swiss được mua từ Viện vệ sinh dịch tễ Trung ương.
- Câc hoâ chất còn lại đều đạt độ tinh khiết dănh cho phđn tích.
được lựa chọn cho nghiín cứu săng lọc câc chất khâng viím sử dụng mô hình TLR4