Kế từ khi TLR của động vật có vú được chứng minh lă những yếu tố kích thích cơ bản của hệ thống miễn dịch bẩm sinh thì việc khâm phâ ra nhũng mầm bệnh vi sinh vật được thực hiện thông qua câc thụ thể năy TLR. TLR có thể nhận dạng một phổ rộng câc vi sinh vật vă nhanh chóng sản xuất ra câc chemokine, cytokine, interferon vă phản ứng oxy hóa khâng lại vi sinh vật để bảo vệ vật chủ chống lại sự xđm nhập của mầm bệnh. Hơn nữa, tín hiệu TLR có thể kết nối được với nhiều bệnh khâc nhau. Câc nhă nghiín cún hy vọng rằng kiến thức sinh học về TLR sẽ cho phĩp thiết kế câc liệu phâp điều trị viím mới, mang lại hiệu quả trong điều trị bệnh. Nhiều công ty dược phấm vă phòng thí nghiệm đê tổng hợp được những phđn tử nhỏ, lă những chất ức chế hoặc lă phối tử đặc hiệu của TLR, chang hạn như CpG7909, imiquimod, resiquimod hêy chlorõquinẽ [10] vă đê chứng minh được chung rđt đn toăn khi sử dụng cho con người. Đặc biệt, CpG đê được sử dụng thử nghiệm lăm tâ dược vacxin cho rất nhiều bệnh của người. Điều thú vị lă dựa văo nhũng tín hiệu của thụ thể TLR4, một số họp chất từ thực vật cũng đê được chứng minh có khả năng điều hòa đâp ứng viím vă điều trị hiệu quả chuột bị nhiễm khuẩn nặng vă choâng nhiễm trùng. Ví dụ câc chất tâch chiết từ nhđn sđm Hăn Quốc như Rbl, Rb2, Rc, hợp chất K (C-K) [15],
[44] hay acrtiin từ Forsythia suspensa [26] lă những chất đê được công bố có khả năng điều hòa câc tín hiệu viím như cytokine, quâ trình phospho hóa MAPK (mitogen- activated protein kinase), phản ứng oxy hóa sinh ROS thông qua tín hiệu của thụ thế TLR4. Câc dịch chiết của Amaranthus sp,
Erỵngium campestre, Thymuspulegioides vă Reichardia picroỉdes sử dụng mô hình nghiín cứu
khâng viím TLR4 in vitro [33]. Trong một nghiín cứu tương tự, dịch chiết thực vật Angelica sinensis cũng đê được chứng minh lă có khả năng ức chế sinh protein- 2 (MIP-2) vă nitric oxide (NO) [12] hay acid rosmarinic chiết xuất từ Prunella vulgaris có khả năng ức chế sinh prostaglangin E2 vă NO (nitric oxide) trong tế băo macrophage RAW 264.7 của chuột khi kích thích đâp ứng viím thông qua LPS [19]. LPS Macrophage có TLR4 được cảm ứng Đo mức độ ức chế chất trung gian giải phóng ra Đo tín hiệu viím đặc hiệu I Hình 1.9. Mô hình săng lọc sử dụng thụ thể toll - like (TLRs) l Tế băo macrop Dịch chiết tiềm năng Dịch chiết thực vật
Ớ mô hình săng lọc chất khâng viím thông qua thụ the TLR4 (Hình 1.9), tế băo macrophage sau khi được được xử lý với dịch chiết thực vật sẽ gđy viím cảm úng bằng LPS, lă phối tử đặc hiệu của TLR4. Việc đo mức độ ức chế chất trung gian giải phóng ra sẽ cho phĩp xâc định được dịch chiết tiềm năng (có khả năng có hoạt tính quan tđm). Neu hăm lượng chất trung gian IL6, TNFa sinh ra bị giảm đi sẽ cho phĩp kết luận dịch chiết thực vật có chứa chất khâng viím tiềm năng vă chất năy có tâc dụng khâng viím theo con đường thụ thể TLR4.
Nhìn chung, ba mô hình săng lọc vă nghiín cún câc chất khâng viím việc sử dụng câc thụ thể Dectin-1, glucocorticoid, TLR vă gene mê hóaluciferase có gắn NF-&B đang được sử dụng nhiều cho mục đích săng lọc vă nghiín cứu cơ chế khâng viím in vỉtro ở câc phòng thí nghiệm quốc tế hiện nay. Đđy lă những mô hình nghiín cứu in vỉtro khâ hiện đại, đơn giản vă chính xâc ở mức phđn tử. Một điểm ưu việt nữa của câc mô hình săng lọc năy lă chúng cho phĩp săng lọc nhanh vă hiệu quả một số lượng mẫu lớn trong thời gian ngắn do việc săng lọc có thể thực hiện với thế tích mẫu nhỏ trín đĩa ELISA 96 giếng. Đđy chính lă cơ sở để có thể phât triến câc mô hình săng lọc năy trín hệ thống săng lọc nhanh HTS (hight throughput screening system).